BioDynamics Laboratory 社製品カタログ2013のダウンロード - フナコシ

Contents
コンピテントセル
注目の新製品
Simple miRNA Detection Kit…………………………………
8
DynaMarker ®
Colored DIG Marker for Small RNA
…………………………………………………………………
9, 16
分子量マーカー
コンピテントセル選択ガイド………………………………………
7
クローニング・ライブラリー作製用
Giga Competent Cell ( DH5 α )… ………………………
19
Jet Competent Cell ( DH5 α )… …………………………
20
Competent Cell DH5 α / JM109… ………………………
20
21
分子量マーカー選択ガイド…………………………………………
4
Electrocompetent Cell DH5 α / JM109…………………
RNA サイズマーカー一覧… ………………………………………
6
タンパク質発現用
タンパク質サイズマーカー一覧……………………………………
6
Zip Competent Cell BL21 ( DE3 )………………………
21
Competent Cell BL21… ……………………………………
22
Electrocompetent Cell BL21 ( DE3 )… …………………
22
DNA サイズマーカー
… ………………………………
10
未標識 RNA サイズマーカー ®
RNA Size Marker DynaMarker … ………………………………
11
DNA SizeMarker
DynaMarker ®
RNA サイズマーカー
®
RNA Easy Measurement N DynaMarker … …………………
12
DNA Fragments for RNA High Probe DynaMarker … ……………12
®
®
dsRNA Marker DynaMarker … …………………………………
Small RNA Ⅱ Marker
DynaMarker ®
… …………………………
プレステイン RNA サイズマーカー Prestain Marker for RNA High
DynaMarker ®
… ……………
®
Prestain Marker for Small RNA Plus DynaMarker … ………
Prestain Marker for Small RNA
DynaMarker ®
… ……………
13
13
14
ゲルインディケーターキット
DNA 染色用
Gel IndicatorTM Kit… …………………………………………
23
Gel IndicatorTM DX Kit… ……………………………………
24
Gel IndicatorTM DNA Extraction Kit………………………
25
RNA 染色用
Gel IndicatorTM RNA Staining Solution… ………………
15
15
クローニング・ライゲーションキット
タンパク質サイズマーカー
クローニングキット
未標識タンパク質サイズマーカー
TA Cloning Kit DynaExpress………………………………………
Protein Eco Marker
… ………………………… 16
DynaMarker ®
Protein Recombinant Marker DynaMarker … ……………
®
プレステインタンパク質サイズマーカー
®
Protein Multicolor Ⅲ Marker DynaMarker … ………………
Protein BlueRed Marker
DynaMarker ®
… ……………………
Protein MultiColor, Stable Marker
16
Protein Recombinant MultiColor Marker
17
… ……… 18
……
27
ライゲーションキット
DNA Ligation Kit Ver.2 DynaExpress……………………………
28
17
DynaMarker ®
DynaMarker ®
26
発現ベクター
Expression Vector DynaVector… ………………………………
29
19
分子生物学関連試薬
2
Alkaline Phosphatase from Shewanella sp. SIB1… ……
31
QuickBlue Staining Solution………………………………
31
RNase-free Water… …………………………………………
32
Salmon Sperm DNA… ………………………………………
32
抗 6 × His タグモノクローナル抗体… ………………………
32
Index
6 × Orange Loading Dye… ………………………… 23, 24, 25
50 bp DNA Ladder
DynaMarker
… ………………………………… 11
100 bp DNA Ladder, Version 2
DynaMarker
……………………… 11
Gel Indicator DNA Extraction Kit……………………………… 25
Gel Indicator DX Kit… …………………………………………… 24
Gel Indicator Kit…………………………………………………… 23
