リーフレット -- TOYOPEARL MX-Trp-650M

トヨパール（ミックスモードクロマトグラフィー）
トヨパール
TOYOPEARL / TSKgel PW
ミックスモードクロマトグラフィー用充填剤（DMF 登録準備中）
New
TOYOPEARL MX-Trp-650（ミックスモード）
ミックスモードゲル TOYOPEARL MXTrp-650Mは親水性ビニルポリマーを基
材としたサイズ排除クロマトグラフィー用
充填剤TOYOPEARL HW-65（タンパク
質排除限界分子量5×10 6）にトリプト
ファンを導入したFFLC用充填剤で、高
吸着量・高分離能で工業用分取に適して
います。
▼
▼
特長
構造
●TOYOPEARL HWタイプの特長は全
て有しています。
TOYOPEARL
HW-65
トリプトファン
●塩濃度の変化で体積変化がありません。
●pHの変化で体積変化がありません。
●耐圧性に優れています。
●TOYOPEARL MX-Trp-650は陽イオ
ン交換型のミックスモードタイプの充
填剤です。高い吸着量を示します。
▼
主な対象物質
●タンパク質、ペプチド
●酵素
トヨパール（ミックスモードクロマトグラフィー）
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ミックスモードゲル
品
名
TOYOPEARL MX-Trp-650M
TOYOPEARL MX-Trp-650M
粒子径（膨潤時）
M（Medium ；50 〜 100μm）
吸着量
（g/L）
≧ 75＊1）
≧ 75＊1）
容量
25 mL
100 mL
M
品番
0022817
0022818
吸着量
＊1 ）
ヒトガンマグロブリンにて測定
価格（円）
30,000
72,000
出荷形態
20 % エタノール水溶液に膨潤した状態で懸濁液
として出荷されます。
トヨパール（ミックスモードクロマトグラフィー）
トヨパール
TOYOPEARL / TSKgel PW
抗体の吸着量の比較
粒子径
イオン交換容量
（eq/L）
（ミクロン）
吸着バッファー（pH 4.7）中の Nacl 濃度
0.10 mol/L（12 mS/cm）
動的吸着量
（IgG）
0.15 mol/L（17 mS/cm）
回収率
動的吸着量
（IgG）
回収率
TOYOPEARL MX-Trp-650M
50 ー 100
0.12
95 g/L
97 %
48 g/L
96 %
市販ミックスモードゲル
平均 75
0.07
14 g/L
86 %
11 g/L
85 %
吸着バッファー：0.05 mol/L 酢酸バッファー（pH 4.7）＋ 0.1 mol/L Nacl
流速：212 cm/h
DBC：10 % ブレークスルーカーブ
▼
ミックスモードゲルおよび陽イオン交換体におけるIgG の
動的吸着量の比較（0.15 mol/L NaCl 存在下、各種 pH）
▼
細胞培養液からのモノクローナル抗体の精製
mAb DBC ＝ 93 g/L
Yield 96 ％
120
TOYOPEARL MX-Trp-650M
TOYOPEARL GigaCap CM-650M
TOYOPEARL GigaCap S-650M
市販ミックスモードゲル
IgG DBC (g/L)
100
80
60
40
0
20
40
60
80
100
120
140 min
20
カラム；TOYOPEARL MX-Trp-650M（6 mm I.D. × 4 cm）
4
4.3
4.7
吸着溶離液；50 mmol/L 酢酸緩衝液（pH 4.7）＋ 0.1 mol/L NaCl
pH
溶出溶離液；0.1 mol/L トリス塩酸緩衝液（pH 8.5）＋ 0.3 mol/L NaCl
流速（吸着）
；1.0 mL/min（212 cm/h）
流速（溶出）
；2.0 mL/min、124 分
検　出；UV（280 nm）
試　料；CHO 細胞培養液（モノクローナル抗体）
試料は、抗体濃度が 1 g/L となるように、吸着溶離液で希釈
60
40
20
0
3.5
8
0.00 mol/L
0.10 mol/L
0.15 mol/L
0.20 mol/L
NaCl
NaCl
NaCl
NaCl
4
6
45
40
80
40
30
60
40
20
10
20
0
0
4
5
5.5
6
35
30
25
20
15
0
4.5
%B
10
50
100
F
（ab’）
2
80
UV［mAU］
12
pH
Human IgG DBC (g/L)
100
120
50
60
CIP
14
mAb
120
conductivity［mS/cm］
▼
TOYOPEARL MX-Trp-650Mによる抗体フラグメントの分離
Fc
▼
動的吸着量における吸着バッファーのpHおよび塩濃度の影響
トヨパール（ミックスモードクロマトグラフィー）
0
50
100
150
6.5
200
250
min
time
Loading buffer pH
カラム；6.6 mm I.D. × 2 cm
カラム；6 mm I.D. × 4 cm
吸着溶離液；0.1 mol/L 酢酸緩衝液＋ 0.2 mol/L NaCl（pH 4.3）
吸着溶離液；0.05 mol/L 酢酸緩衝液（pH 4.0 ー 6.0）＋ 0 ー 0.2 mol/L NaCl
溶出溶離液；0.1 mol/L 酢酸緩衝液＋ 0.4 mol/L NaCl（pH 5.6）
溶出溶離液；0.1 mol/L Tris-HCl 緩衝液（pH 8.5）＋ 0.3 mol/L NaCl
リニアグラジエント（80 分）
流　速；1.0 mL/min（212 cm/h）
流　速；0.86 mL/min（150 cm/h）
検　出；UV（280 nm）
検　出；UV（280 nm）
試　料；ヒトポリクローナル IgG（1 g/L）
試　料；モノクローナル抗体（凝集体含む）, 1 g/L
●動的吸着量は、ブレークスルーカーブ（10 ％高さ）より算
出した。
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