CyAnTM ADP ハイスピードフローサイトメーター Compact Design High-End & Muliticolor High Speed Cell Analysis 高性能・コンパクト MoFloTM XDP の DNAを持つ高性能コンパクトセルアナライザー ハイスピードセルソーターの代名詞「MoFlo XDP」の技術をセルアナライザーにフィードバック ベックマン・コールターは、1953年のコールター原理誕生より、常に最新のフローサイトメトリー技術を追求し、 世界初デジタルフローサイトメーターのリリースなど 多くの最新技術をライフサイエンスならびにクリニカルダイアグノスティクス分野に提供し続けてきました。 そして今、新たなコンセプトとして、MoFlo XDP の技術を生かした 世界最速の高性能コンパクトセルアナライザー CyAnTM ADP をお届けいたします。 高性能 ＆ コンパクト 最新のレーザ光源 CyAn ADPは、多重染色に対応したコンパクトセルアナライ CyAn ADPは、レーザ光源に最新の488nm青色固体レーザと ザーとして開発されました。幅30cm、奥行き45cm の省ス 642nm赤色半導体レーザを標準装備し、7色または8色までの ペースに最大 3レーザ 9 色までの細胞解析を可能とした光学 蛍光検出を可能とする2レーザシステム、さらに405nm紫色 系と、1秒間に70,000イベントの細胞解析を可能とする高 固体レーザを加え、9色までの蛍光検出を可能とする3レーザ 速演算回路を持つ高性能コンパクトセルアナライザーとして、 システムの選べる3タイプをご用意しました。最新の高出力赤色 そしてマルチカラー対応セルアナライザーとして、さまざまな 半導体レーザは、APC、APC-Alexa Fluor 750をはじめとする 研究に対応するフローサイトメーターです。 色素を効率的に励起します。紫色固体レーザは、Pacific Blue、 レーザ検出部の光学系、高性能波形処理技術を持つ高速演算 Cascade Yellow、AmCyan、Pacific Orange、Krome 回路など、あらゆる面に新しい技術を投入することで、コンパ Orangeをはじめとする色素を効率的に励起できます。 クト化と高性能化の両立に成功しました。 紫色レーザ 赤色レーザ 青色レーザ レーザ光はフローセルに対し3 方向より入射（3レーザ搭載モデル） 1 CyAn ADP ハイパフォーマンステクノロジー マルチカラーの新しい提案、基本性能強化を最新の光源開発技術から 3ビームスポット方式採用 CyAn ADPは、各レーザ光を異軸に照射し、最大3ビームスポット で散乱光や蛍光を検出します。また、レーザごとにピンホール を通過した蛍光を光電子増倍管に導きます。さらに、安定 性の高い最新式のレーザと短い光路設計の組み合わせによ り、異軸照射方式であっても、お客様によるレーザ間のキャリ ブレーション操作は不要です。これにより、最大 9 色までの蛍 光色素を用いた解析が高感度に行えます。 ダイレクト照射方式採用 CyAn ADP は、発振されたレーザパワーロスとなるファイ 3ビームスポットイメージ図 バーを介さずにフローセルに導かれることで、各レーザの持 つ性能を最大限に生かせる構造になっています。さらに、各 レーザが独立し、短い光路からフローセルに入射する構造 余裕の高出力レーザ CyAn ADPは、従来のセルアナライザーでは標準の、488nm 青色レーザに固体レーザを採用し、20mW出力をロスすること なくフローセルに照射します。また、標準搭載の赤色レーザに、 従来比 3倍の出力の60mW半導体レーザを採用し、安定性 と高出力の両立を実現しました。これにより、APCなどの赤色 レーザで励起する色素がより明るく蛍光を発するため、発現量 であるため、光軸調整が不要になり、本体サイズがコンパク トです。 種類 発振波長 出力 青色レーザ 488nm 20mW 赤色レーザ 642nm 60mW 紫色レーザ 405nm 50mW CyAn ADP 搭載レーザ の少ないマーカーも正確に解析することができます。さらに、 3レーザモデルでは、405nm50mW紫色レーザを搭載し、 出 力を2 倍に増 強しました。しかも、高 出 力で ありながら、 CyAn ADPに搭載のレーザは、使用時の発熱がほとんどな く、電源設備は100Vで運用できます。 赤色レーザの励起効率向上 赤 色 レ ー ザ に は 発 振 波 長642nmの レ ー ザ を 採 用 し、 旧型モデル 20mW 635nm 新型モデル 60mW 642nm allophycocyanin（APC）蛍光色素を使用時にヘリウムネオ ンガスレーザに比べ、励起光率を約10％改善しました。 ヒトリンパ球を抗ヒトNKG2D-APCで染色し測定した例 CyAn ADP 2 高感度蛍光解析をサポート コンパクト・マルチカラーの追求 凝縮した蛍光検出テクノロジーはコンパクト ＆ 高感度 ＆マルチカラー CyAn ADP の蛍光フィルタ 高感度検出 Spherotech社 8peaksビーズ測定 CyAn ADP の光学ブロック 3ビームスポットフィルタカートリッジ 高感度光学検出 蛍光フィルタはフィルタカートリッジに固定されており、光学 コンパクトな光学系を追求し、各蛍光フィルタは12.5mm直径。 ブロックへ差し込むだけで使用でき、調整は必要ありません。 従来フローサイトメーターで標準に用いられた25mm直径 また、 フィルタの交換も簡単で、検出波長デザインもできます。 