Vectalys Lentivirus Particle NEW 形質導入、遺伝子導入の高水準な解決策 ◆ 高純度、高タイター 1×109 （TU/ml）、高品質のready madeなレンチウィルス粒子 ◆ 初代細胞に、高い細胞生存率でほぼ100%の遺伝子導入が可能 Vectalys社とClontech社 が共同で開発しました！ 独自の高い技術で精製した機能性に優れた高品質なウイルス粒子をご提供します。 初代細胞、不死化細胞、接着細胞、浮遊細胞等、様々なタイプの細胞へ遺伝子導入が可能です。 【特長】 ● 幅広く細胞に適応： 神経細胞、内皮細胞、幹細胞や多くの初代細胞にほぼ100%で遺伝子を導入 高いMOI （Multiplicity of infection）で使用でき、初代細胞での高発現が可能 ● 高い細胞生存率： 高純度なので細胞毒性が極めて低く、目的細胞に直接導入可能 ● 機能性タイター： ウイルス粒子数ではない、感染能力を持つウイルス数でウイルス力価を表示 ● 高タイター： >1 ×109 transduction units / ml （TU/ml） ● 安全： SIN型（自己不活性型）で安全性が高い ● 簡便： レンチウイルスパーティクルを解凍して、滴下するだけ （詳しくはウェブカタログをご覧ください） ● 高い導入効率： 【用途】 ✔ iPS細胞作製（リプログラミング因子Oct4、Sox2、Klf4、およびc-Mycを搭載） ✔ Tet 発現誘導 ✔ 細胞局在（オルガネラを蛍光タンパク質で標識） ✔ 細胞トラッキング（蛍光タンパク質発現） 最新技術によるレンチウイルス精製プラットフォームで作製 Vectalys社が開発した独自のプロセスにより、安全で、高タイター、高純度のレンチウイルスベクターを作製します。 単なるウイルス粒子数ではない、高い機能性タイター 機能性タイター ＞1 x 109 TU/ml （transduction unit/ml）。 これは、実質的なHCT116細胞への形質導入率で、細胞へ感染可能な正確なウイルス数です。 本製品には、感染性を持つウイルス粒子が他社の100倍以上含有されています。 100 8000 7000 6000 5000 4000 3000 2000 1000 0 80 60 40 20 0 0 5 10 20 40 60 100 150 200 % GFP positive cells Fluorescence intensity 高タイターと高純度 高ウイルスタイターなので、形質導入の速度、容易性、効率が高く、難しいタイプの細胞にも高効率で感染します。 高純度なので細胞毒性が劇的に低減でき、デリケートな細胞への形質導入効率を上げることも可能です。 図１. Vectalys社GFP発現レンチウイルスのIMR90 細胞への形質導入効率 MOI 5という低い条件でも、高タイターレンチウイルス により95%以上の効率が得られた。MOIを増やすこと で非常に高い発現効率が得られる。 Multiplicity of infection (MOI) 無血清培地でのウイルス産生 ウイルスを無血清培地で産生させることにより、レンチウイルス品質が向上しています。 除去が必要なタンパク質の混入量が少なく、ウイルスタイターを向上できます。その為、高効率で感染します。 幅広い細胞への適応 SIN型ウイルスで、パントロピックなエンベロープタンパク質VSV-Gを持つ組換えレンチウイルスです。 EF1αプロモーターを利用しており初代培養細胞や非分裂細胞等、様々な哺乳類細胞への遺伝子導入が可能です。 ウェブサイト http://www.takara-bio.co.jp 難しい浮遊細胞への遺伝子導入が可能 Jurkat THP１ U937 Raji 図2. レンチウイルス感染が困難な細胞への遺伝子導入 Vectalys社の高度に濃縮された高純度なレンチウイルスは、高いMOIでの感染が可能。ウイルス感染が難しい浮遊細胞でも、 ほぼ100%の導入効率が得られる。（ GFP Positive Cells、 ― Fluorescence intensity） iPS細胞作製用組換えレンチウイルス iPS細胞作製用リプログラミング因子を発現する組換えレンチウイルス。 体細胞にリプログラミング因子（Yamanaka factor； Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc）を導入してiPS細胞を作製できます。4種類の因子を発現するウイルスの他にも、Nanog、Lin28を 加えた個々の因子を発現するウイルスもラインナップしています。