ただいま、ページを読み込み中です。5秒以上、このメッセージが表示されている場合、Adobe® Reader®（もしくはAcrobat®）のAcrobat® JavaScriptを有効にしてください。 Adobe® Reader®のメニュー：「編集」→「環境設定」→「JavaScript」で設定できます。「Acrobat JavaScriptを使用」にチェックを入れてください。日皮会誌:90 (3),249-253, 1980 C昭55）なお、Adobe® Reader®以外でのPDFビューアで閲覧されている場合もこのメッセージが表示されます。Adobe® Reader®で閲覧するようにしてください。固定薬疹とリンパ球幼若化現象 −その経時的変化についてー浅井芳江鈴木伸典細井洋子演田稔夫要旨ら，内服誘発試験には多少とも危険性を伴い，とりわけ固定薬疹患者14名について内服誘発試験を行った後，重症例では適用しにくいためin 経時的に微量全血培養法を用いてリンパ球幼若化試験が急務とされている．我々は微量全血培養法２)を用いて（ＬＴＴ）を施行した結果，原因薬剤内服後３∼４時間後薬疹患者末梢血リソパ球を原因薬剤存在下に培養したでは著明なリンパ球幼若化現象が観察されたが，固定薬際，比較的高率に有意のリンパ球幼若化反応が観察され疹の再現する8∼24時間後ではＬＴｒが全例陰性化しることを報告したs).その際，採血は内服誘発試験直後た．しかしこの時期において, vitro の検査法の確立 PHAに対する反応性にあるいは薬疹発生期は避け，皮疹の消初を確認してからは変化が見られず，また患者血清中にＰＨＡ刺激応答抑採血したが，経験的に皮疹の消槌期にＬＴＴの陽性率が制因子も存在しなかった．さらに誘発１週間後では約半上昇することを認めていたからであった．しかしLTT 数例においてＬｒrの陽性化が認められた．以上より薬が皮疹の出現期，消槌期などの時期によって変動する剤アレルギーのin vitro の診断にＬＴＴを用いる際にことに関して，これまで余り注目されておらず，または，皮疹発生期を避け，皮疹の消槌後にＬＴｒを施行すＬＴＴが皮疹の出現期において薬剤刺激に対して陰性化るのが好ましいと結論された．するとの報告4)がある一方, Gimenez-Camarasaら5)は皮疹消槌期にはＬＴＴが陰性化するため，発症後２∼３時はじめに間以内に採血する必要性を強調しており，必ずしも一定薬疹の発生機序に関してはまだ不明な点が多いが，薬した見解は得られていない状態である．これに関しては疹患者においてその原因薬剤を確定することは重要な問ＬＴＴを行う時期とともに，薬疹発生期の個体の免疫応題であり，種々の検査法が試みられている．すなわち皮答の変化も問題となろう．内反応，貼布試験skin 今回我々は固定薬疹患者について内服誘発試験を行っらにin window 法，内服誘発試験，さ vitro での方法としてlymphocyte tion test(以下ＬＴＴと略す), 球凝集試験, transforma- MIFの産生試験，赤血 radioimmunoassay,肥畔細胞の脱穎粒現象た後，経時的に患者末梢血を採取して微量全血培養法によるＬＴＴを施行し，薬剤刺激によるリンパ球幼若化反応の変化を観察し，あわせてＰＨＡに対するに／パ球を用いる方法やヒスタミンの遊離試験などが検討されての反応をも同時に観察した．さらに薬疹発生期の患者血いる1).それらの中では現在のところ，内服誘発試験に清中のリンパ球幼若化を抑制するＰＨＡ刺激応答抑制優る方法はまだ確立されるに至っていない，しかしなが因子(以下PHA-inhibitorと略す)についても検討を加えたのでここに報告する．大阪市立大学医学部皮膚科学教室（主任廣田稔夫対象および実験方法教授） Yoshie Ａ･対象 Asai, Shinsuke 画io Hamada fixed drug including after Suzuki, Yoko : Lymphocyte Hosoi and transformation eruption―changes clinical exacerbation at various and the challenge 昭和54年８月２日受理別刷請求先:（〒545)大阪市阿倍野区旭町１丁目Ｔｏ一 test in stages remission 固定薬疹患者14名を検討の対象とした．