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JP 4814789 B2 2011.11.16
(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩、及び製薬上許容される担体を含有してな
る、高尿酸血症又は高尿酸血症に起因する疾患の治療・予防のための医薬組成物。
【請求項２】
医薬組成物が、痛風の治療・予防剤である請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
医薬組成物が、尿酸排泄促進剤である請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
医薬組成物が、キサンチンオキシダーゼ阻害剤である請求項１に記載の医薬組成物。
10
【請求項５】
６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩を含有してなる、腎臓における尿酸の取り
込み抑制剤。
【請求項６】
腎臓における尿酸の取り込みが、尿酸特異的トランスポーターであるＵＲＡＴ１による
取り込みである請求項５に記載の抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩、及び製薬上許容される担体を
20
(2)
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含有してなる医薬組成物、より詳細には、６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩、
及び製薬上許容される担体を含有してなる高尿酸血症又は高尿酸血症に起因する疾患の治
療・予防のための医薬組成物、並びに６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩を含有
してなる、尿酸排泄促進剤、キサンチンオキシダーゼ阻害剤、及び腎臓における尿酸の取
り込み抑制剤に関する。また、本発明は、２−エチル−６−ヒドロキシ−３−（ｐ−ヒド
ロキシ−ベンゾイル）−ベンゾフラン（これらの水酸基は必要により保護されていてもよ
い。）を、ブロム化剤を用いてブロム化し、次いで水酸基の保護基を脱保護することから
なる６−ヒドロキシ−ベンズブロマロンを製造する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
10
痛風は、関節炎（痛風発作）、痛風結節、尿路結石などの各種の症状を伴う重篤な病気
である。痛風は生活習慣と深く関わっており、１９６０年以前では我が国では希な病気で
あったが、経済の高度成長と共に増加し、現在では約６０万人以上の患者が居るといわれ
ている。また、痛風発症年齢も従来は５０才代であったものが、現在では３０才代がピー
クになってきており、発症年齢も若年化の傾向にある。さらに、痛風の基礎病体である高
尿酸血症も増加してきている。血清尿酸値が高くなると、痛風の危険性だけでなく、虚血
性心疾患の危険性も高くなることも報告されている。
【０００３】
高尿酸血症の病態には尿酸産生促進型と尿酸排泄抑制型の二種類があり、高尿酸血症患
者全体におけるそれぞれの比率は、尿酸産生促進型が約２割、尿酸排泄抑制型が約６割、
20
両者の混合型が約２割と言われている。現在、前者に対してはキサンチンオキシダーゼ阻
害剤であるアロプリノール、後者に対しては尿酸排泄促進剤であるベンズブロマロンの使
用が推奨されている。両薬剤とも発売から２０年以上を経過しており、これまでにアロプ
リノールでは肝障害（劇症肝炎を含む）、骨髄抑制、重篤な皮膚炎等の副作用や、アロプ
リノールの代謝物であるオキシプリノールは透析患者において、体内に高濃度に蓄積する
ことから血液障害、肝障害をきたすことが報告されている。ベンズブロマロンでは肝障害
（劇症肝炎を含む）が報告されており、それぞれ副作用の少ない新たな薬剤の開発が求め
られている。
【０００４】
尿酸排泄促進剤としては、ベンズブロマロンのベンゾフラン骨格を残して側鎖部分を各
30
種の化学修飾したものが報告されている（特許文献１∼４参照）。また、尿酸排泄促進剤
として、非ペプチド系アンジオテンシンII受容体拮抗作用を有する化合物を用いるもの（
特許文献５参照）、ジヒドロピリジン誘導体を用いるもの（特許文献６参照）、ヒダント
イン誘導体を用いるもの（特許文献７参照）、ビアリール化合物又はジアリールエーテル
化合物を用いるもの（特許文献８参照）などが報告されている。
また、尿酸産生を抑制するためのキサンチンオキシダーゼ阻害剤としては、ピラゾロト
リアジン誘導体を用いるもの（特許文献９参照）、３−フェニルピラゾール化合物を用い
るもの（特許文献１０参照）、１−フェニルピラゾール化合物を用いるもの（特許文献１
１参照）、バラ科の多年草植物のセイヨウナツユキソウ（一般名：シモツケソウ、Filipe
ndula ulmaria）や、それから単離されたケルセチン−４’−配糖体及びケルセチン−３
40
−配糖体を用いるもの（特許文献１２及び１３参照）、２−フェニルチアゾール誘導体を
用いるもの（特許文献１４参照）、ドコウジュ、セキコウジュ、ナギナタコウジュ、レモ
ンバーム、ローズマリー、スペアミント、ペパーミント、ウインターサボリ、キンマ及び
フクマンギから選ばれた植物体及び／又は該植物体の抽出物を用いるもの（特許文献１５
参照）などが報告されている。
さらに、新しいタイプの高尿酸血症の治療剤として、チアゾリジンジオン化合物などの
インスリン抵抗性改善物質を用いるもの（特許文献１６参照）、炭素数２０のモノエン酸