ClontechのTet-On®テトラサイクリン遺伝子発現誘導システ ム用も用意しており、発現をコントロールすることが可能です（0027VCT、0028VCTを組み合わせて使用）。 図3. ヒト皮膚繊維芽細胞に導入した リプログラミング因子の免疫染色 左： 各因子の特異的染色 中央： DAPIによる核染色 右： 二重染色イメージ リプログラミング因子発現ウイルスをヒト 皮膚繊維芽細胞に感染させた。 Data provided by I-Stem. -2- Vectalys Lentivirus Particle Tet-On®発現誘導用組換えレンチウイルス Tet-On® 3Gのトランス活性化因子を搭載した組換えレンチウイルス。TREプロモーター搭載ベクターと組合せて、目的遺伝子 のTet発現誘導システムを構築することができます。TRE3Gプロモーター（PTRE3G）の下流に目的遺伝子を挿入したベクターと 同時に使用することにより、ドキシサイクリン（テトラサイクリン誘導体）で発現をコントロールすることができます。 Tet-On® 3Gトランス活性化因子の発現にはEF1αプロモーターを利用しており、初代培養細胞や非分裂細胞を含む哺乳類細 胞への導入が可能です。 細胞内局在化蛍光レンチウイルス（オルガネラ標識） 細胞内オルガネラを明るく蛍光標識する高精製組換えレンチウイルス。核、小胞体、アクチン、ミトコンドリア、チューブリン、エ ンドソーム、ゴルジ体、細胞膜を、2種類の蛍光 ［緑： AcGFP1、赤： mCherry］で標識できます。 細胞内局在化タグを融合さ せた蛍光タンパク質をコードしています。 タンパク質の局在化や動態、トラッキング研究にご利用ください。 細胞内オルガネラの二重染色も可能です。 図5. 細胞内小胞体（ER）を蛍光標識 rLV.EF1.mCherry-ER-9（製品コード 0025VCT）を使用 図4. 細胞内アクチンの蛍光標識 rLV.EF1.mCherry-Actin-9（左： 製品コード 0020VCT）、または rLV.EF1.AcGFP1-Actin-9（右： 製品コード 0013VCT）を用いて 細胞内アクチンの蛍光標識を行った。 細胞蛍光標識用レンチウイルス 極めて明るい蛍光タンパク質遺伝子を搭載した組換えレンチウイルス。 赤： tdTomato 、mCherry、緑： ZsGreen1、青： AmCyan1、黄： ZsYellow1の4色の蛍光を取り揃えています。 目的細胞への導入後、蛍光タンパク質は主に細胞質で発現し、細胞トレースやトラッキングに使用できます。 Vectalys レンチウイルスパーティクル ＝使用実績のある細胞一覧＝ Species Human Primary Cells Stem Cells Mouse Rat Human Mouse Cell Line Pancreatic lslets T Cells Macrophages Foreskins MRC-5 Dendritic HUVEC Other Mouse Monocytes Neurospheres Neurons Oligodendrocytes Mesenchymal Stem cell Hematopoietic Stem Cells A375 Human IMR90 A549 Caco2 DAOY NK92 H9C2 HCC1809 HCT116 HEK293 HEK293T HeLa Hep3B HuH7 Jurket Kit225 MCF-10 MCF-7 Muts-3 OcI Ly10 OcI Ly19 OVCAR3 PC3 THP1 U2OS U937 B16F10 C2C12 LL2 MC38 Min6 N1E-115 EL4 Panc-O2 Renca SP2/0-Ag14 3T3 4T1 INS1-E Rat Hamster CHO-S Vectalys Lentivirus Particle -3- Vectalys 製品一覧 ラ ご購入に際してライセンス確認書が必要となります。 営 営利施設の場合、ご購入前にライセンス（有償）を取得する必要があります。 ★価格はすべて¥205,000（税別）です。 製 品 名 容 量 iPS細胞作製用組換えレンチウイルス rLV.EF1.OSKM-9 rLV.TRE3G.OSKM-9 rLV.EF1.Oct4-9 rLV.EF1.Sox2-9 20 μl×3 rLV.EF1.Klf4-9 rLV.EF1.Myc-9 rLV.EF1.Lin28-9 rLV.EF1.Nanog-9 細胞蛍光標識レンチウイルス rLV.EF1.tdTomato-9 rLV.EF1.mCherry-9 rLV.EF1.ZsGreen1-9 rLV.EF1.AmCyan1-9 rLV.EF1.ZsYellow1-9 20 μl×3 製品コード 備 考 0001VCT 0028VCT 0002VCT 0003VCT 0004VCT 0005VCT 0006VCT 0007VCT Oct4, Sox2, KIf4, cMyc の4因子を含有 Oct4, Sox2, KIf4, cMyc 含有。