このうち男性は５例，女性は９例で，年齢は３歳から56歳におよんだ．諸検査施行にあたり副腎皮質ホルモソなどの免疫機構に影響を与える治療は行っていない. Ｂ･方法５番７号大阪市立大学医学部皮膚科学教室浅 1)微量全血培養法によるＬＴＴ２) 井芳江患者末梢血液をヘパリン添加のもとに採血し，その 250 浅井芳江ほか第１表固定薬疹患者の原因薬剤に対する経時的ＬＴＴ,ＰＨＡに対するＬＴＴ，およびPHA-inhibitor ｉ㎜㎜㎜㎜㎜㎜㎜㎜㎜㎜㎜㎜㎜㎜㎜レ㎜㎜㎜㎜㎜㎜㎜㎜ J ■ - 〃 V U 〃 - - W ･ 1￨る薬剤に対するＬＴＴ（SI）年齢症例性原因吏剤皮疹｜生期寛解期｜ =････＝=･･---Ｊ K. K. １ -１２ - jj=-･･= 56 Ｔ･-一一 M ３ 164 22 ･=-=･Ｔ一一Ｋ一一 − ＦＭ４ -¶-♂Ｒ=｡ 18 女 -一男･=-一･･-･･･= 14 ㎜㎜㎜㎜㎜㎜■■■■㎜k･=･= LＯ ' tｃＳ 37 -一一Ｋ一一 -一一Ｍ一一皿単発 -一一一一一一 Tetracycline 単発 148 %･-¶〃-¶･･sM-〃単発 -- 38 一一一一一一 Phenobal -一一一一一一 Sedes -一男 -一一一一一一一一･ Tetracycline --一一一一一一 ‥−一一一一 Phenobal Ｉ一一ＫＫ − Ａ９一一一一 −= 10 Ｍ一一 ←¶ Ｔ一一Ｙ 11 ¶=-r匹 33 -一一 34 − Ｙ -一一･･−一一 15 − Ｓ一一 52 ■■･･㎜㎜---♂9--･･･J■･■■■■■■■･㎜㎜■■■㎜･･男 =--･II Sulfaisoraezol ..l---一皿皿--Jj帰㎞･･--a-･･--･--･･･-?りｰ一･= 女 Pyrabital ‥-一一一一 !77 -･一- - 単発 119 166 ‥一一多発 -一一 189 -一一一一一一多発 109 !67 ♂J-ゝI-･〃rW-㎜多発皿 "-〃-￢-･一一 170 92 Ｋ一一一一- 180 178 13 − 39 −…… Ｎ 180 Tetracycline ■■㎜㎜㎜㎜■㎜■■ 女Ｆ 118 (％) 3587 5294 33 一一25 2418 4488 2907 −1 17 29 4982 2710 37 119 147 一一 192 171 --･-■J 130 一一 74 184 一一一一 − Ｋ一一一一｡ t37 槌期発生箕 148 1944 - - 115 女 12 158 112 144 94 199 一一一一一多発 116 一一･多発 -一一一一一一 -･-･･㎜･女 174 162 135 111 単発 ……−一一 Aspyrin ８ 199 -----･･− -♂ 男 20 ７ Carbamazepine 一一- ---w一一一一-4-Rw − ＴＥ PHAinhibil 皮疹の 36 I−･・＝･･Ｉ--IIWW--¶--￢=--II−−¶= Sulfaisomezol -四J-■= 多発 73 -108 175 一一 2638 −−〃− 1890 0.1mlにイーグルＭＥＭ培養液およびＰＨＡあるいはこれをイーグルＭＥＭ培養液で2×lOVmlに調整し，そ原因薬剤を種々の濃度で添加して全量を1.0m!とし，の0.5mlずつを培養瓶に分注した，その各々に患者血 - ＣＯ．細胞培養装置中に入れ37゜Ｃで５％Ｃ０,を含む空気清0.2mIを加え，さらにイーグルＭＥＭ培養液0.3mI を通じながら48時間培養し，培養終了24時間前に1μCi を加えて全量を1.0mlとした後, の'H-thymidineを添加し，酸不溶性分圃に取り込まれ 1/1000稀釈になるように添加し，Ｃ０２細胞培養装置内でた放射性活性を液体シンチレーションカウンターで測定 72時間incubateした．培養終了24時間前に'H-thymidine した. PHAまたは薬剤を添加しない場合のｃＰｍに対を1.0μCi加え酸不溶性分画への'H-thymidineの取りする百分率を計算しStimulation Index （SI）として表現した．