及び／又はその誘導体、並びに炭素数２２のモノエン酸及び／又はその誘導体を有効成分
として含有する高尿酸性疾患予防治療剤に関するもの（特許文献１７参照）、イチョウ葉
抽出物を有効成分とする尿酸値低下剤に関するもの（特許文献１８参照）、コンドロイチ
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ン硫酸タンパク複合体を有効成分として含有する、高尿酸血症治療又は予防用組成物に関
するもの（特許文献１９参照）なども報告されている。
これらの中で、新規のキサンチンオキシダーゼ阻害剤に関しては、国内および国外にお
いて既にいくつかが開発段階に入っているが、尿酸排他促進剤に関しては世界的にみても
開発される動きは見られず、高尿酸血症患者のＱＯＬ向上のために、副作用の少ない新た
な尿酸排泄促進剤の開発が求められている。
【０００５】
一方、次式で示されるベンズブロマロンは、
【０００６】
【化１】
10
【０００７】
ベンゾフラン誘導体の１種であり、その強い尿酸排泄促進作用により長年にわたって広く
20
使用されてきている。ベンズブロマロンの薬物代謝に関しては、１９７２年のヒトにおけ
る報告（非特許文献１参照）において、ベンズブロマロンは肝臓において脱臭素代謝され
、臭素が１つ取られたブロモベンザロン、あるいは臭素が２つとも取られたベンザロンに
代謝されると考えられていた。しかし、その後の研究によりベンズブロマロンの代謝産物
は脱臭素体ではなく、主にベンゾフラン環の１’位あるいは６位が水酸化された水酸化物
であると報告された（非特許文献２∼６参照）。そして、ベンズブロマンの尿酸排泄促進
作用の持続性に関しては、血中の代謝産物が関与しているのではないかとの示唆も示され
てきた（非特許文献５参照）。
また、ベンズブロマロン、ベンザロン、ベンズイオダロンなどのベンゾフラン誘導体を
服用中の患者において、重篤な肝障害が報告されるようになり、これらに共通の代謝産物
30
が肝障害発現に関与している可能性が指摘されてきた。特にベンザロンはベンズイオダロ
ン及びベンズブロマロンの脱ハロゲン体であることから、ベンザロン自体が肝障害を引き
起こす可能性も未だ完全に否定されていない。
このように、ベンズブロマロン、ベンザロン、ベンズイオダロンなどのベンゾフラン誘
導体の代謝産物や、その副作用について多くの研究がなされてきたが、重篤な肝障害を引
き起こすことなく、安全性が高く、かつ尿酸排泄促進作用の強い高尿酸血症の治療、予防
剤の開発は未だなされていないのが現状である。
【０００８】
【特許文献１】特開昭５９−７３５７９号
【特許文献２】特開平０１−２１６９８４号
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【特許文献３】特開平０３−２６１７７８号
【特許文献４】特開平０６−１８４１３２号
【特許文献５】特開平０５−２５０４３号
【特許文献６】特開平０５−２７９２５５号
【特許文献７】ＷＯ９７／０２０３３号
【特許文献８】特開２０００−１４３１号
【特許文献９】特開平０６−３１６５７８号
【特許文献１０】特開平１０−３１０５７８号
【特許文献１１】ＷＯ９８／１８７６５号
【特許文献１２】特開２００２−１２１１４５号
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【特許文献１３】特開２００３−１７１２８３号
【特許文献１４】特開２００２−１０５０６７号
【特許文献１５】特開２００３−２５２７７６号
【特許文献１６】特開平１１−２５５６６９号
【特許文献１７】特開２００１−２７８７８６号
【特許文献１８】特開２００２−２１２０８５号
【特許文献１９】特開２００３−３３５６９８号
【非特許文献１】Broekhuysen, J., et al., Eur. J. Clin. Pharmacol., 4, 125-130 (1
972)
【非特許文献２】Walter-Sack, I., et al., Eur. J. Clin. Pharmacol., 39, 577-581 (
10
1990)
【非特許文献３】De Vries, J. X., et al., Clin. Investig., 71, 947-952 (1993)
【非特許文献４】De Vries, J. X., et al., Xenobiotica, 23, 1435-1450 (1993)
【非特許文献５】Walter-Sack, I., et al., Eur. J. Med. Res., 1, 16-20 (1995)
【非特許文献６】Walter-Sack, I., et al., Eur. J. Med. Res., 3, 45-49 (1998)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、尿酸排泄促進作用が強く、かつ重篤な肝障害を引き起こすことなく、安全性
の高い高尿酸血症の治療又は予防剤、より詳細には、尿酸排泄促進剤を提供することを目
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的としている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
ベンズブロマロンは肝臓において酸化および抱合の２段階の代謝を受けることが報告さ
れている。第一層の代謝は、薬物代謝酵素であるＰ４５０による酸化反応であり、これに
より、ベンズブロマロンは主に６‐ヒドロキシベンズブロマロンに変換される。第二層の
代謝は、抱合酵素による抱合反応であり、６‐ヒドロキシベンズブロマロンは、この反応
により抱合体を形成し胆汁あるいは尿中に排泄される。ベンズブロマロンによる副作用は
