フォンヴィレブランド因子に結合できない遺伝子組換え第VIII因子抗原分

INACTIVE FVIII: AG IN RECOMBINANT FVIII
921
Abstract: F. A. Ofosu, et al.
Abstract (Laboratory science )
フォンヴィレブランド因子に結合できない遺伝子組換え第 VIII 因子抗原分
画は FVIII 凝固活性をもたない：in vitro 試験
The fraction of recombinant factor VIII:Ag unable to bind von Willebrand factor has
no FVIII coagulant activity: studies in vitro
F. A. Ofosu, H. Tse, A. Naqvi, H. Bhakta and Y. Song
市販の遺伝子組換え型第 VIII 因子（rFVIII）製剤
に含まれる FVIII 抗原（FVIII:Ag）のある分画はフォ
ンヴィレブランド因子（VWF）に結合できないが，
血漿由来 FVIII（pd-FVIII）製剤の FVIII:Ag はす
べて VWF に結合する。本研究の目的は，VWF に
結合できる rFVIII:Ag と結合できない rFVIII:Ag の
FVIII:C を比較することである。rFVIII 製剤
（Kogenate および Advate）と pd-FVIII-pd-VWF
（Fanhdi）の FVIII:Ag 量を ELISA で定量した。各
凝固因子製剤の FVIII:C 1.0 IU を 1.0 nM FIXa，
100 nM FX，1 μM ヒルジンおよび 2 mM 塩化カル
シウムを含有するリン脂質懸濁液に添加することに
Table 2. Activation of 100 nM FX is differentially enhanced by 1.0 IU of
Kogenate, 1.0 IU of Kogenate supplemented with 2.0 IU of VWF, 1.0 IU of
Advate, 1.0 IU of Advate supplemented with 2.0 IU of VWF and Fanhdi
after incubations of 1, 5 and 10 min with1.0 nM FIXa. The [FXa] generated
(nM) was measured by amidolysis of S-2222.
FVIII type
Kogenate
1 min
5 min
10 min
Kogenate-VWF
1 min
5 min
10 min
Advate
1 min
5 min
10 min
Advate-VWF
1 min
5 min
10 min
Fanhdi
1 min
5 min
10 min
Haemophilia (2012), 18, 917–925
©Blackwell Publishing Ltd.
© 2012 Blackwell Publishing Ltd
30
Mean ± SEM
13.51 ± 2.30
50.83 ± 3.02
50.52 ± 3.78
0.55 ± 0.16
25.66 ± 2.07
45.70 ± 1.07
4.73 ± 4.57
40.60 ± 8.05
52.98 ± 4.00
2.42 ± 2.06
22.65 ± 7.79
36.88 ± 7.96
0.48 ± 0.15
23.31 ± 1.39
39.66 ± 2.27
よって FX 活性化を誘導し，FX 活性を 1，5 および
10 分後に測定した。Kogenate または Advate の
FVIII:C 1.0 IU へ pd-VWF 2.0 IU を添加した後も，
同じ処理を行った。Kogenate，Advate および
Fanhdi の FVIII:C 1 IU 当たりに含まれる FVIII:Ag
量はそれぞれ 1.80 ± 0.05，
1.31 ± 0.9 および 0.84 ±
1.5 IU であった。Kogenate と Advate のみが，
FIXa および FX を含有するリン脂質懸濁液に各
FVIII:C を添加後 1 分で，FX の活性化を効率的に
増強した。したがって，FIXa によって既に生成さ
れていた FXa は，対照の Kogenate および Advate
の FVIII:C を速やかに活性化し，それにより FX の
Table 3. Activation of 100 nM FX is differentially enhanced by1.0 IU of
Kogenate, 1.0 IU of Kogenate supplemented with 2.0 IU of VWF, 1.0 IU of
Advate, 1.0 IU of Advate supplemented with 2.0 IU of VWF and Fanhdi
each preincubated with 1.0 nM thrombin or 1.0 nM FXa for 1, 5 or 10 min
followed by addition of 1.0 nM FIXa for 1 min. The [FXa] generated (nM)
was measured by amidolysis of S-2222.