Alkaline Phosphatase, Shewanella sp. SIB1,
Gel Indicator RNA Staining Solution… ……………………… 26
Recombinant <PAP>… ………………………………………… 31
JM109, Competent E.coli Cell…………………………………20
Anti-6-His, Mouse-Mono (H21-5) <Anti-6 × Histidine>… 32
JM109, Electrocompetent E.coli Cell… ……………………… 21
BL21, Competent E.coli Cell… …………………………………22
kbp DNA Ladder
BL21(DE3), Competent E.coli Cell… …………………………22
Prestain Marker for RNA
BL21(DE3), Electrocompetent E.coli Cell… …………………22
Protein BlueRed
DynaMarker
… …………………………………… 11
DynaMarker
………………………… 14, 15
DynaMarker
………………………………………… 17
BL21(DE3), Zip Competent E.coli Cell………………………… 21
Protein Eco
BL21(DE3) pLysS, Competent E.coli Cell… …………………22
Protein MultiColor, Stable
BPB Loading Dye, 6 ×…………………………………………… 11
Protein Multicolor Ⅲ
Colored DIG Marker for Small RNA
DynaMarker
………………9, 16
DynaMarker
… …………………………………………… 16
DynaMarker
… ………………………… 18
DynaMarker
…………………………………… 17
Protein Recombinant
DynaMarker
… ……………………………… 16
DH5 α , Competent E.coli Cell… ………………………………20
Protein Recombinant, MultiColor
DH5 α , Electrocompetent E.coli Cell………………………… 21
QuickBlue Staining Solution…………………………………… 31
DH5 α , Giga Competent E.coli Cell… ……………………… 19
RNA Easy Measurement N
DH5 α , Jet Competent E.coli Cell… …………………………20
DNA
DynaMarker
… ……………………………………………… 10, 11
DNA Fragments for RNA High Probe
DNA Ligation Kit Version.2
DynaMarker
……………… 12
DynaExpress
… ………………………28
DNA, Salmon Sperm, Sonicated… …………………………… 32
dsRNA
DynaMarker
… ………………………………………………… 13
Expression Vector
RNA
DynaMarker
… ……………… 19
DynaMarker
…………………………… 12
DynaMarker
… …………………………………………………… 11
Simple miRNA Detection Kit…………………………………… 8
Small RNA Ⅱ
DynaMarker
… ………………………………………… 13
TA PCR Cloning Kit
DynaExpress
… ………………………………… 27
Water………………………………………………………………… 32
λ Hin d Ⅲ Marker… ……………………………………………… 11
DynaVector
………………………………………30
商品コード索引
商品コード
DE110
DE112
DM100
DM112
DM122
DM132
DM152
DM157
DM160
DM170
DM173
DM180
DM185
DM192
DM197
DM210
DM212
DM250
DM253
DM260
DM270
ページ
31
31
11
11
11
11
11
11
11
12
12
13
13
13
13
11
11
15
15
14
9
商品コード
DM310
DM410
DM420
DM430
DM510
DM530
DM550
DM580
DM595
DM610
DM625
DM637
DM637L
DM640
DM650
DM660
DM660L
DM660S
DR110
DR115
DR117
ページ
11
11
11
11
23
23, 24, 25
25
24
26
16
17
17
17
16
19
18
18
18
32
32
32
商品コード
DR120
DR125
DR127
DS105
DS110
DS115
DS120
DS125
DS125L
DS126
DS126L
DS127
DS130
DS130L
DS210
DS210L
DS218
DS220
DS220L
DS225
DS225L
ページ
32
32
32
28
28
28
27