フィルタの1/4の面積ながら、FITCにて100MESFの高感度 蛍光検出を実現します。また、蛍光検出ダイナミックレンジの 広い光電子増倍管を用いて、最大9色の蛍光検出に対応します。 多彩な蛍光検出レイアウト APC-Alexa Fluor750 標準の2レーザ7カラータイプおよび3レーザ9カラータイプに SSC FITC PE ECD/PI PC5 PC7 488/10 530/40 575/25 613/20 680/30 750LP 545DLP 595DLP 640DLP 730DLP Mirror 485DLP Mirror 450/50 530/40 オプションフィルタキット （ALEXA700 FILTER KIT） を組み 488 95/5 合わせることで、ALEXA700を加えた新たな蛍光検出レイア 405 Mirror 642 Mirror ウトが可能となります。これにより、2レーザモデルは8カラー タイプにアップグレードされます。また、3レーザモデルは赤色 650DLP ＜3レーザ9カラーモデル＞ のPacific buleの蛍光を組み合わせたマルチカラー細胞マー 2レーザモデルは、 CyAn ADP 9 Color アップグレードキット （オプション設定）により、3レーザモデルへのアップグレード が可能です。 色素名 励起レーザ光 最大蛍光波長 色素名 励起レーザ光 最大蛍光波長 FITC 488 530 APC 642 660 PE 488 575 ECD （PE-TexasRed） 642 723 488 613 APC-Alexa Fluor700 PC5（PE-Cy5） 488 670 APC-Alexa Fluor750 642 775 PC7（PE-Cy7） 488 779 Pacific Blue 405 445 PI 488 617 Cascade Yellow 405 550 Krome orange 405 528 ＊ 表記の色素の他、各種アプリケーションに対応する色素につきましては、弊社Webサイトを参照ください。 (http://www.bc-cytometry.com/FCM/sikisohyou-chart.htm) 3 CyAn ADP 665/20 APC レーザ励起にAPC、ALEXA700、 ＡＰＣ-Ｃy7と紫レーザ励起 カー解析に最適な蛍光検出レイアウトとなります。 730DLP Mirror 750LP APC-Alexa Pacific Blue Fluor750 Krome orange SSC FITC RD1 ECD PC5 PC7 488/10 530/40 575/25 613/20 680/30 750LP 488 95/5 545DLP 595DLP 640DLP 730DLP Mirror 642 Mirror 650DLP 690DLP 750DLP Mirror 665/20 720/40 ＜2レーザ8カラーモデル＞ Alexa 700 Filter Kit 使用レイアウト APC APC-Alexa APC-Alexa Fluor700 Fluor750 ＊ 蛍光検出レイアウトに表記の蛍光色素は、フィルタ構成上代表的な色素名の表記となります。 ＊ 2レーザ 7カラーモデルの蛍光検出仕様は、裏面 CyAn ADP の主な仕様を参照ください。 デジタルテクノロジー & オプティクス 高速細胞解析を支える最新波形解析、先端研究のシチュエーションに追従します 405nm 50mW 半導体紫色レーザ 488nm 20mW 固体青色レーザ 642nm 60mW 半導体赤色レーザ 最新の小型空冷高出力レーザを搭載 レーザ制御 CyAn ADP の制御および解析ソフトウエアは統合されおり、すべての操作をSummitソフトウエアで行います。搭載レーザの ON / OFFや、シャッターの開閉操作がコントロール画面で簡単に行え、アプリケーションの切り替えも簡単です。また、各レーザ は定格出力が得られるよう自動で制御され、安定したデータが得られます。 高速デジタル波形解析処理 AdvancedDigitalProcessing（ADP）は、デ ジ タ ル 波 形 処 理 を 行い、検出シグナルの波形を正確に捉えます。また、4つのDSP （デジタル 電圧 25MHz A / Dコンバータにより秒間2,500万回の高密度サンプリングを シグナルプロセッサ） により、各細胞からのパルスの高さ、面積、幅の測定を 高精度かつ高速に解析処理を行います。この技術により高精度な蛍光解析 だけでなく、正確な蛍光補正が行えます。シグナル強度は、65,536レベルで デジタル化され、信号解像度は最大値16,777,216（24ビット）のリニア データとなります。さらに、連続的に得られるシグナルをデッドタイムゼロで 4μ秒のパルス （25,000eps時） を100ポイントで波形解析 解析、高速波形処理を実現し、近接したパルスのアボートを防ぎ高速測定に 対応します。 Abort 他のデジタル回路 Time window Correct CyAn ADPの回路 No Dead-Time Advanced Digital Processingボード Threshold Dead-Time Correct Correct High Speed Event 2 Event 1 CyAn ADP回路 CyAn ADPの回路では、Thresholdを超えたすべてのパルスを取り 込むことができます。CyAnADPの回路はデッドタイムがなく、高速 で測定したときの連続したパルスも取り落としなく測定できます。 