Preincubation with thrombin
Mean ± SEM
Kogenate
1 min
5 min
10 min
Kogenate-VWF
1 min
5 min
10 min
Advate
1 min
5 min
10 min
Advate-VWF
1 min
5 min
10 min
Fanhdi
1 min
5 min
10 min
Preincubation with factor Xa
Mean ± SEM
27.09 ± 3.39
17.20 ± 3.51
11.52 ± 3.82
22.38 ± 2.41
6.10 ± 0.56
2.28 ± 0.22
25.12 ± 2.94
17.62 ± 1.02
7.66 ± 1.21
9.12 ± 1.97
6.46 ± 0.66
4.07 ± 0.32
20.98 ± 1.93
24.46 ± 3.53
22.96 ± 3.73
16.33 ± 2.42
7.57 ± 2.24
4.77 ± 2.20
26.65 ± 7.74
29.60 ± 6.46
14.40 ± 2.83
8.49 ± 2.13
5.72 ± 1.25
4.13 ± 0.73
20.41 ± 2.07
26.43 ± 1.87
21.47 ± 0.87
6.20 ± 0.60
4.04 ± 0.45
3.06 ± 0.25
Haemophilia (2012), 18, 917--925
Abstract: F. A. Ofosu, et al.
活性化を効率的に増強した。これに対し，Fanhdi 中
の VWF は FX の活性化を 10 分まで抑制し続けた。
Kogenate または Advate への pd-VWF の添加は，
Fanhdi と同じレベルまで FX 活性化の増強作用を
10 分まで効率的に抑制した。VWF に結合できない
Kogenate および Advate 中の FVIII:Ag 分画は，in
vitro で VWF を添加しても測定可能な FVIII:C 活性
を示さないことから，不活性と考えられる。
Abstract: C. L. Kempton, et al.
Abstract (Inhibitors )
血友病 A 患者における遺伝子組換え B ドメイン欠損ブタ第 VIII 因子製剤
OBI-1 の薬物動態と安全性
Pharmacokinetics and safety of OBI-1, a recombinant B domain-deleted porcine factor VIII, in subjects with haemophilia A
C. L. Kempton, T. C. Abshire, R. A. Deveras, W. K. Hoots, J. C. Gill, C. M. Kessler, N. S. Key, B. A. Konkle, P.
Kuriakose, D. E. Macfarlane and G. Bergman
OBI-1 は，遺伝子組換え B ドメイン欠損ブタ第
VIII 因子（FVIII）製剤である。FVIII 製剤による
血友病 A 患者の治療ではときに FVIII インヒビター
が発生し，ヒト FVIII による治療が無効になる。今
回我々は，OBI-1 をインヒビター保有血友病 A 患
ほうが Hyate:C 投与群（OSCA：82.3 ± 19.22 U/
メーターを算出した。他の 3 例は，ベースラインで
dL，合成基質法：52.67 ± 13.8 U/dL）より高かっ
た。平均濃度 – 時間曲線下面積（AUC）も，OBI-1
投与群（OSCA：2,082.87 ± 1,323.43 U/h/dL，合
成基質法：1,817.28 ± 625.14 U/h/dL）のほうが
Hyate:C 投与群（OSCA：1,177.8 ± 469.49 U/h/
dL，合成基質法：707.61 ± 420.05 U/h/dL）より
高値であった。輸注関連の 2 件の有害事象を認め，
1 件は Hyate:C 投与時，他の 1 件はプラセボ投与時
のイベントであった。ベースラインでブタ FVIII イ
ンヒビターを認めなかった 5 例中 4 例は，投与後
29 日が経過してもブタ FVIII インヒビターを認め
なかった。OBI-1 単回投与は，ブタ FVIII インヒビ
ターのない血友病 A 患者において Hyate:C よりバ
抗ブタ FVIII インヒビター陽性であり，FVIII 活性
イオアベイラビリティが高いと考えられ，忍容性も
を認めなかった。平均最高血中濃度（Cmax）は，
良好であった。これらの結果は，大規模な第 II 相・
OBI-1 投与群［OSCA：176.00 ± 88.00 U/dL（標
準偏差）
，合成基質法：151.00 ± 31.51 U/dL］の
第 III 相試験で検証しなければならない。
者に単回投与したときの薬物動態と安全性を
Hyate:C と比較することを目的に，患者を Hyate:C
に続いてプラセボを投与する群（Hyate:C 投与群）
とプラセボに続いて OBI-1 を投与する群（OBI-1
投与群）に振り分け，ランダム化二重盲検プラセボ
対照比較試験を行った。FVIII レベルは一段法
（OSCA）と合成基質法の両者で測定した。ランダ
ム化した 9 例中 6 例について FVIII の薬物動態パラ
Haemophilia (2012), 18, 798–804
©Blackwell Publishing Ltd.
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