0027VCTと組合わせ可（iPS、Tet-On用） 003VCT, 004VCT, 005VCTと組合わせ可 002VCT, 004VCT, 005VCTと組合わせ可 002VCT, 003VCT, 0005VCTと組合わせ可 002VCT, 003VCT, 005VCTと組合わせ可 002VCT, 003VCT, 007VCTと組合わせ可 002VCT, 003VCT, 006VCTと組合わせ可 0008VCT 0009VCT 0010VCT 0011VCT 0012VCT 細胞内局在化蛍光レンチウイルス（オルガネラ標識） rLV.EF1.AcGFP1-Actin-9 0013VCT rLV.EF1.AcGFP1-Tubulin-9 0014VCT rLV.EF1.AcGFP1-Golgi-9 0015VCT rLV.EF1.AcGFP1-Nuc-9 0016VCT rLV.EF1.AcGFP1-mito-9 0017VCT rLV.EF1.AcGFP1-Endo-9 0018VCT rLV.EF1.AcGFP1-Mem-9 0019VCT 20 μl×3 rLV.EF1.mCherry-Actin-9 0020VCT rLV.EF1.mCherry-Tubulin-9 0021VCT rLV.EF1.mCherry-Golgi-9 0022VCT rLV.EF1.mCherry-Nuc-9 0023VCT rLV.EF1.mCherry-mito-9 0024VCT rLV.EF1.mCherry-ER-9 0025VCT rLV.EF1.mCherry-Mem-9 0026VCT ® Tet-On 発現誘導用レンチウイルス rLV.EF1.Tet3G-9 20 μl×3 0027VCT ライセンス ラ 営 細胞を赤色蛍光（tdTomato、mCherry）で標識 細胞を緑色蛍光（ZsGreen1）で標識 細胞を青色蛍光（AmCyan1）で標識 細胞を黄色蛍光（ZsYellow1）で標識 ラ 営 アクチンをAcGFP1（緑色蛍光）標識 チューブリンをAcGFP1標識 ゴルジ体を AcGFP1標識 核をAcGFP1標識 ミトコンドリアをAcGFP1標識 エンドソームをAcGFP1標識 細胞膜をAcGFP1標識 アクチンをmCherry（赤色蛍光）標識 チューブリンをmCherry標識 ゴルジ体をmCherry標識 核をmCherry標識 ミトコンドリアをmCherry標識 小胞体をmCherry標識 細胞膜をmCherry標識 ラ 営 TetのTransactivator用。TRE Promoter下流の遺伝子をコントロール ラ 営 本製品は、遺伝子組換え体です。本製品の使用には文部科学省の定める省令（「研究開発等に係る遺伝子組換え生物等の第二種使用等に 当たって執るべき拡散防止措置等を定める省令」平成16年文部科学省・環境省令第1号）にあるP2レベル以上の施設が必要です。 【ベクターマップの例】 rLV.EF1.OSKM-9 （0001VCT） rLV.TRE3G.OSKM-9 （0028VCT） rLV.EF1.Tet3G-9 （0027VCT） ・本パンフレットで紹介した製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等と して使用しないでください。 ・タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。 ・本パンフレットに記載された社名および製品名は、特に記載がなくても各社の商標または登録商標です。 ・ライセンス情報については弊社ウェブサイトにてご確認ください。 ・本パンフレット記載の価格は2014年8月1日現在の希望小売価格です。価格に消費税は含まれておりません。 2014年7月作成G 取扱店 東京支店 TEL 03-3271-8553 FAX 03-3271-7282 関西支店 TEL 077-565-6969 FAX 077-565-6995 TaKaRaテクニカルサポートライン TEL 077-543-6116 FAX 077-543-1977 ウェブサイト http://www.takara-bio.co.jp Facebook http://www.facebook.com/takarabio.jp
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