、この第一層の反応において未知の毒性代謝物が産生されることが原因であると推察した
。
30
そこで、本発明者らは、ベンズブロマロンの第一層の代謝産物である６−ヒドロキシベ
ンズブロマロンに着目した。仮にこの物質が尿酸排泄促進活性を有しているならば、ベン
ズブロマロンの第一層の反応における未知の毒性代謝物の産生を抑制することができ、副
作用の少ない安全性の高い尿酸排泄促進剤を開発することが可能となると考え、６−ヒド
ロキシベンズブロマロンの生理活性を検討したところ、従来注目されていなかった６−ヒ
ドロキシベンズブロマロンに腎臓における尿酸の取り込みの強い抑制作用があること、及
びアロプリノールの代謝産物であるオキシプリノールと同様なキサンチンオキシダーゼ阻
害作用があることを見出し、本発明に至った。
【００１１】
本発明は、６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩、及び製薬上許容される担体を
40
含有してなる医薬組成物、より詳細には、高尿酸血症又は高尿酸血症に起因する疾患の治
療・予防剤である医薬組成物に関する。
本発明は、６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩を含有してなる尿酸排泄促進剤
に関する。また、本発明は、６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩を含有してなる
キサンチンオキシダーゼ阻害剤に関する。さらに、本発明は、６−ヒドロキシベンズブロ
マロン又はその塩を含有してなる、腎臓における尿酸の取り込み抑制剤に関する。
本発明は、高尿酸血症又は高尿酸血症に起因する疾患の治療・予防のための医薬組成物
の製造のための、６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩の使用に関する。
また、本発明は、高尿酸血症又は高尿酸血症に起因する疾患の患者に、有効量の６−ヒ
ドロキシベンズブロマロン又はその塩、及び製薬上許容される担体を含有してなる医薬組
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成物を投与することからなる高尿酸血症又は高尿酸血症に起因する疾患の治療又は予防方
法に関する。
さらに、本発明は、２−エチル−６−ヒドロキシ−３−（ｐ−ヒドロキシ−ベンゾイル
）−ベンゾフラン（これらの水酸基は必要により保護されていてもよい。）を、ブロム化
剤を用いてブロム化し、次いで水酸基の保護基を脱保護することからなる６−ヒドロキシ
−ベンズブロマロンを製造する方法に関する。
【００１２】
本発明の６−ヒドロキシベンズブロマロンは、次式、
【００１３】
【化２】
10
【００１４】
で示される２−エチル−６−ヒドロキシ−３−（３’，５’−ジブロモ−４’−ヒドロキ
シ−ベンゾイル）−ベンゾフランである。本発明の６−ヒドロキシベンズブロマロンの塩
20
としては、製薬上許容される塩が好ましく、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩などが挙
げられる。
【００１５】
本発明の６−ヒドロキシベンズブロマロンは、各種の方法により化学合成することがで
き、例えば、必要により水酸基が保護されている２−エチル−６−ヒドロキシ−３−（ｐ
−ヒドロキシ−ベンゾイル）−ベンゾフランを、Ｎ−ブロモサクシンイミドなどのブロム
化剤を用いてブロム化し、次いで水酸基の保護基を脱保護することにより製造することが
できる。水酸基の保護基としては、ペプチド化学における各種の公知の保護基を使用する
ことができ、例えば、メチル基、エチル基、ｔ−ブチル基などの低級アルキルでエーテル
化する方法、メチルカルボニル基、エチルカルボニル基、ｔ−ブチルカルボニル基などの
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低級アシル基でエステル化する方法などが挙げられる。
原料となる２−エチル−６−ヒドロキシ−３−（ｐ−ヒドロキシ−ベンゾイル）−ベン
ゾフランは、必要により水酸基が保護されている２−エチル−６−ヒドロキシ−ベンゾフ
ランと、ｐ−ヒドロキシ−安息香酸の酸ハロゲン化物などの反応性誘導体とを反応させて
製造することができる。この際の原料となる２−エチル−６−ヒドロキシ−ベンゾフラン
は、必要により水酸基が保護されている２−アセチル−６−ヒドロキシ−ベンゾフランの
カルボニル基を還元して製造することができる。
【００１６】
本発明の６−ヒドロキシベンズブロマロンの好ましい製造例としては、例えば、２−ア
セチル−６−メトキシ−ベンゾフランをヒドラジンを用いて還元して、２−エチル−６−
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メトキシ−ベンゾフランとし、これに４−メトキシ−安息香酸の酸塩化物を四塩化スズの
存在下に反応させて、２−エチル−６−メトキシ−３−（ｐ−メトキシ−ベンゾイル）−
ベンゾフランとし、次いでエタンチオールナトリウム塩の存在下でベンゾイル基のメトキ
シ基を選択的に脱保護して２−エチル−６−メトキシ−３−（ｐ−ヒドロキシ−ベンゾイ
ル）−ベンゾフランとし、これをジメチルスルフィドの存在下でナトリウム−Ｎ−ブロモ
サクシンイミドによりブロム化して、２−エチル−６−メトキシ−３−（３’，５’−ジ
ブロモ−４’−ヒドロキシ−ベンゾイル）−ベンゾフランとし、次いで塩化アルミニウム
の存在下で６位のメトキシ基を脱保護して製造することができる。
【００１７】
