351018-2 *平成 16 年 9 月改訂 平成 16 年 1 月作成 グアイアコール生成用 Va-YSG 培地 100 本入 耐熱性好酸性菌鑑別用 グアイアコール検出キット 【製品内容】 Va-YSG 培地 【判定基準】 100 本入 ・ 目 視 比較 し て フ ゙ ラ ン ク よ りも 強 い 褐 色 を 呈す る 場合 を (品目コード:08900) Alicyclobacillus acidoterrestrisまたはグアイアコール産生菌 ・グアイアコール生成用バニリン酸加 YSG 培地 グアイアコール検出キット 100 テスト 2mL×100 本 100 テスト ※検体の色調変化が不明瞭で判定が困難な場合は、インキュ (品目コード:08920) ベート時間を 24 時間に延長して再試験して下さい。 ・試液1:50mM フタル酸水素カリウム緩衝液 ・試液 2:1.3%過酸化水素水 種陽性と判定します。 60mL×2 本 2.5mL×1 本 ・試液3:ペルオキシダーゼ・リン酸緩衝液 2.5mL×1 本 ・陽性コントロール:グアイアコール(1050ppm) 2.5mL×1 本 【使用目的】 耐熱性好酸性菌 Alicyclobacillus acidoterrestris の鑑別 【測定操作法】 (1)Va-YSG 培地に、YSG平板培地で分離した、芽胞を形 成していない新鮮コロニーを 10μL 白金耳にて 1 白金耳懸濁 させて下さい。 (1×108cfu/mL 以上) (2)45±1℃の孵卵器にて 3 時間インキュベートして下さい。 (3)試液1を 1.0mL 加えて下さい。 (4)試液2を 20μL 加えて下さい。 (5)試液3を20μL 加えて下さい。 (6)十分混合して下さい。 (7)5~10 分、室温に放置して下さい。 (8)目視にて反応液の色の変化を確認して下さい。 ※目視判定は 10 分以内に行なって下さい。 ●ブランクの調製 菌を接種しない Va-YSG 培地をブランクとして検体と同 様に(2)~(8)の手順で試験して下さい。 ・目視比較してブランクと同色である場合をグアイアコール産生菌種 陰性と判定します。 ・陽性コントロールがブランクよりも明らかに強い褐色を呈すること で試験結果の有効性を確認して下さい。 【貯法】 冷暗所(2~10℃)保存 【使用上又は取扱上の注意】 1.使用後の培地は必ず高圧蒸気滅菌(121℃・30 分以上) 後、適切な処置を行ない廃棄して下さい。 2.保存条件を厳守して下さい。 3.試液2は過酸化水素水を含んでおりますので、誤って飲 み込んでしまった場合には、すぐに吐き出して水でうが いをして下さい。また、皮膚に触れたり、目に入った場 合には流水で十分に洗い流した後、医師の診断を受けて 下さい。 *【有効期間】 1 年間 【参考文献】 1) Niwa,M.,A.Kawamoto,Development of a rapid detection method of A.acidoterrestris, hazardous bacteria to acidic beverage,Fruit Processing,13,102-107(2003) 2) 丹羽源廣、講座「微生物の分類と同定」1.新規耐熱・ 好酸性菌の分類と諸性質、ソフトドリンク技術資料 2001 年 1 号、9-26(2001) 3) 丹羽源廣ら、果汁協会報 No.531,23-30 酸性飲料有 害菌(A.acidoterrestris)の迅速検出法の開発 4) Niwa,M.,A.kuriyama,A.acidoterrestris RAPID DETECTION KIT,Fruit Processing,13,328-331(2003) 5) 丹羽源廣ら,果汁協会報 No.541 ペルオキシダーゼ法を用いた 果汁からの A.acidoterrestris 直接検出法の提案(2003 年 9 月号) ●陽性コントロールの調製 精製水 2mL に陽性コントロール 100μL を加えて攪拌した後、 極東製薬工業株式会社 検体と同様に(3)~(8)の手順で試験して下さい。 〒103-0024 東京都中央区日本橋小舟町 7 番 8 号 電話 (03)5645-5664
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