27
27
27
27
27
27
27
20
20
21
20
20
20
20
商品コード
DS225S
DS228
DS229G
DS229M
DS240
DS250
DS255
DS258
DS260
DS500
DS700
DV200
DV210
DV215
DV220
DV230
DV235
F008
F012
F013
ページ
20
21
19
19
22
22
21
22
22
31
8
30
30
30
30
30
30
32
32
32
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
3
分子量マーカー 選択ガイド
多様なラインナップがあり,幅広い分子量をカバーしています。目的に合わせてお選び下さい。
※各製品の詳細は p.10 〜 19 をご覧下さい。
DNA サイズマーカー(p.10)
RNA サイズ
λ d
Hin Ⅲ
RNA Marker
(♯DM310)
RN
(♯ A Hi
g
DM
160 h
)
RN
Sm
kb
(♯ A Lo
w
DM
152 Ⅱ
)
(♯ all R
DM
N
192 A Ⅱ
)
(♯ p La
DM dde
430
r
)
10
(♯ 0 bp
L
DM
420 adde
r,
)
50
(♯ bp L
DM
a
410 dde
r
)
Sm
(♯ all L
a
DM
100 dder
)
)
Hi
(♯ gh D
DM
122
Pla
(♯ smi
DM d D
132
)
Lo
(♯ w D
DM
112
)
Ver
.2
分子量マーカー
DNA Marker
bp
bp
7,000
bp
1,000
7,000
6,000
5,000
6,557
5,000
4,000
4,000
4,000
4,361
1
bp
3,000
base
8,000
9,416
5,000
5,000
4,000
3,000 1
1
2,686
3,000
2,000
2,000
2,000
2,000
1,500
1,500
1,500
1,500
1,500
1,000
1,000
1,000
900
800
700
600
1,000
1,000
500
500
700
700
bp
14,000
10,000
8,000
bp
10,000
23,130
2,500
2,500
700
1
550 1
500
550 1
500
400
400
300
300
bp
500
450
400
350
525 1
500 1
300
300
3,000
3,000
2,322
2,027
2,000
base
500
564
400
400
300
300
500
250
200
200
200
200
200
200
150
1
120
1
100
bp
100
100
100
base
100
100
50
50
75
50
*1 reference indicator
4
50
50
40
40
30
30
20
20
20
200
タンパク質サイズマーカー*2(p.16∼)
Pro
Mu tein Re
(♯ ltiCo com
DM
bina
l
650 or
nt
)
inan
t
Pro
Pr
(♯ tein
R
DM
640 ecom
)
b
Plu
Sm
(♯ all R
DM
N
253 A
)
Sm
(♯ all R
DM
N
250 A
)
RN
(♯ A Hi
g
DM
160 h
)
Protein
Protein
Recombinant Marker Eco Marker
(♯DM610)
(♯ otein
DM
B
625 lueR
)
e
s
Col
for ored
(♯ Sma DIG
M
DM
l
270 l RNA arke
r
)
(♯DM180)
Protein Marker
分子量マーカー
dsRNA Marker Prestain RNA Marker
d
Pro
/ M tein M
(♯ ultiC ultiC
o
o
DM
637 lor St lor Ⅲ
able
)
マーカー(p.11∼)
kDa
230
base
8,000
4,000
140
2,000
kDa
90
bp
1,000
1,000
500
71
95
kDa
150
kDa
150
100
100
80
80
70
66.2
60
500
kDa
97.4
60
400
300
42
200
200
base
100
base
100
75
75
50
50
40
40
40
30
30
30
30
20
20
20
20
base
50
45
44
40
40
30
30
29
20
20
20.1
15
15
14.4
100
32
32
26
27
17
17
50
10
10
*2 プレステインタンパク質サイズマーカーのロット毎の正確な分子量は製品添付のデータシートをご覧下さい。
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
5
RNA サイズマーカー一覧
マーカーの
種類
一本鎖 RNA
分子量マーカー
分子量サイズ
Small RNA
二本鎖 RNA
分子量マーカー
低分子量 RNA
高分子量 RNA
base
base
分子量マーカー( RNA 用・タンパク質用 )
─1
00
プレステインタイプ
( #DM253 )
ゲルイメージ
─ 40
─200
─100
50 ─
40 ─
30 ─
─ 30
─ 20
プレステインタイプ
( #DM260 )
─ 8,000
─ 5,000
─ 4,000
base
─ 3,000
8,000 ─
─ 2,000