本発明の６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩は、通常の製薬上許容される各種
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の担体と共に、医薬組成物とすることができる。製薬上許容される担体としては、製剤化
のために通常使用される賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、稀釈剤などが挙げられる。本
発明の医薬組成物は治療目的に応じて各種の投与形態を選択でき、例えば、経口投与、経
粘膜投与、非経口投与などにより投与することができる。これらの投与形態に応じて、錠
剤、顆粒剤、カプセル剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、坐剤、注射剤（液剤、懸濁剤等）
などに製剤化することができる。錠剤、顆粒剤などの経口投与製剤とする際には、担体と
しては、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシ
ウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸等の賦形剤、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチ
ン溶液、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、リン酸カリウム、
ポリビニルピロリドンなどの結合剤、デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン未、炭
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酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、乳糖などの崩壊剤、精製タルク、ステアリン酸塩、
ホウ酸末、ポリエチレングリコールなどの滑沢剤などが挙げられる。これらの担体を用い
て公知の手法により各種の剤型に製剤化することができる。
本発明の医薬組成物中に含有される６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩の量は
、広範囲に選択されるが、通常は組成物全体の１∼８０重量％、１０∼７０重量％程度と
することができる。
【００１８】
本発明の医薬組成物の投与量としては、患者の年齢、性別、症状、疾患の程度などによ
り適宜選択することができるが、通常は一日当り、体重１ｋｇ当り０．０１∼５００ｍｇ
、好ましくは０．１∼１００ｍｇ、０．１∼５０ｍｇ程度とするのがよく、１日に２∼４
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回に分けて投与するのが好ましい。
【００１９】
本発明の６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩は、尿酸排泄促進作用及びキサン
チンオキシダーゼ阻害作用を有し、高尿酸血症又は高尿酸血症に起因する疾患の治療や予
防に有効である。高尿酸血症に起因する疾患としては、痛風、尿酸（塩）結晶沈着症、関
節炎（痛風発作）、尿路結石、虚血性心疾患などが挙げられる。また、これらの疾患に伴
う肥満症、高血圧、高脂血症などの各種の合併症の治療や予防も包含される。
【００２０】
本発明の尿酸排泄促進剤、キサンチンオキシダーゼ阻害剤、及び腎臓における尿酸の取
り込み抑制剤は、それぞれ医薬組成物として使用されるのが好ましいが、これに限定され
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るものではなく、各種の試験に使用される試薬としての使用や、食品に添加される食品添
加剤としての使用なども包含される。
本発明の腎臓における尿酸の取り込み抑制剤は、より詳細には、腎臓における尿酸の取
り込みに関与している尿酸特異的トランスポーターであるＵＲＡＴ１（Atsushi, E., et
al., Nature, 417(6887）, 447-452 (2002)）による取り込みの抑制が挙げられる。
【００２１】
次に本発明の６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩の作用について説明する。
本発明者らは、６−ヒドロキシベンズブロマロン、及び従来から高尿酸血症の治療剤とし
て使用されているベンズブロマロンの、腎臓における尿酸の取り込みに関与している尿酸
特異的トランスポーターであるＵＲＡＴ１（Atsushi, E., et al., Nature, 417(6887）,
40
447-452 (2002)）に対する作用を検討した。
ＭＤＣＫ細胞にＵＲＡＴ１のｃＤＮＡを導入し、安定発現細胞（ＭＤＣＫ−ＵＲＡＴ１
）を作出した。この細胞を用いて、１００μＭの［１４Ｃ］尿酸を含有するダルベッコ修
飾ＰＢＳ液に種々の濃度の６−ヒドロキシベンズブロマロン又はベンズブロマロンを含む
溶液を加えて後、液体シンチレーションカウンターで細胞内に取り込まれた［１４Ｃ］尿
酸のｄｐｍをカウントした。それぞれ３回実験を行い、ＩＣ５０の値をプロフィット（pr
ofit）で解析した。
６−ヒドロキシベンズブロマロン、及びベンズブロマロンの結果をそれぞれ図１及び図
２にグラフで示す。図１及び図２の縦軸は尿酸の取り込み量（ｐｍｏｌ／ｍｇタンパク質
／分）を示し、横軸はそれぞれの濃度（μＭ）を示す。図１の場合のＩＣ５０の値は０．