CyAn ADP 4 Ready to use 使いたいときにいつでもクイックスタート、わかりやすいアイコンで簡単操作 Summitソフトウエア ・メニューアイコンをクリックするだけの簡単操作 Summitソフトウエアのアイコンにより、データ取得∼解析 操作が簡単です。 2つの機器制御アイコンと4つの解析アイコンから、すべて の操作が始まります。 わかりやすいメニューアイコン また、アプリケーションごとに保存した解析プロトコルを 呼び出すことで、すぐに解析を開始できます。 ・自動スタートアップ / シャットダウン機能 ソフトウエアを起動後、Instrument画面でStartUpボタンをクリックするだけで、流路系 の洗浄、気泡抜き、シース液充填が行われ、測定準備が整います。また、Shutdownボタン 1つで流路系の洗浄が行われ、シャットダウンします。 ・システムモニタ機能 CyAn ADP の状態がすぐに把握できるシステムモニタ機能を搭載。シース液量、廃液量、 洗浄液量、さらに圧力など、Sheath Management Systemをモニタします。また、サン プルチューブが正しくセットされているかなどを、緑色 / 赤色のシグナルインジケータで ステイタスを表示し、お知らせします。 Instrument 画面 ユーザフレンドリーな蛍光補正オペレーション マニュアル蛍光補正 蛍光補正はすべての蛍光検出器間で行えます。 9カラーモデルでは9×9のフルマトリクス 72通りの補正が可能です。 測定中・測定後のメモリ上に取得したデータ による蛍光補正のほか、保存したFCSデータで 行列演算処理を行う自動蛍光補正が行えます。 これにより、蛍光補正時のサンプルのロスを 抑えます。さらに、自動蛍光補正、マニュアル 蛍光補正時に、0チャンネル以下のデータを 表示し、オーバーコンペンセーションを防ぐ 自動蛍光補正 Log VisiComp 5 CyAn ADP lin log CD5 PE-Cy7 VisiComp CD5 PE-Cy7 Log Comp VisiCompを装備しました。 CD56 PE Log Comp CD56 PE VisiComp マルチカラー／レアイベントアプリケーション CyAn ADPなら High-endアプリケーションまで対応 レアイベント解析対応 陽性率 測定精度 （変動係数） 20％ 1つのデータファイル（FCS） に最大１億イベ ントの細胞情報が保存できます。 10％ 5％ 3％ 2％ 5％ 500 2,000 8,000 22,222 50,000 1％ 2,500 10,000 40,000 111,111 250,000 1億イベントのデータでの、0.01%の細胞集 0.5％ 5,000 20,000 80,000 222,222 500,000 団の変動係数を5% 以下に抑え、レアイベント 0.1％ 25,000 100,000 400,000 1,111,111 2,500,000 解析も高精度に行うことができます。レアイベ 0.05％ 50,000 200,000 800,000 2,222,222 5,000,000 ント解析は、母数が測定精度を左右します。 0.01％ 250,000 1,000,000 4,000,000 11,111,111 25,000,000 0.001％ 2,500,000 10,000,000 40,000,000 111,111,111 250,000,000 0.0001％ 25,000,000 100,000,000 400,000,000 1,111,111,111 2,500,000,000 レアイベント細胞の解析精度と測定存在比率（陽性率） に対する測定精度と測定細胞数 SSUn HLADR APC アプリケーション例 R1 Gate: R1 NOT R2 CD11c PE E.coli の生死測定例 膜透過性蛍光色素Syto9（FL1） で全ての菌を染色し、膜不透 過性のPI（Fl3） で死菌を染色。 HLADR APC HLA-DR APC Log Comp FS Lin R2 FITC cocktail Log comp CD3, 14, 16, 19, 20, and 56 CD123 PE 樹状細胞によるレアイベント細胞解析例 Myeloid (HLA-DR+ /CD11c+ ) Plasmacytoid (HLA-DR+ /CD123+ ) CD56 PE Log Comp Lambda FITC Log Comp CD45 CY Log Comp Kappa APC Log Comp mCICCP処理 CD8 PB Log Comp CD19 PE-Texas Red Log Comp CD19 PE-Texas Red Log Comp 9カラーリンパ球サブセット解析例（No Lyse） CD4 PE-Cy5 Log Comp CD8 PB Log Comp CD19 PE-Texas Red Log Comp CD5 PE-Cy7 Log Comp CD3 APC-Cy7 Log Comp mCICCP処理なし CD3 APC-Cy7 Log Comp CD4 PE-Cy5 Log Comp ミトコンドリア膜電位の変化によるアポトーシス測定例 ミトコンドリア膜電位検出蛍光試薬JC-1でHUVEC細胞を染 色し、mCICCPで処理。 CyAn ADP 6 CE9003 2012.10-500（L）
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