30P2-am071 Tau タンパク質の自己重合における Ile308 と Tyr310 が形成する CH-π 相互作用の重要性 ◯曾川　甲子郎 1 ，奥田　良平 1 ，箕浦　克彦 1 ，尹　康子 1 ，友尾　幸司 1 ，石田　寿昌 1 （ 1 大阪薬大）【目的】微小管の重合促進と安定化に寄与しているTauタンパク質は、異常にリン酸化されると、微小管結合能を失い、PHF(paired helical filament)と呼ばれる特異な線維束を形成する事が知られている。このPHF形成には、Tauタンパク質中の相同性の高い３１ࠥ３２残基のアミノ酸が３回あるいは４回(R1ࠥR4)繰り返す特徴的な配列である微小管結合部位(MBD:microtubule binding domain) が大きく関与している事が示唆されている。特にR3 のN末端に存在するVQIVYK配列、及び、この配列に存在するTyrosine残基とIsoleucine残基の重要性が本研究室の実験により考えられている。本研究では、PHF形成においてTyrosine残基の役割、特にTyrosine側鎖の配向に及ぼす隣接する疎水性アミノ酸残基とのCH-π相互作用がもたらす影響について調べた。【方法・結果】 R3 リピートのVQIVYK配列におけるFull length Tau、3R,4RMBD変換体を作成し、大腸菌より発現させ、種々のクロマトグラフィーを用いて高純度試料を得た。この試料を用いて、ポリアニオンであるヘパリンにより凝集を促進させ、その凝集過程について、時間経過的に蛍光分析を行い、また電子顕微鏡によりフィラメント観察を行った。これまでに、Full length Tau、3R,4RMBDの自己重合においてIle308 とTyr310 の重要性が明らかとなり側鎖間に形成されるCH-π相互作用が不可欠である事が示唆される。現在、更なる変換体を作成しTauタンパク質の自己重合に及ぼす影響について検討している。