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１３μＭであり、図２に場合のＩＣ５０の値は０．０３１μＭであった。
３回の実験の結果、６−ヒドロキシベンズブロマロン及びベンズブロマロンはいずれも
濃度依存的に尿酸の取り込みを抑制し、３回の実験の結果、６−ヒドロキシベンズブロマ
ロンのＩＣ５０の値は０．２０±０．０６μＭであり、ベンズブロマロンのＩＣ５０の値
は０．０３４５±０．００３μＭであった。このことは、６−ヒドロキシベンズブロマロ
ンは、ベンズブロマロンと同様に濃度依存的に尿酸の取り込みを抑制し、尿酸排泄促進作
用を有していることを明らかにするものである。そして、その強さはベンズブロマロンの
約１／６であるが、かなり強い尿酸排泄促進作用を有していることがわかった。
【００２２】
次に、６−ヒドロキシベンズブロマロンのキサンチンオキシダーゼ阻害活性を検討した
10
。ウシミルク由来のキサンチンオキシダーゼの活性を、１００μＭのキサンチンを基質
にして、０．１Ｍリン酸緩衝液を半分の量の水で希釈した１／１５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ
７．４）中で、３７℃で生成する尿素の吸光度（２９２ｎｍ）を経時的に測定する系を用
いて、６−ヒドロキシベンズブロマロン、又はアロプリノールの代謝産物であるオキシプ
リノールの阻害活性を測定し、ＩＣ５０を解析した。この結果、６−ヒドロキシベンズブ
ロマロンのＩＣ５０の値は６８μＭ、オキシプリノールのＩＣ５０の値は１３μＭであっ
た。この結果、本発明の６−ヒドロキシベンズブロマロンは、オキシプリノールの約１／
５のキサンチンオキシダーゼの阻害活性を有していることがわかった。
【００２３】
次に、ベンズブロマロンの健康成人男性における単回経口投与した場合の臨床薬物動態
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試験を行った。投与後の６−ヒドロキシベンズブロマロン又はベンズブロマロンの血漿及
び尿中の濃度をＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて測定した。
血漿についての結果を図３に、尿についての６−ヒドロキシベンズブロマロンの結果を
図４にそれぞれ示す。図３の縦軸は血漿中の濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示し、横軸は時間（時
間）を示す。図３中の点線でのバツ印（×）は６−ヒドロキシベンズブロマロンの場合を
示し、白三角印（△）はベンズブロマロンの場合を示す。図４の縦軸は尿中の濃度（ｎｇ
／ｍＬ）を示し、横軸は時間（時間）を示す。
この結果、血漿中のベンズブロマロンの濃度は、投与後速やかに上昇した後、徐々に減
少して投与４８時間後には消失した。一方、６−ヒドロキシベンズブロマロンはより長く
血漿中に存在し、投与７２時間後においても平均約１１０ｎｇ／ｍＬが検出され、ＡＵＣ
30
もベンズブロマロンに比べて２倍以上高い値を示した。尿中にはベンズブロマロンはほと
んど検出されなかったのに対して、６−ヒドロキシベンズブロマロンは投与７２時間後に
おいても平均約１７０ｎｇ／ｍＬが認められた。
【００２４】
以上のことから、６‐ヒドロキシベンズブロマロンは、トランスポーターＵＲＡＴ１に
よる尿酸の取り込みを、ベンズブロマロンとほぼ同程度に阻害する事が明らかになり、ベ
ンズブロマロンと同様に尿酸排泄促進効果を示すことが示された。ＵＲＡＴ１は腎尿細管
上皮細胞の管腔側に存在していることから、尿中の６−ヒドロキシベンズブロマロンがＵ
ＲＡＴ１による尿酸の再吸収の阻害に寄与していることが示された。
また、ベンズブロマロンのヒト臨床薬物動態試験の結果、ベンズブロマロンを単回経口
40
投与した健康成人男性において、尿中にはベンズブロマロンはほとんど認められず、一方
、投与７２時間後まで、尿中に高い濃度の６‐ヒドロキシベンズブロマロンが検出された
。
さらに、６−ヒドロキシベンズブロマロンがキサンチンオキシダーゼを阻害することが
明らかとなったことから、６‐ヒドロキシベンズブロマロンは尿酸産生促進型の病態に対
しても有効であることが示された。
【発明の効果】
【００２５】
本発明の６−ヒドロキシベンズブロマロン又はその塩は、強い尿酸排泄促進作用と共に
、キサンチンオキシダーゼ阻害作用も有しており、高尿酸血症及び高尿酸血症に起因する
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疾患に治療や予防のための有効成分として有用であるだけでなく、本発明の６−ヒドロキ
シベンズブロマロン又はその塩は、肝臓での代謝を受けにくく従来の尿酸排泄促進剤のよ
うな重篤な肝障害などの副作用が無く、長時間にわたって血中濃度を高く維持することが
でき、さらに、毒性が低く、安全係数が大きいことから、極めて安全性の高いものである
。本発明の医薬組成物は、尿酸排泄促進作用が強く、かつ重篤な肝障害を引き起こすこと
なく、安全性の高い高尿酸血症の治療又は予防剤、より詳細には、尿酸排泄促進剤を提供
するものである。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】図１は、ＵＲＡＴ１による尿酸の取り込みにおける、本発明の６−ヒドロキシベ
10
ンズブロマロンの取り込み抑制作用の実験結果を示すグラフである。
【図２】図２は、ＵＲＡＴ１による尿酸の取り込みにおける、ベンズブロマロンの取り込
み抑制作用の実験結果を示すグラフである。
【図３】図３は、健常人男性におけるベンズブロマロンの臨床薬物動態試験の結果におけ
る血漿中の６−ヒドロキシベンズブロマロン（点線×印）及びベンズブロマロン（△印）
の濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示すグラフである。
【図４】図４は、健常人男性におけるベンズブロマロンの臨床薬物動態試験の結果におけ
る尿中の６−ヒドロキシベンズブロマロンの濃度（ｎｇ／ｍＬ）を示すグラフである。
【図５】図５は、本発明の６−ヒドロキシベンズブロマロンの１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨ
ｚ、重クロロホルム）のチャートである。
20
【図６】図６は、Ｓ２細胞における、ヒトＯＡＴ４（ヒト有機アニオントランスポーター
４）による、ベンズブロマロン及び６−ヒドロキシベンズブロマロンの存在下における基
質３Ｈ−硫酸エステロン（estrone sulfate）の取り込み阻害作用を測定した結果を示す
ものである。
【図７】図７は、Ｓ２細胞における、ヒトＯＡＴ３（ヒト有機アニオントランスポーター
３）による、ベンズブロマロン及び６−ヒドロキシベンズブロマロンの存在下における基
質３Ｈ−硫酸エステロン（estrone sulfate）の取り込み阻害作用を測定した結果を示す
ものである。
【図８】図８は、ヒトＯＡＴ３（ヒト有機アニオントランスポーター３）における、６−
ヒドロキシベンズブロマロンの基質３Ｈ−硫酸エステロン（estrone sulfate）の取り込
30
み阻害作用の定数（Ｋｉ値）を分析した結果を示すものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】
以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれら実施例により何
ら限定されるものではない。
【実施例１】
【００２８】
６−ヒドロキシベンズブロマロンの製造
（１）２−エチル−６−メトキシベンゾフランの調製
２−アセチル−６−メトキシベンゾフラン（３．３０ｇ、１７．３ｍｍｏｌ）のジエチ
40
レングリコール溶液にヒドラジン（４．１１ｇ、６９．４ｍｍｏｌ、∼５５％、オルドリ
ッチ）を添加した。この混合物を１９０℃まで加熱し、１０分間撹拌した。常温まで冷却
後、水酸化カリウム（２．９２ｇ、５２．１ｍｍｏｌ）を添加し、１２０℃∼１３０℃に
て６時間撹拌した。その後、その反応液を水に投入し、ジクロロメタンで抽出し、ＭｇＳ
Ｏ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。残留した油分をＨＰＬＣ（シリカゲル、ＣＨＣｌ３）
にて精製し、目的の生成物（２．９８ｇ、１６．９ｍｍｏｌ、９７％）を得た。
【００２９】
（２）３−（ｐ−アニソイル）−２−エチル−６−メトキシベンゾフランの調製
２−エチル−６−メトキシベンゾフラン（２．７６ｇ、１５．６ｍｍｏｌ）及びｐ−ア
ニソイルクロライド（３．４８ｇ、２０．３ｍｍｏｌ）の乾燥二硫化炭素（２０ｍｌ）溶
50
(9)
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液を氷冷し、これに、塩化スズ（IV）（５．２５ｇ、２０．３ｍｍｏｌ）を撹拌下に滴下
した。この混合物を５∼１０℃で３時間撹拌し、水に投入した。有機層を希塩酸と水とで
洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。この粗製生成物をＨＰＬＣ（シリカゲ
ル、酢酸エチル：ヘキサン＝２：８）にて精製し、淡黄色油状の目的の生成物（２．９８
ｇ、９．６０ｍｍｏｌ、５８％）を得た。
【００３０】
（３）２−エチル−３−（ｐ−ヒドロキシベンゾイル）−６−メトキシベンゾフランの調
製
３−（ｐ−アニソイル）−２−エチル−６−メトキシベンゾフラン（２．３９ｇ、７．
７ｍｍｏｌ）及びエタンチオールナトリウム塩（９７１ｍｇ、１１．５ｍｍｏｌ）のジメ
10
チルホルムアミド溶液を８０℃にて４時間撹拌した。この反応をＮＨ４Ｃｌ溶液を用いて
終了させ、クロロホルムで抽出した。抽出物を水と食塩水で洗浄し、Ｍａ２ＳＯ４で乾燥
し、減圧下で濃縮した。その残留物をＨＰＬＣ（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン＝２
：８）にて精製し、目的の生成物（２．２８ｇ、７．７０ｍｍｏｌ、１００％）を得た。
【００３１】
（４）６−メトキシベンズブロマロンの調製
Ｎ−ブロモサクシンイミド（１２．０ｇ、６７．５ｍｍｏｌ）のジクロルメタン溶液に
ジメチルフィド（５．０ｍｌ、６８ｍｍｏｌ）を氷と食塩の浴の冷却下に、添加した。１
０分間撹拌後、２−エチル−３−（ｐ−ヒドロキシベンゾイル）−６−メトキシベンゾフ
ラン（２．００ｇ、６．７５ｍｍｏｌ）のジクロルメタン溶液を同温度で添加した。この
20
混合物を常温で１５時間撹拌した。この反応液に水を添加し、有機層を単離し、水と食塩
水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。その残留物をＨＰＬＣ（クロロホ
ルム）にて精製し、目的の生成物（１．７０ｇ、３．７４ｍｍｏｌ、５５％）を得た。
【００３２】
（５）６−ヒドロキシベンズブロマロンの調製
ＡｌＣｌ３（２．３４６ｍｇ、１７．６ｍｍｏｌ）にエタンチオール７ｍｌを氷浴下に
滴下した。この溶液を６−メトキシベンズブロマロン（１．７０ｇ、３．７４ｍｍｏｌ）
のジクロルメタン溶液（３５ｍｌ）に添加した。同温度で１０分間撹拌後、水を添加し、
１ＮＨＣｌ溶液を添加した。その有機層を単離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。
