30E06-pm15 漢方薬によるパラインフルエンザウイルス 2 型の増殖阻害 ◯山本　秀孝 1 ，伊藤　愛 2 ，大河内　愛弓 2 ，佐藤　冴美 2 ，前田　友里恵 2 ， 2 1 鈴鹿医療大薬，紀平　佐保子 2 ，河野　光雄 3 ，鶴留　雅人 3 ，植松　淳 2 ，駒田　洋（ 2 鈴鹿医療大医療栄養微生物，3 三重大院医微生物）目的：鼻炎、呼吸器疾患などに効果がある漢方薬の抗ウイルス作用を in vitro で解析した。使用した漢方薬は、葛根湯加川弓辛夷、麻黄湯、猪苓湯、香蘇散、竹如温胆湯、紫朴湯である。本研究では、呼吸器感染ウイルスである、ヒトパラインフルエンザウイルス２型（hPIV-2）に対する効果について検討した。方法：細胞は LLCMK2 細胞を、ウイルスは hPIV-2 を使用した。漢方薬はツムラ（株）の医療用漢方薬エキス顆粒を用いた。漢方薬は PBS に 100mg/mL になるように懸濁させ、オートクレーブで滅菌後、遠心して上澄みを使用した。ウイルスの増殖の有無は細胞融合の観察と赤血球吸着法（Had）で解析した。ウイルスタンパク質の発現は間接蛍光抗体法で、ウイルスの遺伝子（RNA）は PCR 法で解析した。ウイルスの細胞への侵入は、GFP 挿入・M タンパク質欠損組換え hPIV-2(rghPIV-2 ΔM)を用いて解析した。結果及び考察：葛根湯加川弓辛夷、竹如温胆湯、紫朴湯とも 80μL で hPIV-2 による細胞融合、Had を阻害した。その他のものには抗ウイルス作用は認められなかった。葛根湯加川弓辛夷はウイルスタンパク質の発現をほぼ阻害した。また竹如温胆湯及び紫朴湯はある程度阻害した。葛根湯加川弓辛夷及び紫朴湯は NP、F、 HN 遺伝子の合成を阻害した。竹如温胆湯は F、HN 遺伝子の合成をある程度しか阻害しなかった。３つの漢方薬ともウイルスの侵入とまたは増殖を完全には阻害しなかった。ウイルスの細胞外への放出については、３種ともほぼ抑制した。アクチン線維、微小管への作用の解析を行った結果、３種ともアクチン線維、微小管の破壊が認められた。細胞骨格系の破壊により、ウイルスの移動が出来なくなり、放出されるウイルス量が減少したものと思われた。