Istituto CSS

Modulo
MSQ 5.3
Rv.
2
Consenso informato all’applicazione diagnostica dell’analisi KaryoLite BACs-on-Beads TM
(KaryoLite BoBsTM)
TM
L’analisi KaryoLite BoBs è un dosaggio multiplo basato su microsfere Luminex® sottoposte a marcatura a
fluorescenza equivalente ad una ibridazione FISH in fase liquida. L’utilizzo del kit KaryoLite BoBs™ è
destinato alla rilevazione delle aneuploidie di tutti i cromosomi (autosomi e cromosomi sessuali). Le altre
anomalie genetiche (poliploidie, aneuploidie a mosaico <50%, mutazioni puntiformi, difetti di metilazione,
riarrangiamenti cromosomici bilanciati, riarrangiamenti cromosomici sbilanciati non coperti dal kit ecc…) NON
vengono riconosciute dal kit KaryoLite BoBs TM.
La tecnologia KaryoLite BoBsTM evidenzia aneuploidie di interi cromosomi che hanno globalmente una
frequenza nei tessuti abortivi pari al 60-85%. In questo tipo di campioni questa analisi può essere intesa
come sostitutiva dell’esame cromosomico convenzionale che nel 40% dei casi fallisce a causa della
macerazione dei tessuti oppure fornisce un risultato femminile normale per contaminazione materna.
Tuttavia, se il tessuto abortivo deriva da una gravidanza in cui l’assenza di battito risale a meno di 7 giorni
dal ricevimento verrà comunque tentato l’allestimento di una coltura per eventuali approfondimenti
diagnostici. In caso di risultato normale mediante KaryoLite BoBs TM, è possibile proseguire la ricerca delle
restanti anomalie cromosomiche applicando analisi molecolari e/o citogenetiche aggiuntive da stabilirsi di
volta in volta in base al tipo e alla qualità del materiale fetale a disposizione.
La detection rate delle aneuploidie mostrata da KaryoLite BoBs TM è ~99% (falsi positivi + falsi negativi
~1%). Il fallimento del test per scarsa qualità del campione avviene con una frequenza pari al ~5%. La
contaminazione materna >50% nel campione in esame può essere fonte di diagnosi errata. La validazione
clinica europea di questa tecnologia è stata eseguita dal Laboratorio TOMA per PerkinElmer (in esclusiva per
l’Italia).
I sottoscritti:
Nome del Probando ……………………………………………………………… Firma ……………………………………………………………………
⁫
Nome della Madre …………………………………………………………………Firma ……………………………………………………………………
Nome del Padre ….…………………………………………………………………… Firma ………………………………………………………………
Residenti in……………………………………………………………………… via…………………………………………………………………n…………
☐
danno il proprio consenso all’analisi KaryoLite BACs-on-BeadsTM e dichiarano di aver ben compreso le
informazioni fornite dal consulente genetista in merito a quanto sopra riportato;
☐
dichiarano altresì di aver potuto discutere tali spiegazioni, porre le domande che hanno ritenuto necessarie;
☐
acconsentono liberamente all’utilizzo del campione in eccesso per studi di ricerca e relative pubblicazioni atti
alla comprensione del significato delle variazioni del genoma;
☐
dichiarano di aver accettato liberamente di condividere i risultati in forma anonima derivanti da questa analisi
in database clinici (quali ad esempio ISCA, Decipher… )
Il Medico/Sanitario che ha fornito le informazioni: Prof./Dott,………..……………………………………….…
Timbro ente inviante…………….……………………………………………
Luogo/data …………….……………………………………………
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KARYOLITE BoBs _ RICERCA DELLE ANEUPLOIDIE DI TUTTI I CROMOSOMI
Referente: Dr.ssa Francesca Romana Grati
Karyolite BoBs è un nuovo test diagnostico offerto dal ns. servizio di genetica molecolare che trova
applicazione in alternativa al cariotipo su tessuto abortivo. Essa è in grado di rilevare le aneuploidie (trisomie
e monosomie) di tutti i cromosomi (autosomi e cromosomi sessuali) presenti anche a mosaico (solo per
mosaici >50%) (Grati et al, 2013).
Il “KaryoLite BoBsTM” trova applicazione come:
 alternativa al cariotipo, qualora il tessuto abortivo derivasse da una gravidanza in cui l’assenza di
battito risale a oltre 4/6 giorni;
 consecutiva al cariotipo, qualora il tessuto abortivo non mostrasse crescita cellulare.
Il lavoro di validazione di “KaryoLite BoBsTM“ effettuato presso il ns. settore di ricerca e sviluppo in
collaborazione con l’Ospedale Chi de Poissy (Parigi) e il Murdoch Children’s Research Institute, Royal
Children’s Hospital (Melbourne, Australia) (Grati et al, 2013), ha mostrato i seguenti limiti:
1) La tecnica non rileva:
 aneuploidie a mosaico <50%;
 mutazioni puntiformi;
 difetti di metilazione;
 riarrangiamenti cromosomici bilanciati;
 riarrangiamenti cromosomici sbilanciati non coperti dal kit;
2) La strategia diagnostica proposta è in grado di:
 riconoscere correttamente il numero dei cromosomi nella totalità dei casi normali;
 riconoscere correttamente le aneuploidie complete o a mosaico >50% di tutti gli autosomi e dei
cromosomi sessuali nella totalità dei casi;
 riconoscere assetti cromosomici triploidi
 riconoscere correttamente il 65% dei casi con sbilanciamenti parziali delle regioni p- o q-terminali di
tutti i cromosomi
Considerando che le aneuplodie rappresentano il 75% della patologia cromosomica su tessuto abortivo e che
le triploidie ne rappresentano un ulteriore 11%, possiamo concludere che l’applicazione della strategia
diagnostica con l’utilizzo di KarioLite BoBs come test di primo livello è in grado di riconoscere circa 86% della
patologia cromosomica riscontrabile su tessuto abortivo.
La sensibilità del test nel riconoscimento delle aneuploidie è ~99% (falsi positivi + falsi negativi ~1%). Il
fallimento del test per scarsa qualità del campione avviene nel ~5% dei casi. La contaminazione materna
>50% nel campione in esame può essere fonte di diagnosi errata. La validazione clinica europea di questa
tecnologia è stata eseguita dal Laboratorio TOMA per PerkinElmer (in esclusiva per l’Italia).
Dal 2013 il laboratorio TOMA partecipa ai controlli di qualità esterni Europei (CEQA) per l’analisi KaryoLite
BoBs.
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