薬剤刺激に対するＬＴＴではSI 160以上を陽５ PHA-Pを最終濃度人みを測定した．この際，患者血清の代わりに健常成人ＡＢ型血清を加えて対照実験を行い，両者におけるPHA 性とした. 刺激に対する応答を比較して抑制因子の存在の有無を検 2）ＬＴＴ施行時期討した．抑制率は． cpm of culture treated by patient ;Ｗまｅ (1￣ cpm of the treated b＼こ))(100(％) control serum 初診時，問診で原因薬剤を推定し，皮疹発生後２週間以上経過した時期（皮疹寛解期）に推定薬剤を添加してＬＴＴを施行した．その後，内服誘発試験を行い薬剤内服，① ３∼４時間後（皮疹発生前期），② 8∼24時で表わした．結果間後（皮疹発生期），③ １週間後（皮疹消槌期）の３ 1. 固定薬疹患者について施行した原因薬剤に対する回にわたり，薬剤刺激に対するＬＴＴを施行した．ＬＴＴの経時的変化については第１表および第１図に示 3) PHAに対するLTT す．その原因薬剤は鎮痛鎮静剤，サルフア剤，抗生物質皮疹発生期および皮疹消槌期においてＰＨＡに対するなど種々のものが含まれている．ＬＴＴを施行し，両時期の反応の差を検討した. 皮疹寛解期では12例中６例(50％)が陽性であり，内 PHA-P を最終濃度1/1000希釈になるよう添加した. 訳は単発例６例中３例，多発例も６例中３例が陽性を示 4) PHA-lnhibitor した.SIは多発例の方が単発例よりも高値を示す傾向原因薬剤内服後8∼24時間（皮疹発生期）の時斯に患にあり，単発例でも頻回に固定薬疹を生じている症例者末梢血液を採取し，血清を分離して凍結保存した．次 (第２例)において高値を示している．に正常人リンパ球をFicoll-Conray法6）を用いて分離し，誘発直後の皮疹発生前期では殆んどの症例で既存皮疹固定薬疹とリンパ球幼若化現象 251 SI 10000 5000 皮疹発生期第２図固定薬疹患者の皮疹発生期および消極期におけるＰＨＡに対するＬＴＴの推移第１図固定薬疹患者の原因薬剤に対する経時的なＬＴＴの推移い．内服誘発試験は多少とも危険性を伴りので，これに部に異和感や癈埠感を訴え，その約2/3の症例において代る方法とくにin はすでに潮紅が認められる．この時期では10例中９例 vitro の系における診断法の確立が期待される. （90％）が陽性を示し，最も陽性率が高い．レルギーの患者についてペニシリソによる末梢血リンパ皮疹発生期では全例に既存皮疹部に潮紅が認められ固球幼若化現象を誘導して以来，多くの研究者がリンパ定薬疹の再現を確認した．しかしＬＴＴでは全例陰性で球の幼若化を形態学的さらにはリンパ球幼若化に伴うあった．ＤＮＡ合成を'H-thymidineの取り込みを指標として検誘発後１週間目の皮疹消槌期では皮疹発生期に比しお討しているが，その結果は陽性率の低いものからほとんおむねSIが上昇する傾向がみられ，多発例では特にそど100％に近い成績を示した報告まである． 1963年Hirschhoraら7)がペニシリソアの傾向が強く，４例全例が陽性化している，逆に単発例我々は既に固定薬診，麻疹型および多型紅斑型の薬疹では３例全例ともなお陰性であった．において患者末梢血リンパ球を自己血清存在下で薬剤と２．皮疹発生期および皮疹消槌期におけるＰＨＡに対共に培養した際，有意の'H-thymidineの取り込みが観するリンパ球の幼若化を検討した結果は第１表および第察されたことを報告した2).さらに，皮膚に特異的な物２図に示す通りである．両時期において有意の差は認め質が薬疹発生に関与する可能性を検索する意味で，異種られなかった．ではあるが，モルモット皮膚分画を作製し，自己血清の３．皮疹発生期における患者血清中のPHA-inhibitor 代りにリンパ球培養中に添加しＬＴＴを施行したとこを検討した結果では，正常人シンパ球に対して30％以上ろ，皮膚可溶性分画添加群において有意のリソ祁球幼若の抑制率を陽性にとれば，８例中２例のみが陽性を示し化が認められた．とくに固定薬疹については，可溶性分た．．