─ 1,500 4,000 ─
─ 1,000 2,000 ─
─300
100 ─
75 ─
─ 50
base
─500
─400
base
─ 50
20 ─
10 〜 1,000 bp
─ 500 1,000 ─
500 ─
─ 200
200 ─
─ 20
bp
origin
( well )
─ 1,000
─ 500
─ 400
─ 300
─ 200
─ 100
─
50
─
─
30
20
─
10
標準タイプ
Small RNA Ⅱ
( #DM192 )
RNA Low Ⅱ
( #DM152 )
RNA High
( #DM160 )
dsRNA
( #DM180 )
ローディング
バッファー
プレミックス
タイプ
Small RNA Ⅱ
Easy Load
( #DM197 )
RNA Low Ⅱ
Easy Load
( #DM157 )
─
dsRNA
Easy Load
( #DM185 )
プレステイン
タイプ
Prestain Marker for
Small RNA / Small RNA Plus
( #DM250 / #DM253 )
─
Prestain Marker for
RNA High
( #DM260 )
─
プレステイン
DIG 標識
タイプ
Colored DIG Marker for
Small RNA
( #DM270 )
─
─
─
非変性ゲルで
使用可能な
タイプ
─
─
RNA Easy Measurement N
( #DM170 )
─
タンパク質サイズマーカー一覧
天然タンパク質マーカー
Protein Eco
( #DM610 )
組換え体タンパク質マーカー
Protein Recombinant
( #DM640 )
kDa
97.4 ─
66.2 ─
45 ─
Phosphorylase - b
BSA
kDa
150 ─
100 ─
Ovalbumin
80 ─
未着色
タイプ
29 ─
20.1 ─
Trypsin Inhibitor
14.4 ─
Lysozyme
30 ─
20 ─
15 ─
10 ─
Protein
Protein Recombinant MultiColor
MultiColor Ⅲ( 冷凍タイプ:#DM637 )
( #DM650 )
MultiColor, Stable( 冷蔵タイプ:#DM660 )
kDa
kDa
90 ─
Phosphorylase - b
71 ─
BSA
42 ─
Ovalbumin
32 ─
kDa
230 ─
Myosin
140 ─
95 ─
β -Galactosidase
Phosphorylase-b
150 ─
100 ─
80 ─
60 ─
70 ─
BSA
Carbonic Anhydrase
44 ─
Ovalbumin
26 ─
Trypsin Inhibitor
17 ─
Lysozyme
32 ─
27 ─
Carbonic Anhydrase
Trypsin Inhibitor
20 ─
17 ─
Lysozyme
15 ─
※プレステインタンパク質サイズマーカーのロット毎の正確な分子量は製品添付のデータシートをご覧下さい。
6
60 ─
40 ─
Protein BlueRed
( #DM625 )
プレステイン
タイプ
Carbonic Anhydrase
40 ─
30 ─
用途に合わせてお選びいただけます!
コンピテントセル選択ガイド
用途
タンパク質発現用
クローニング・ライブラリー作製用
品名
Competent
Cell
BL21
商品コード
DS240
DS255
DS250
DS258
DS260
DS229G
DS225
掲載ページ
p.22
p.21
p.22
p.22
p.22
p.19
p.20
E. coli 株
BL21
形質転換効率
( pBR322 )
≧ 2 × 107
≧ 1 × 106
≧ 2 × 107
> 1 × 109
≧ 2 × 107
> 1 × 109
> 1 × 108
> 2 × 108
> 2 × 108
> 1 × 109
操作時間
約 80 分
約5分
約 80 分
−
約 80 分
約 80 分
約 10 分
約 80 分
約 80 分
−
ヒートショック
必要
不要
必要
−
必要
必要
不要
必要
必要
−
回復培養
必要
不要
必要
−
必要
必要
不要
必要
必要
−
DNA と混合
DNA と混合
DNA と混合
DNA と混合
DNA と混合
DNA と混合
DNA と混合
DNA と混合
DNA と混合
氷上で
インキュベート
氷上で
インキュベート
氷上で
インキュベート
氷上で
インキュベート
氷上で
インキュベート
氷上で
インキュベート
エレクトロ
ポレーターにセット
ヒートショック
ヒートショック パルスをかける ヒートショック
ヒートショック
ヒートショック
パルスをかける
氷上で
インキュベート
氷上で
インキュベート
氷上で
インキュベート
氷上で
インキュベート
氷上で
インキュベート
回復培地を
加える
回復培地を
加える
回復培地を
加える
回復培地を
加える
回復培地を
加える
培養
培養
培養
培養
培養
プレーティング
プレーティング
青白
スクリーニング
誘導発現
BL21( DE3 )
pLysS
BL21( DE3 )
エレクトロ
氷上で
インキュベート ポレーターにセット
プレーティング プレーティング プレーティング
−
λ ファージ
CE6 の感染が
必要
DS220
DS210
DS228
プレーティング
DS218
p.21
JM109
回復培地を
加える
プレーティング
Electrocompetent
