TaKaRa TaqTM

Recombinant Taq DNA Polymerase
TaKaRa Taq TM
Code No. R001AP
Size : 250 U
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Stored at -20℃
添付試薬 : 5X PCR Special Buffer (dNTP Plus, MgCl2 Free )
5X MgCl2
Lot No. Expiry Date : ●包装単位 250 U ( 製品コード R001 )
●起源
Escherichia coli carrying the vector encoded the Thermus aquaticus
DNA Polymerase gene
●濃度
5 U/ μ l
●形状
20 mM Tris-HCl (pH8.0), 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT,
0.5% Tween Ⓡ 20, 0.5% Nonidet Ⓡ P-40, 50% グリセロール溶液
●活性の定義
活性化サケ精子 DNA を鋳型/プライマーとして用い、下記の活性測
反応液中にて 74℃において、30 分間に 10 nmol の全ヌクレオチドを酸
溶性沈殿物に取り込む活性を 1 U とする。
●活性測定用反応液組成
25 mM TAPS 緩衝液 (pH9.3, 25℃ ), 50 mM KCl,
2 mM MgCl2 , 1 mM 2- メルカプトエタノール ,
各 200 μ M dATP・dGTP・dTTP, 100 μ M
〔α -32P〕dCTP, 0.25 mg/ml 活性化サケ精子 DNA
●純度
・10 U の本酵素と 0.6 μ g のλ -Hin d III 分解物とを 74℃、1時間反応さ
せても DNA の電気泳動パターンに変化は起こらない。
・10 U の本酵素と 0.6 μ g の supercoiled pBR322 DNA とを 74℃、1時
間反応させても DNA の電気泳動パターンに変化は起こらない。
・10 U の本酵素と 0.6 μ g のλ DNA とを 74℃、1時間反応させても
DNA の電気泳動パターンに変化は起こらない。
●用途
・Polymerase Chain Reaction (PCR) 法による DNA 増幅
・DNA シーケンシング
● PCR 検定
・λ - DNA を用いた PCR 反応(増幅産物 8 kb)において良好な増幅が
見られることを確認している。
・ヒト Genome DNA を鋳型とした single copy gene の PCR 反応 ( 増幅産
物 約 3 kbp ) において良好な増幅が見られることを確認している。
●一般的な PCR 反応液量 (total 40 μ l)
TaKaRa Taq TM (5 U/ μ l)
0.4 μ l
5 × PCR Special Buffer (MgCl2 Free)
8 μ l
5 × MgCl2 8 μ l
Template DNA
X μ g
Primer 1 Y1 μ l または Y2 μ M
Primer 2 Y1 μ l または Y2 μ M
滅菌蒸留水 up to
40 μ l ●注意
・本製品は研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、
臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化
粧品、家庭用品等として使用しないでください。
・タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のた
めの改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
● Cool Start 法
PCR の際の非特異的な増幅を抑える手法としては、ワックスや、専
用試薬、酵素を用いた Hot Start 法が知られていますが、特別な酵素
や試薬を必要としない Cool Start 法により簡便に PCR 時の非特異的
増幅を抑えることができます。
<プロトコール>
(1) 試薬をすべて氷上に置いておきます。
(2) 試薬分注後の反応チューブは、即氷上に置きます。(チューブに加
える試薬の順番は問題になりません。調製後 30 分たってから反応し
ても大丈夫です。)
(3) サーマルサイクラーはスタートするだけの状態にしておきます。
(設定は既存のプログラムで OK です。)サンプル数が多い場合は、サ
ンプルプロッグを 4℃にあらかじめセットしておいてください。
(4) 反応チューブをサーマルサイクラーにセットし、即スタートさせま
す。
●添付試薬の組成
○包装単位
各 1.0 ml
○ 5 × PCR Special Buffer (Mg2+ free) 組成
335 mM Tris-HCl (pH8.3)
83 mM (NH4)2SO4
50 mM 2-Mercaptoethanol
0.085 % BSA
50 %
DMSO
各 5 mM dNTP Mixture
使用上の注意:本 Buffer を凍結状態から融解した際には、溶液は少
し白濁していますので、十分撹拌の上ご使用ください。
○ 5 × MgCl2 組成
15 mM
MgCl2
NOTICE TO PURCHASER: LIMITED LICENSE
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Produced by TAKARA BIOTECHNOLOGY (DALIAN) CO.,LTD.
v2007.01Da
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技術的なお問い合わせ先
TaKaRa テクニカルサポートライン
Tel 077-543-6116 Fax 077-543-1977