熊本大学学術リポジトリ Kumamoto University Repository System Title 膵β細胞におけるオキシトシンの細胞保護作用に関する 研究 Author(s) 渡部, 佐耶加 Citation Issue date 2016-03-25 Type Thesis or Dissertation URL http://hdl.handle.net/2298/35424 Right 渡部 佐耶加 氏の学位論文審査の要旨 論 文題 目 膵 β細 胞 に お け る オ キ シ トシ ン の 細 胞 保 護 作 用 に 関 す る 研 究 (Oxytocin protects the cell death of pancreatic β-cells) オ キ シ トシ ン(Oxt)は 分 娩 ・授 乳 に関 わ るペ プチ ドホ ル モ ン と して 知 られ て い るが 、近 年 、中枢 神 経 系 に お け る 神 経 修 飾 作 用 や 代 謝 に お け る働 き も解 明 され つ つ あ る 。最 近 、Oxtが 告 され て いる が 、 そ の 分 子 メ カ ニ ズ ム は 不 明 で あ る そ こで 申請 者 は イ ン ス リン分 泌 に も 関与 す る と報 膵 β細 胞 に お け るOxtの 機 能 を解 明 す る 目的 で 、 本 研究 を行 った 。 ま ず 、RT-P(R法 を用 い て 、(あ7BL/6マ ウ ス膵 島 とマ ウ ス 膵 β細 胞 由 来MINE細 胞 に お け るOxt受 容 体 Oxtr) の 発 現 を定 量 的 に解 析 した 。 そ の結 果 、脳 視 床 下 部 視 索 上 核 よ りも 、有意 に 多 くのOtxr発 に 、Oxtが 小 胞 体 ス トレス に よ り惹 起 され る膵 β細 胞 死 を抑 制 す るか 否 か をinvitroに 現 が 見 られ た 。次 お い て検 討 した 。 そ の た め に 、マ ウス の 膵 島 を単 離 ・培 養 し、ツ ニ カ マ イ シ ンま た は サ イ トカ イ ン混 合 液(IL 一 β ・TNF一α ・1困一 γ)の24時 間 添 加 で 細 胞 死 を 誘 発 した 。 これ らの 薬 剤 と同 時 にOxt(100pM)を 有意 に 抑 制 した 。 この よ うなOxtの 膵 β細 胞 保 護 作 用 がinvivoに それ を究 明 す るた め に 、 申請 者 はOxtr欠 損(OxtrKO)マ 添加 す る と、膵 β細 胞 死 を お い て も認 め られ る か否 か が 重要 で あ り、 ウ ス と野 生 型 マ ウ ス に 高 脂 肪 食 負 荷 を長期 間 与 え 、 膵 機 能 と膵 β細 胞 死 な ど を比 較 す る こ とで 研 究 を行 った 。普 通 食 を 摂 食 したOxtrK マ ウ ス と比 較 して 耐 糖 能 に 差 は 見 られ な か った 一 方 、 高 脂 肪 食 を摂 食 したOxtrKOマ ンス リン分 泌 が 有意 に 低 下 した 。 高脂 肪 食 を摂 食 したOxtrKOマ ス マ ー カー((fopとXbp-1ス ウス で は 野 生型 マ ウ ス で は 耐 糖能 お よ び イ ウ ス の膵 島 に お い て 、 一 部 の 小胞 体 ス トレ プ ラ イ シ ン グ フ ォー ム)の 発 現 が 元 進 し、細 胞 死 が 有意 に増 加 した 。最 後 に 、 Oxtの 膵 β細 胞 保 護 作 用 の機 序 を探 る ため に 、膵 島 に お け るERKな らび にCR田 の リン 酸 化 を調 べ た結 果 、高 脂 肪食 を与 えた 場 合 、野 生 型 マ ウ ス膵 島 に 比 べ 、OxtrKOマ ウス に お け る リン酸 化 黙 な らび に リン酸 化 ㎝EB の 量 が 有 意 に 低 か った 上 記 研 究 結 果 よ り、申請 者 はOxtが ス トレス 下 に お け る膵 β細 胞 の細 胞 死 を抑 制 す る と結 論 付 け た 。ま た そ の分 子 メ カニ ズ ム と して 、Oxtが 細 胞 内ERK-(R[Bシ グナ ル 伝 達 系 を 介 して細 胞 死 を防 止 して い る と推察 し た。 審 査 で は 、1)i vitroデ 討 、3)膵 6)Oxtの タ と nvivoデ β細 胞 死 と膵 島 面 積 の 関係 、4)膵 ー タの 統 一 的 な説 明 、2)ア 多様 な 機 能 と xt分 泌 との 関 係 、7)OtxrKOマ 胞 以外 の膵 島細 胞 のOxtrKOの 寄 与 、9)イ 類 に よ る結 果 の 違 いの解 釈 、11)リ 胞 死 の検 討 、13)OxtKO先 ポ トー シス とネ ク ロー シス の検 β細 胞 増 殖 の可 能 性 、5)CR田 やOxtrの 定 量 方 法 の検 討 、 ウス の 膵 島 以外 に お け る フ エノ タ イ プ ンス リン分 泌 低 下 の機 序 )β 細 0)小 胞体 ス トレス マー カ ー の種 ン酸 化ERK(P一 日駅)低 下 の 機 序 、12)同 一 切 片 にお け るp一田 くと細 行 研 究 の結 果 との 比 較 検 討 、14)OxtrのSNPの 議 論 で きる 生 育環 境 と糖 尿 病 の 関 係 、15)血 中 xt濃 度 とその 変動 幅 、16)統 機能 15)Oxtの 作用か ら 計 処 理 方 法 の妥 当性 、 等 の 質疑 が な され 、 申 請者 か ら概 ね 適 切 な 回 答 が な され た 本研究 は 小胞 体 ス トレス に よ る膵 β細 胞 死 に 対 してOxtの 強 い保 護 作 用 を示 し、 さ らに そ の分 子 メ 力 ニ ズ ム の 一 端 を解 明 した 研 究 で 、 糖 尿 病 な ど と関 連 した 臨 床 的 な意 義 も大 き く、学 位 の 授 与 に 値 す る もの と評 価 した 。 審査委員長 知覚生理学担当教授 へ (署名) 宋 文蔦
© Copyright 2024 ExpyDoc