合わせた有機層を食塩水にて洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。残留物を
30
ＨＰＬＣ（シリカゲル、ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ＝３０：１）にて精製し、イソプロピルエ
ーテルから再結晶し、目的の生成物１．００ｇ（２．３５ｍｍｏｌ、６３％）を得た。
得られた６−ヒドロキシベンズブロマロンの純度は、ＨＰＬＣにより９９．８％であっ
た。このものの１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、重クロロホルム）のチャートを図５に添付
する。
【実施例２】
【００３３】
ＭＤＣＫ細胞に哺乳類発現ベクターｐｃＤＮＡ３．１にＵＲＡＴ１のｃＤＮＡを組み込
んだもの、あるいはｐｃＤＮＡ３．１を遺伝子導入して、安定発現細胞（ＭＤＣＫ−ＵＲ
ＡＴ１）及びｍｏｃｋ細胞を作出した。
40
このＭＤＣＫ−ＵＲＡＴ１を５％仔牛胎児血清及び４００μｇ／ｍＬのゲネチシン（ge
neticin）を含む最小必須培地（minimal essential medium）で培養し、２４穴のディッ
シュの１穴当たり１０５個の細胞を植え込んで２日培養した。その後、ダルベッコ修飾Ｐ
ＢＳ（Dulbecco modified PBS）液で洗い、その後ダルベッコ修飾ＰＢＳ液中で１０分間
プレインキュベートした。
その後、１００μＭの［１４Ｃ］尿酸を含有するダルベッコ修飾ＰＢＳ液に種々の濃度
の６−ヒドロキシベンズブロマロン又はベンズブロマロンを含む溶液を加えて、３７℃で
２分間インキュベートした。その後、ダルベッコ修飾ＰＢＳ液で３回洗浄後、０．１Ｎの
ＮａＯＨで細胞を回収した。そして、シンチレーションカクテル（scintillation cockta
il）を加えて、液体シンチレーションカウンターで細胞内に取り込まれた［１４Ｃ］尿酸
50
(10)
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のｄｐｍをカウントした。ＩＣ５０の値はプロフィット（profit）で解析した。
結果を図１及び図２に示す。３回の実験の結果、６−ヒドロキシベンズブロマロン及び
ベンズブロマロンはいずれも濃度依存的に尿酸の取り込みを抑制し、３回の実験の結果、
６−ヒドロキシベンズブロマロンのＩＣ５０の値は０．２０±０．０６μＭであり、ベン
ズブロマロンのＩＣ５０の値は０．０３４５±０．００３μＭであった。
【実施例３】
【００３４】
ウシミルク由来のキサンチンオキシダーゼの活性を、１００μＭのキサンチンを基質に
して、０．１Ｍリン酸緩衝液を半分の量の水で希釈した１／１５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７
．４）中で、３７℃で生成する尿素の吸光度（２９２ｎｍ）を経時的に測定する系を用い
10
て、６−ヒドロキシベンズブロマロン、又はオキシプリノールのそれぞれ０．０μＭ、０
．１μＭ、０．３μＭ、１．０μＭ、３．０μＭ、１０．０μＭ、３０．０μＭ、１００
μＭ、及び３００μＭの濃度での阻害活性を測定し、ＩＣ５０を解析した。
この結果、６−ヒドロキシベンズブロマロンのＩＣ５０の値は６８μＭ、オキシプリノ
ールのＩＣ５０の値は１３μＭであった。
【実施例４】
【００３５】
年齢２０∼２７歳の健常人男性６名を対象に、ユリノーム２錠（登録商標）（ベンズブ
ロマロンとして１００ｍｇ）を空腹時に水１８０ｍＬと共に単回経口投与し、以後、７２
時間後まで、経時的に採血および蓄尿を行った。得られた血漿及び尿について、ＬＣ／Ｍ
20
Ｓ／ＭＳを用いてベンズブロマロン、６−ヒドロキシベンズブロマロン、ブロモベンザロ
ン及びベンザロンを測定した。なお、６名の被験者については、事前にベンズブロマロン
の代謝に関与するＣＹＰ２Ｃ９に遺伝子変異（ＣＹＰ２Ｃ９＊３）がないことを確認した
。
結果を図３及び図４に示す。
【実施例５】
【００３６】
ベンズブロマロン及び６−ヒドロキシベンズブロマロンの単回投与薬物動態試験
ベンズブロマロン及び６−ヒドロキシベンズブロマロンを、それぞれ１００ｍｇ／ｋｇ
の用量でラットに単回投与した結果、ベンズブロマロンのＣｍａｘ、及びＡＵＣ０−２４
30
ｈｒは、それぞれ９０．１９μｇ／ｍＬ、８８６．５６μｇ・ｈｒ／ｍＬであったのに対
して、６−ヒドロキシベンズブロマロンのＣｍａｘ、及びＡＵＣ０−２４ｈｒは、それぞ
れ３４．５５μｇ／ｍＬ、２９０．８０μｇ・ｈｒ／ｍＬであった。
この結果、６−ヒドロキシベンズブロマロンは、ベンズブロマロンと同様に経口投与に
より良好に消化管から血中に吸収されることがわかった。したがって、６−ヒドロキシベ
ンズブロマロンは経口投与後、血中に吸収された後、尿中に排泄され、近位尿細管上皮細
胞の管腔側膜に存在するＵＲＡＴ１を阻害し、尿酸の再吸収を阻害すると考えられる。
【実施例６】
【００３７】
ベンズブロマロン及び６−ヒドロキシベンズブロマロンの２週間反復投与毒性試験
40
ベンズブロマロン及び６−ヒドロキシベンズブロマロンをそれぞれ１００ｍｇ／ｋｇ／
ｄａｙの用量でラットに１４日間投与した結果、ベンズブロマロン投与群では肝臓重量の
増加（１３．５９ｇ）が認められ、一方、６−ヒドロキシベンズブロマロン投与群では薬
物投与による肝臓重量の増加は認められなかった（９．９０ｇ）。なお、正常対照群の肝
重量は、９．４３ｇであった。
上記の結果から、６−ヒドロキシベンズブロマロンは、ベンズブロマロンよりも肝臓に
対する影響が少ないものであることがわかった。
【実施例７】
【００３８】
ＯＡＴ４（有機アニオントランスポータ）による作用機序の試験結果
