Master Biologie Santé Spécialité GCDE Proposition de stage 2014-2015 Titre du stage : Bacterial cell cycle regulation during host cell infection Responsable de l’équipe d’appui : Olivier Espéli Intitulé et adresse du laboratoire : CIRB Collège de France, 11 place Marcelin Berthelot 75005 Paris Maître de stage : Nom, prénom : Demarre , Gaelle Email : [email protected] Tél : 0144271249 Description du stage : Notre équipe s’intéresse à la compréhension des mécanismes de contrôle du cycle cellulaire bactérien (1). Nos travaux récents se sont particulièrement focalisés sur la réplication, l’organisation et la ségrégation de chromosomes pendant le cycle cellulaire et les connections entre ségrégation des chromosomes et division cellulaire (2). La plupart de ces analyses sont en général réalisées in vitro dans des conditions de laboratoire contrôlées. Ces conditions sont loin d'être celles de l’environnement naturel des bactéries. Lors d’un processus infectieux les bactéries vont rencontrer différents environnements plus ou moins riches en nutriments et en molécules toxiques pouvant provoquer différents stress. In vitro, il est bien connu que ces éléments contrôlent le cycle cellulaire bactérien. Notre objectif est de comprendre l’adaptation du cycle cellulaire bactérien lors d’un processus infectieux. Pour ce projet, nous avons sélectionné la bactérie LF82; LF82 est une souche pathogène invasive et adhérente d’E. coli associée à la maladie de Crohn (3). LF82 est capable d'adhérer à l'épithélium intestinal et de coloniser la muqueuse intestinale, elle envahit les macrophages et se réplique à l’intérieur du phagosome à pH acide et dans un environnement oxydant (4). Notre projet de recherche consiste à rechercher les éléments de contrôle du cycle cellulaire pouvant permettre une adaptation de LF82 aux conditions extrêmes rencontrées dans les phagosomes. Grace à des outils d’imagerie à fluorescence nous pouvons suivre les grandes étapes du cycle cellulaire des bactéries à l’intérieur des macrophages. Nous combinerons ces outils et des méthodes de génétique et génomique pour déterminer si la résistance au stress implique un l’apparition de bactéries non réplicatives, dites persistantes (5), pour identifier les checkpoints enclenchés pour entrer et sortir de la persistance et caractériser les propriétés spécifique du cycle cellulaire des bactéries en croissance dans les macrophages. 1) Possoz C, Junier I, Espeli O. Front Biosci (Landmark Ed). 2012 Jan 1;17:1020-34. 2) Espéli O, Borne R, Dupaigne P, Thiel A, Gigant E, Mercier R, Boccard F. EMBO J. 2012 May 11;31(14):3198-211. doi: 10.1038/emboj.2012.128. 3) Boudeau J, Glasser AL, Masseret E, Joly B, Darfeuille-Michaud A. Infect Immun. 1999 Sep;67(9):4499-509. 4) Bringer MA, Glasser AL, Tung CH, Méresse S, Darfeuille-Michaud A. Cell Microbiol. 2006 Mar;8(3):47184. 5) Helaine S, Cheverton AM, Watson KG, Faure LM, Matthews SA, Holden DW. Science. 2014 Jan 10;343(6167):204-8. doi: 10.1126/science.1244705. Parcours de M2 : θ GBMM Profil de l’étudiant recherché (formation initiale) : - Biologie Cellulaire - Biologie Moléculaire des Microorganismes - Génétique Ce stage peut-il se poursuivre par une thèse : OUI Ecole Doctorale de Rattachement : GGC Nom de la personne titulaire d’une HDR qui encadrerait la thèse : Olivier Espéli Accord de principe pour proposer le sujet à un étudiant de M1 (stage de 7-8 semaines généralement de mi-avril a mi-juin) si votre proposition n’a pas été pourvue par un étudiant de M2 : oui