Succesvolle automatisering van moleculaire technieken op een waterlaboratorium Adrie Atsma, hoofdanalist afdeling microbiologie Vitens laboratorium te Leeuwarden Introductie • Vitens in cijfers: • • • • Klanten : 5,4 miljoen Aansluitingen : 2,4 miljoen Productie lokaties : 100 Distributie netwerk : 46.500 km Introductie Dagelijks worden er meer dan 1500 monsters verwerkt op 469 verschillende analyses! Kweek naar moleculair • Steeds meer een trend van klassieke microbiologie naar moleculair, ook binnen de waterlabs. • Voordelen van moleculair ten opzichte van klassiek: Sneller uitslag van het onderzoek. Toont naast de kweekbare ook de niet kweekbare microorganismen aan. Mogelijkheid om analyses verder te automatiseren. Etc.. Kweek naar moleculair Routine: E.coli PCR (met voorkweek). PMA qPCR voor Legionella (pneumophila). Projecten: Hydrochip DNA-fingerprinting Biomarker studies Kweek naar moleculair Nadelen van handmatig inzetten moleculaire technieken: • Grote spreiding onderlinge meetresultaten (VC >50%)! • Beperkt aantal monsters! • ‘Pipetteer fouten’. • Soms analyses herhalen. Kosten reductie BC: effect van robotisering moleculaire technieken op kostprijs . Y-as= kosten/analyse X-as= analyses/jaar Automatisering • Plan van Eisen aanschaf robot Flexibel Chemicaliën/werkwijze die we gebruiken voor handwerk moeten hierop kunnen worden gebruikt. Moet 96 monsters in een keer kunnen verwerken. Niet te duur zijn. Te koppelen zijn aan systemen zoals PCR systemen, LIMS. FiltratieLysisDNA-opzuiveren PCR plaatsetupPCR Eerste stap Automatisering • Hamilton Star let. Resultaten • Doorlooptijd van 20 monsters is ongeveer 80 minuten; het kan sneller. • Lagere spreiding onderlinge PCR resultaten. • Geen pipetteerfouten. • Simpele workflow voor moleculaire analyses. FiltratieLysisDNA-opzuiveren PCR plaatsetupPCR Tweede stap: automatisering voorbewerking Eerste stap (bijna)gereed Automatisering Voorbeeld van workflow: detectie E.coli en coliformen in drinkwater Voorkweek (5 uur) Thermische lysis Isolatie DNA en PCR plaatsetup voorbewerking handmatig (fase 2) Resultaten verwerken PCR In constructie Concentreren Automatisering voorbewerking Autolysis tube Custom made maken Automatisering voorbewerking • • • • • Tangentiële Flow Filtratie. Concentratie van watermonster (bijv. 100 ml 150 l). Geconcentreerde cellen in vloeistof, niet in op filter. Reductie in handelingstijd. Automatiseren. Biotrack Conclusie • Meer toename van moleculaire technieken • Robot is een belangrijke schakel voor automatisering van moleculaire technieken. • Robot brengt kostprijs per analyse naar beneden. • Inzet robot indirect minder FTE. • 24/7 Automatisering van moleculaire technieken Levert een belangrijke bijdrage aan de productie van schoon drinkwater
© Copyright 2024 ExpyDoc