50
(11)
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ＯＡＴ４（有機アニオントランスポータ）は近位尿細管管腔側膜に存在し、尿酸などの
有機アニオンを細胞内に取り込む有機アニオントランスポーターであり、その代表的な基
質として硫酸エステロン（estrone sulfate）が知られている。そこで、ＯＡＴ４を発現
しているＳ２細胞を用いて、ベンズブロマロン及び６−ヒドロキシベンズブロマロンの、
ＯＡＴ４による硫酸エステロン（estrone sulfate）の取り込みの阻害作用を実験した。
ベンズブロマロン及び６−ヒドロキシベンズブロマロンが、それぞれ０．０１μｍｏｌ／
Ｌ、０．１μｍｏｌ／Ｌ、１μｍｏｌ／Ｌ、及び３０μｍｏｌ／Ｌ存在下における３Ｈ−
硫酸エステロン（estrone sulfate）（５０ｎｍｏｌ／Ｌ）の取り込み量を測定した。こ
の結果を図６に、なにも存在しないときの３Ｈ−硫酸エステロン（estrone sulfate）の
取り込み量（control）を、１００％としたときの相対値として示した。
10
この結果、ＯＡＴ４における、３Ｈ−硫酸エステロン（estrone sulfate）の取り込み
を６−ヒドロキシベンズブロマロンは用量に相関して阻害し、そのＩＣ５０は３．２μｍ
ｏｌ／Ｌであった。また、ベンズブロマロンのそれは、５．４μｍｏｌ／Ｌであった。
この様に６−ヒドロキシベンズブロマロンはＯＡＴ４における基質の取り込みに対して
阻害作用を有していることから、生体中の６−ヒドロキシベンズブロマロンはＯＡＴ４に
よる尿酸の再吸収を阻害し、尿酸の排泄を促進するものと考えられる。
【実施例８】
【００３９】
ＯＡＴ３（有機アニオントランスポータ）による作用機序の試験結果
ＯＡＴ３（有機アニオントランスポータ）は近位尿細管基底側（血管側）膜に存在し、
20
尿酸などの有機アニオンを細胞内に取り込む有機アニオントランスポーターであり、その
代表的な基質として硫酸エステロン（estrone sulfate）が知られている。そこで、実施
例７と同様にして、ＯＡＴ３を発現しているＳ２細胞を用いて、ベンズブロマロン及び６
−ヒドロキシベンズブロマロンの、ＯＡＴ３による硫酸エステロン（estrone sulfate）
の取り込みの阻害作用を実験した。ベンズブロマロン及び６−ヒドロキシベンズブロマロ
ンが、それぞれ０．０１μｍｏｌ／Ｌ、０．１μｍｏｌ／Ｌ、１μｍｏｌ／Ｌ、及び３０
μｍｏｌ／Ｌ存在下における３Ｈ−硫酸エステロン（estrone sulfate）（５０ｎｍｏｌ
／Ｌ）の取り込み量を測定した。この結果を図７に、なにも存在しないときの３Ｈ−硫酸
エステロン（estrone sulfate）の取り込み量（control）を、１００％としたときの相対
30
値として示した。
３
この結果、ＯＡＴ３による
Ｈ−硫酸エステロン（estrone sulfate）の取り込みを６
−ヒドロキシベンズブロマロンは用量に相関して阻害し、そのＩＣ５０値は０．３μｍｏ
ｌ／Ｌであった。また、ベンズブロマロンのそれは、０．７μｍｏｌ／Ｌであった。
この様に６−ヒドロキシベンズブロマロンはＯＡＴ３における基質の取り込みに対して
阻害作用を有している。
【００４０】
また、ＯＡＴ３による３Ｈ−硫酸エステロン（estrone sulfate）の取り込みにおける
６−ヒドロキシベンズブロマロンの阻害作用を分析（Ｋｉ値）した。結果を図８に示す。
図８の横軸は１／Ｓ（Ｌ／ｍｍｏｌ）であり、縦軸は１／Ｖ（ｍｇ蛋白／μＭ・分）であ
り、黒四角印（■）は６−ヒドロキシベンズブロマロン（０．３μＭ）の場合を示し、白
40
四角印（□）は対照（control）を示す。その結果、その阻害様式は競合阻害と非競合阻
害の混合型であった。それぞれのＫｉ値は、１．０μＭ（競合阻害）、０．７μＭ（非競
合阻害）であった。
したがって、血中の６−ヒドロキシベンズブロマロンの一部は、ＯＡＴ３によってＯＡ
Ｔ３の基質と競合して、近位尿細管上皮細胞内に取り込まれ、細胞内部からＵＲＡＴを阻
害し、尿酸の再吸収を阻害すると考えられる。
【産業上の利用可能性】
【００４１】
本発明は、尿酸排泄促進作用が強く、かつ重篤な肝障害を引き起こすことなく、安全性
の高い高尿酸血症の治療又は予防剤、より詳細には、尿酸排泄促進剤を提供するものであ
50
(12)
り、医薬産業において極めて有用である。
【図１】
【図４】
【図２】
【図５】
【図３】
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(13)
【図６】
【図７】
【図８】
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フロントページの続き
(56)参考文献 European Journal of Medical Research，１９９５年，vol.1，pp.16-20
Xenobiotica，１９９３年，vol.23, No.12，pp.1435-1450
Archives Internationales de Pharmacodynamie et de Therapie，１９６７年，vol.165, No.1
，pp.25-29
(58)調査した分野(Int.Cl.，ＤＢ名)
A61K 31/343
A61P 19/06
A61P 43/00
C07D 307/80
CAplus(STN)
MEDLINE(STN)
BIOSIS(STN)
EMBASE(STN)
CAold(STN)
10

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