高次 Tier データ拡大室内試験（I）：試験原理より現実的な曝露条件下における毒性影響及び Cladoceran 個体数の回復性の測目的定：試験設計 • 野外マイクロコズムより、より小規模でより簡素な試験系の利用 • 野外マイクロコズムより、より繁殖性のよい試験系水及び底質からなる小規模の水槽 • オオミジンコの投入 • 処理後の個体群の観察（生存、繁殖、成体及び幼体の数） • もし絶滅した場合にはミジンコを再投入する • 個体群の回復の観察拡大室内試験（II）：材料及び方法処理前 4-6 週 • 16 個の水槽の設置（22ｘ25ｘ35cm） • 水量 15L（M4）、水深 20cm • 底質重量 1.3kg（天然、2mm の篩、凍結保存、3.5%OC（w/w））、層厚 1.5cm • 水系は僅かにエアレーション • 20±2℃、16:8 時間周期明暗、光強度約 600lux 処理前 2-4 週 • ミジンコ成体 80 個体を投入 • 飼料：週 3 回、第 1 試験；水槽当りの量を決定、第 2 試験；生存ミジンコ当りの量を決定処理 • 放射能標識殺虫剤 • 試験濃度第 1 試験：対照区、溶媒対照区、0.032、0.056、0.10（2 反復区）、0.18、0.32（2 反復区）、0.56（2 反復区）、1.0（2 反復区）、1.8（2 反復区）、3.2ug/L 第 2 試験：対照区（2 反復区）、溶媒対照区（2 反復区）、0.010、0.018、0.032、0.056、 0.10、0.18（2 反復区）、0.32（2 反復区）、0.56、1.00ug/L • 溶媒：N,N-dimethylformamide、0.1mL/L 分析 • 水中放射能量：0 日後（処理 2 時間後）、1、2、4、7、10、14、21、28 日後 59 • 水中代謝物の測定：0 日後（＝2 時間後）、4、7、14、21、28 日後（第 1 試験） • 底質の活性度：4、7、14、21、28 日後（第 1 試験のみ）ミジンコの計数水部分を穏やかに攪拌した後（生物が均一に分布させるため）、懸濁液 250mL を採取した。生物は篩で（メッシュサイズ 0.2、0.6、1.0mm）大きさにより分けた後、数を測定した。3 反復で試料を採取し、0 日後（処理前）、1、2、4 日後、その後は週 3 回の割合で計測した。 60 拡大室内試験（III）：生物学的結果―第 1 試験（ａ）（＊）対照区に対して有意差無し（反復測定ANOVA、p=0.05） 61