Cell
JM109 / DH5α
p.20
DH5α
JM109
回復培地を
加える
回復培地を
加える
培養
培養
プレーティング
プレーティング
◎( IPTG の添加不要 )
○
◎
○
−
lon protease と ompT membrane protease 遺伝子の欠損により
発現タンパク質の分解を防止
IPTG による T7 RNA ポリメラーゼ誘導
−
Competent
Cell
JM109
DH5 α
IPTG 添加
その他の
特長
Competent
Cell
DH5α
コンピテントセル
操作手順
Zip Competent
Electrocompetent Competent Cell Giga Competent Jet Competent
Competent Cell
Cell
Cell
BL21( DE3 )
Cell
Cell
BL21( DE3 )
BL21( DE3 )
BL21( DE3 )
pLysS
DH5α
DH5α
T7 リゾチーム
に よ り, バ ッ
ク グ ラ ウ ンド
タン パ ク 質 の
発 現レ ベ ル を
低下
− 80℃で 6 か
月間 保 存し て
も形 質 転 換 効
率 は ほと ん ど
低下しない。
− 80℃で 12 か月間保存しても形質転換効率はほとんど
低下しない。
DH5αと JM109 のいずれも X-gal を用いた青白スクリーニングが可能だが,
DH5αは IPTG を必要とせずに青白スクリーニングが可能
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
7
注目の新製品
Simple miRNA Detection Kit
注目の新製品
RT-PCR により miRNA を簡単・迅速に検出するキットです。
特 長
●対象の miRNA を RT-PCR により検出します(プライマー
● PCR 産物のサイズから,miRNA かその他の低分子 RNA
かの判断を行えます。
はお客様が準備)。
●piRNA や 3’末端がメチル化された植物 miRNA など
Poly(T)タグが付加しにくい低分子 RNA も,独自の
ON tag によりバイアス無く検出できます。
Heart
M a b
c
Brain
d a b
c
Spleen
d a b
c
1
2
d
bp
bp
100
75
60
50
40
100
30
75
60
50
40
20
30
図 3. マウス piRNA の検出
マウス精巣 total RNA から,マウス piR-1
( DQ539889, Mus musculus )を検出した。
®
Lane 1: 分子量マーカー ( DNA SmallDynaMarker , #DM100 )
Lane 2: Target mouse piR-1
20
図 1. ヒト各組織( 心臓,脳,脾臓 )の total RNA からの
miRNA の検出
本キットで増幅した RT-PCR 産物を 10% ポリアクリルアミドゲルで電
気泳動した。PCR の際に,それぞれ下記に対するプライマーを用いた。
Lane a :hsa-miR-16-5p
Lane b:hsa-miR-24-3p
Lane c :hsa-miR-30c-5p
Lane d:hsa-miR-93-5p
®
Lane M:分子量マーカー( DNA SmallDynaMarker , #DM100 )
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
1
2
bp
図 4. 植物 miRNA の検出
100
Arabidopsis thaliana total RNA から,ath-
miR173( MIMAT0000206 )を検出した。
ath-miR173 は 3' 末端が 2'-O - メチル化されて
いることが知られている。
75
60
50
40
bp
100
30
75
60
50
40
20
®
Lane 1: 分子量マーカー( DNA SmallDynaMarker , #DM100 )
Lane 2: Target ath-miR173
30
20
図 2. 段階希釈した HL-60 total RNA からの miRNA の検出
様々な量の HL-60 細胞由来 total RNA で,本キットと hsa-miR-2233p に対するプライマーを用いて RT-PCR を行い,10% ポリアクリルア
ミドゲルで電気泳動した。
Lane:
1
2
3
4
5
6
RNA 量(ng): 50
20
10
5
2
1
Lane:
7
RNA 量(ng): 0.5
8
0.2
9
0.1
10
0.1
11
0.02
12
0
®
Lane M:分子量マーカー( DNA SmallDynaMarker , #DM100 )
キット内容
◉ Ligation buffer *1
◉ RNase-free water
◉ Ligase 3’
◉ Optimum RT buffer *2
◉ Reverse transcriptase
◉ Ampli buffer
◉ Taq DNA polymerase
操作方法概略
5’
P
1. miRNA にON tagを付加する。
Ligation
miRNA
OH 3’
ON Tag
5’
*1 ON tag が含まれています。
*2 Universal primer が含まれています。
※ キットに各 miRNA に特異的なプライマーは含まれていません。
2.
逆転写反応を行う。
Reverse transcription
3.