画をSe{rfiadex G-lOOカラムクロマトダラフィーにて得考按られた３つの分画中第１分画が自己血清と同様なリンパ薬剤アレルギーにおける原因薬剤の検索は重要な問題球幼若化反応を誘導する事実が判明した8)9)以上の結であり多くの試みがなされているが，現在のところ薬剤果より，薬疹患者についてＬＴＴを施行し，陽性の反応の内服による誘発試験に代り得る確実な方法はまだなが得られれば，添加された薬剤が原因薬剤であると決定 252 浅井芳江ほかされ得るのではないかと考えた．その際，ＬＴＴは皮疹寛のために原因薬剤を加えなくてもリンパ球培養液中脳患解期に行ったが，実際の薬疹診断にあたっては可能な限者血清を加えるだけでリンパ球の幼若化が引き起こされり早期に採血し，確実に診断できる方が望ましい．しかた可能性が強いものと考えられる．我々の場合，内服誘し皮疹発生期については，リンパ球の異常反応か生じや発量が常用量の1ﾉ5∼1/3であり，血中濃度が充分でないすいことや10)薬剤によるリンパ球幼若化反応が認めらため自己血清添加のみでリンパ球の幼若化が起こるに至れないとの報告もあり3）,経時的にＬＴＴを行ってその反らなかったものと考えたい．応の変化を検討することは意義深いことと考えられる．皮疹発生期においてはＬＴＴは全例陰性化する．この固定薬疹患者に内服誘発試験を行うと，多くの場合内理由の１つとして血清中に何らかのリンパ球幼若化を抑服後３時間以内に既存皮疹部の異,和感ないし癈作を訴制する因子が産生された可能性が考えられるが，皮疹発え，４∼５時間で固定薬疹が再現する．従って固定薬疹生期と消槌期において末梢リンパ球を薬剤の代わりに非の発生は単純に即時型あるいは遅延型の過敏症と限定し特異的なmitogenであるＰＨＡで刺激した際には両時て解釈することはできず，免疫学的に検討する場合は細期においてその反応に有意の差は認められなかった．こ胞性免疫のみならず体液性抗体やchemical のことは末梢血リソパ球が原因薬剤に対してのみ不応と検討の必要が生じてくる. mediatorの Giraenez-Caraarasaら5）は固定薬疹出現後２∼３時間以内にＬＴＴを行い，有意のリなっているのか，または薬剤とimmune competent cells との反応を特異的に阻止するinhibitorの産生を示唆すンパ球幼若化反応を認めるとともに，同時に採血した患るものであって, 者血清をリンパ球培養液中に添加しても高いリンパ球幼 inhibitorが産生されている可能性を否定するものと考若化率を得ている．その原因として固定薬疹出現期の患えられ．このことは皮疹出現期の患者血清中に正常人者血清中にリンパ球の幼若化を促進するhumoral の存在を想定しており，このhumora! agent agent が患者リ PHA- inhibitor の如き，非特異的なのリンパ球のＰＨＡに対する刺激応答を抑制する因子 (PHA-inhibitor)が８例中２例にしか認められなかったンパ球に対してのみ幼若化を引き起こすとしている．ことにより示唆される．今回の微量全血培養法による検討では，皮疹寛解明にまた，固定薬疹のin おいては12例中６例すなわち50％の陽性率であったのに散日後に再度内服誘発を行うと皮疹の再燃が見られず，対し，原因薬剤内服後３∼４時間後の末梢血リンパ球一時的な脱感作が成立したとの報告もある11)従って皮を原因薬剤で刺激すると10例中９例（90％）に著明な疹出現期においてＬＴＴが陰性化するのは，この時期のリンパ球の幼若化か認められた．この事実はGimenez- 患者末枡血中に薬剤に対して感作リンパ球が幼若化する Camarasaらs）によっても報告されているが，その理由のを特異的に抑制する因子が存在する可能性も否定できとしては皮疹寛解期には末梢血中の免疫記憶細胞ないしないが，末梢血中の感作りソパ球ないしimmune immune petent cellsが一時的に減少したと考えるか，または幼 competent cellsが少ないのに対し，誘発する vitro test においても内服誘発 com- ことによりリンパ節などからそれらの細胞が末梢血中へ若化可能な感作リンパ球がすべて薬剤に応答し，反応し誘導された可能性が強く推測される．