Recombinant Taq DNA Polymerase TaKaRa Taq TM Code No. R001AP Size : 250 U Shipping at -20℃ Stored at -20℃ 添付試薬 : 5X PCR Special Buffer (dNTP Plus, MgCl2 Free ) 5X MgCl2 Lot No. Expiry Date : ●包装単位 250 U ( 製品コード R001 ) ●起源 Escherichia coli carrying the vector encoded the Thermus aquaticus DNA Polymerase gene ●濃度 5 U/ μ l ●形状 20 mM Tris-HCl (pH8.0), 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.5% Tween Ⓡ 20, 0.5% Nonidet Ⓡ P-40, 50% グリセロール溶液 ●活性の定義 活性化サケ精子 DNA を鋳型/プライマーとして用い、下記の活性測 反応液中にて 74℃において、30 分間に 10 nmol の全ヌクレオチドを酸 溶性沈殿物に取り込む活性を 1 U とする。 ●活性測定用反応液組成 25 mM TAPS 緩衝液 (pH9.3, 25℃ ), 50 mM KCl, 2 mM MgCl2 , 1 mM 2- メルカプトエタノール , 各 200 μ M dATP・dGTP・dTTP, 100 μ M 〔α -32P〕dCTP, 0.25 mg/ml 活性化サケ精子 DNA ●純度 ・10 U の本酵素と 0.6 μ g のλ -Hin d III 分解物とを 74℃、1時間反応さ せても DNA の電気泳動パターンに変化は起こらない。 ・10 U の本酵素と 0.6 μ g の supercoiled pBR322 DNA とを 74℃、1時 間反応させても DNA の電気泳動パターンに変化は起こらない。 ・10 U の本酵素と 0.6 μ g のλ DNA とを 74℃、1時間反応させても DNA の電気泳動パターンに変化は起こらない。 ●用途 ・Polymerase Chain Reaction (PCR) 法による DNA 増幅 ・DNA シーケンシング ● PCR 検定 ・λ - DNA を用いた PCR 反応(増幅産物 8 kb)において良好な増幅が 見られることを確認している。 ・ヒト Genome DNA を鋳型とした single copy gene の PCR 反応 ( 増幅産 物 約 3 kbp ) において良好な増幅が見られることを確認している。 ●一般的な PCR 反応液量 (total 40 μ l) TaKaRa Taq TM (5 U/ μ l) 0.4 μ l 5 × PCR Special Buffer (MgCl2 Free) 8 μ l 5 × MgCl2 8 μ l Template DNA X μ g Primer 1 Y1 μ l または Y2 μ M Primer 2 Y1 μ l または Y2 μ M 滅菌蒸留水 up to 40 μ l ●注意 ・本製品は研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、 臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化 粧品、家庭用品等として使用しないでください。 ・タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のた めの改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。 ● Cool Start 法 PCR の際の非特異的な増幅を抑える手法としては、ワックスや、専 用試薬、酵素を用いた Hot Start 法が知られていますが、特別な酵素 や試薬を必要としない Cool Start 法により簡便に PCR 時の非特異的 増幅を抑えることができます。 <プロトコール> (1) 試薬をすべて氷上に置いておきます。 (2) 試薬分注後の反応チューブは、即氷上に置きます。(チューブに加 える試薬の順番は問題になりません。調製後 30 分たってから反応し ても大丈夫です。) (3) サーマルサイクラーはスタートするだけの状態にしておきます。 (設定は既存のプログラムで OK です。)サンプル数が多い場合は、サ ンプルプロッグを 4℃にあらかじめセットしておいてください。 (4) 反応チューブをサーマルサイクラーにセットし、即スタートさせま す。 ●添付試薬の組成 ○包装単位 各 1.0 ml ○ 5 × PCR Special Buffer (Mg2+ free) 組成 335 mM Tris-HCl (pH8.3) 83 mM (NH4)2SO4 50 mM 2-Mercaptoethanol 0.085 % BSA 50 % DMSO 各 5 mM dNTP Mixture 使用上の注意:本 Buffer を凍結状態から融解した際には、溶液は少 し白濁していますので、十分撹拌の上ご使用ください。 ○ 5 × MgCl2 組成 15 mM MgCl2 NOTICE TO PURCHASER: LIMITED LICENSE Use of this product is covered by one or more of the following US patents and corresponding patent claims outside the US: 5,079,352, 5,789,224, 5,618,711, 6,127,155 and claims outside the US corresponding to US Patent No. 4,889,818. The purchase of this product includes a limited, nontransferable immunity from suit under the foregoing patent claims for using only this amount of product for the purchaser's own internal research. No right under any other patent claim (such as the patented 5' Nuclease Process claims in US Patents Nos. 5,210,015 and 5,487,972), no right to perform any patented method, and no right to perform commercial services of any kind, including without limitation reporting the results of purchaser's activities for a fee or other commercial consideration, is conveyed expressly, by implication, or by estoppel. This product is for research use only. Diagnostic uses under Roche patents require a separate license from Roche. Further information on purchasing licenses may be obtained by contacting the Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA. Produced by TAKARA BIOTECHNOLOGY (DALIAN) CO.,LTD. v2007.01Da ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 製品についての 技術的なお問い合わせ先 TaKaRa テクニカルサポートライン Tel 077-543-6116 Fax 077-543-1977
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