論文要旨題名 Regulation of development of CD56bright CD11c+

論
文
要
旨
氏名奥田晃子
学位論文
題名 Regulation of development of CD56bright CD11c+ NK-like cells
with helper function by IL-18
【研究目的】
ヒトγδT 細胞は、その活性化や増殖の機序について不明なことが多い。これまで我々
は、IL-2 とゾレドロン酸（ZOL）により刺激されたヒト末梢血中のγδT 細胞の増殖や
機能が IL-18 により著しく増強されること、その増殖には IL-18 によって誘導される
CD56brightCD11c+の新奇 NK 様の細胞が重要な役割をしていることを報告してきた。こ
の新奇 NK 様細胞の誘導の機序とそのγδT 細胞に対する作用機序を明らかにすること
を目的とし、本研究を行った。
【研究方法】
健常人から採取した末梢血単核細胞（PBMC）
（Ficoll-Hypaque 密度勾配遠心にて精製）
を、AlysS505N-O 培地（5%AB 血清添加）を用いて培養した（37℃、5%CO2）。また、
細胞表面マーカーにより、細胞を選別した。γδT 細胞は PBMC を ZOL/IL-2/IL-18 で
刺激することにより、CD56brightCD11c+細胞は、CD3+T 細胞除去 PBMC を IL-2/IL-18
存在下で培養することにより、それぞれ得た。
【研究結果】
PBMC を IL-2/IL-18/ZOL の刺激下で培養したところ、γδT 細胞の増殖に先立ち
CD56brightCD11c+細胞が増殖した。また、γδT 細胞の増殖促進作用は DC や pDC では
観察されず、CD56brightCD11c+細胞のみがγδT 細胞に対する強いヘルパー作用を有する
ことが示された。
γδT 細胞を CD56brightCD11c+細胞と共培養するとクラスターを形成した。クラスタ
ー形成及びγδT 細胞の増殖は ZOL により増強され、CD56brightCD11c+細胞のヘルパー
機能が増強されたことが示唆された。また、IL-2/IL-18 の刺激により CD56brightCD11c+
細胞は CCL21 を産生した。これらは、γδT 細胞のクラスター形成が IL-2/IL-18 の刺激
により増強されることを示している。
CD56brightCD11c+細胞は、CD14+モノサイトと CD56intCD11c+細胞を IL-2/IL-18 の存
在下で共培養することにより誘導し増殖した。IL-2/IL-18 で前処理した CD14+モノサイ
トと CD56intCD11c+細胞を共培養するとクラスターを形成し増殖したが、IFN-DC また
は IL-4-DC ではクラスターは形成しなかった。これらは、CD56intCD11c+ 細胞から
CD56brightCD11c+細胞への誘導には、CD14+細胞の関与と IL-2/IL-18 の存在が必須であ
ることを示唆している。
また、 CD56intCD11c+ 細胞と CD14+ 細胞の直接の細胞間相互作用がなければ、
CD56brightCD11c+細胞の誘導、増殖は起こらなかった。さらに、IL-2/IL-18 の刺激によ
り、CD14+モノサイトの細胞接着因子の発現は増強した。これらのことは、IL-2/IL-18
による CD14+モノサイトの刺激は、強力な細胞間相互作用を介した CD56brightCD11c+細
胞の誘導に必須であることを示している。
【考察】
本研究により、CD56brightCD11c+細胞は IL-2/IL-18 の存在下で CD14+モノサイトと
CD56intCD11c+細胞とを培養することにより誘導され、増殖することが示された。IL-18
は、CD14+ モノサイトと CD56intCD11c+ 細胞との相互作用を増強することにより、
CD56brightCD11c+細胞の誘導に寄与することが示唆された。またモノサイトや DC はこ
の細胞の誘導には関与しないことが示唆された。
以上の結果は、γδT 細胞の活性化や増殖の機序解明に示唆を与えるとともに、γδT
細胞の免疫治療法などの開発に役立つと思われる。

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