一方，原因薬剤をてしまったため一種の不応期となってしまったためと考加えていないcontrolでは各時期でのｃｐｍ値に有意のえるのが妥当であろう．差はみられず，自己血清の存在のみによるリンパ球幼皮疹発生後１週間すなわち皮疹消槌期ではＬＴＴは７若化反応は認められないものと解釈される．すなわち例中４例(57％)が陽性を示し，皮疹寛解期の陽性率と Gimenez-Camarasaらのいうhumoral 大差はないものの，個々の症例を比較すれば，多発例の agentの存在は今回の我々の実験結果から否定的と考えられた．彼らは内方が早く陽性化することは興味深い．モれらの免疫学的服誘発試験で原因薬剤を常用量服用させており，また皮な検討はさらに症例数を追加し，また今後の長期にわた疹発生後２∼３時間以内ではおそらく原因薬剤の血中濃るＬＴＴの経過を追うことにより可能となろう．度が高いためその時期の患者血清中にはかなりの量の薬本論文の要旨は昭和53年５月19日∼2工日の第77回日本剤ないし薬剤十carrierのcomplexが含まれており，そ皮膚科学会総会において発表した．文献 1) Girard, J.P., Cattin, S. & Cuevas, M.: in allergicdrug reactions,Am. 74-84, 1976. munological mechanisms fm･ and diagnostic tests Clin. Res., 8: 固定薬疹とリンパ球幼若化現象 2）溝口靖紘，山田尚，森沢成司：微量の末梢血 and 全血を用いるblastoid transformation ＭＩＦ産生試験，免疫実験操作法Ａ，第１版，日本免疫学会，金沢，昭50, および一特に皮膚分画のＣａ昭51. 9) 田稔夫，森沢成司：薬剤アレルギー性肝炎の研 Y., 究一薬剤carrierに関する検討．日本消化器病 induced 学会雑誌，72 pheral ＆Ｄｅ Moragas, ガed., 292: 6) Conray 昭50. J.M。Garcia-Calderon, J.M.:Lymphocyte tion test in fiχed drug 819-821, 400-Ficoll 7) Hirschhorn, K., Firschein, L. & P. transforma- eruption,Ｎｅｕi E叩･ヱ Baoch, Hashen, Suzuki, Yamada, N.:Immune lym- 10) R.L., response T. lymphocyte eruptions, Gill, 昭52. Y。Hamada, lymphocytes T., &χ.lorisawa, transforma 丘ｏｍ Mizoguchi, S.: Drug- tion patients in with peridrug Den F.A.: The association of increased spontaneous lymphocyte transformation in eruption， 443-446. F., Kolodny, blood 142: 1185-1187, : 531-535, S., Asai, vitro with di 1975. 法，免疫実験操作法Ａ，第１版，日本免疫学会，金沢，昭50, peripheral ＆i四ぽ, ｢ｅrとしての意義について，日皮会誌，87 4）溝口靖紘，川合弘毅，門奈丈之，山本鮪夫，浜 5) Gimenez-camarasa, vitro. 田尚，森沢成司：薬疹とリンパ球幼若化現象田尚，森沢成司：薬疹に偏けるリンパ球幼若 : 1419-1427, of human in 8）鈴木神典，浅井芳江，浜田稔夫，溝口靖紘，山 3）鈴木伸典，浅井芳江，浜田稔夫，溝口靖紘，山 : 294-300, mitosis phocytes 1963. 688-691. 化現象について．皮膚，18 253 ｢cal manifestations 1975. 11）谷奥喜平：固定薬疹の発生機序について。西日皮膚，34 of drug ＮｅｗＥｎｓ.ふＭｅｄ.，２９‘Z: 819-812, : 553-566, 昭47.