PCRを行う。
RT primer
microRNA specific primer
Universal reverse primer
Amplified product
8
品名
メーカー 商品コード
包装 /
価格(¥)
1 kit /
32,000
Simple miRNA Detection Kit
BDL
DS700
Colored DIG Marker for Small RNA DynaMarker
注目の新製品
®
RNA マーカーの各バンドを青色色素と共に DIG( ジゴキシゲニン )で標識した製品です。
電気泳動およびメンブレンへの転写効率の確認だけでなく,DIG 修飾プローブを用いたノーザンハイブリダイゼーションに
おいて分子量マーカーとして使用できます。
※可視光色素のみで標識したプレステイン RNA マーカーは p.14 を,非標識の RNA マーカーは p.11 をご覧下さい。
特 長
ノーザンハイブリダイゼーション時の分子量の確認について
◉miRNA などの Small Size RNA のノーザンハイブリダ
イゼーションに大変有用です。
◉電気泳動やメンブレンへの転写効率のモニタリングに最
適です(図 2)。
◉マーカーを構成する着色済み核酸に DIG を導入していま
す。アルカリホスファターゼ修飾された抗 DIG 抗体およ
び化学発光基質を用いることで検出可能です( 図 3 )
。
◉Small RNA の電気泳動用分子量マーカーである Small
これまで非 RI 条件におけるノーザンハイブリダイゼーション時の
分子量の確認は,主にマーカーレーンを含むゲル部分を切り離して
EtBr で染色したり,メンブレンへ転写後,メチレンブルーなどによ
る色素染色 1 をすることによって行われていました。
本製品は DIG 標識してあるため,抗 DIG 抗体を用いて検出が可
能です。また,従来の DynaMarker Prestain Marker for RNA シ
リーズ同様,可視光色素修飾しているので,電気泳動中のモニタリ
ングおよびメンブレンへの転写効率の確認にも使用できます。
参考文献
1. "Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd ed." ,: Chapter
7.36, Cold Spring Harbor Laboratory Press( 2001 ).
RNA Ⅱ DynaMarker ( #DM192:p.13 参照 )との高い一
®
致率を実現しました。
◉加熱変性操作なしで,そのままアプライ可能です。
1
2
3
base
100
75
転写
50
40
30
20
ナイロンメンブレン
12.5%変性アクリルアミドゲル
図 1: 12.5%アクリルアミド- 7.5M 尿素変性ゲルを用いた
電気泳動像
図 2:
左 図:12.5%アクリルアミド- 7.5M 尿素変性ゲルを用いた電気泳
動像
Lane 1:本製品( 5 μl )
Lane 2:ヒト胸部組織由来 total RNA(5 μg)
Lane 3:MCF-7 細胞( Breast Adenocarcinoma )由来 total
RNA( 5 μg )
右 図:転写後のナイロンメンブレン
ハイブリダイゼーション
および検出
ナイロンメンブレン
品名
メーカー 商品コード
DM270
miR-16
( 露光時間:10 分 )
包装 /
価格(¥)
1 kit /
35,000
Colored DIG Marker for Small RNADynaMarker
BDL
miR-21
青色色素と共に DIG で標識した RNA マーカー。約 25 回分。
図 3:DIG 標識 DNA プローブを用いたノーザンハイブリダイゼー
ションによる,total RNA 中からの各種 miRNA の検出
抗体:アルカリホスファターゼ修飾抗 DIG 抗体
基質:CDP-Star® *
* CDP-Star® は Life Technologies 社の登録商標です。
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
9
分子量マーカー
DNA サイズマーカー
DNA Size Marker DynaMarker
®
視認性に優れた DNA サイズマーカーです。
分子量マーカー( DNA 用 )
特 長
⃝あらかじめ loading dye に溶解されている Ready-to-use タイプの DNA サイズマーカーで,そのままアプライできます。
⃝各バンドは正確に濃度調製されており,試料を概算定量できます。
⃝UV イルミネーター上で見やすいバンドパターンです。
⃝識別しやすい青色で,扱いやすい 6 × BPB loading dye( 1 ml )が DNADynaMarker 全製品に添付されています。
®
DNA Low D DynaMarker®
DNA High D DynaMarker®
bp ng / 10 μl
─1,000 20
─ 700 14
─
─
550 22
500 20
─ 400 16
─ 300 18
─ 200 20
─ 120 30
─ 100 30
─
50 30
bp ng / 10 μl
─10,000
─ 7,000
─ 5,000
─ 4,000
─ 3,000
─ 2,500
─ 2,000
─ 1,500
20
20
20
20
20
20
20
20
─ 1,000 20
─
700 19
─
─
525
500
─
300 18
21
20
bp ng / 10 μl
─7,000
─5,000
─4,000
─3,000
─2,686
20
20
20
20
20
─2,000 20
─1,500 15
─1,000 20
─ 700 14
─ 550
─ 500
22
20
─ 400 16
─ 300 18
─ 200 20
3.5 % アガロースゲル , 1 × TAE
0.8 % アガロースゲル , 1 × TAE
1.2 % アガロースゲル , 1 × TAE
DNA Small DynaMarker®
50 bp DNA Ladder DynaMarker®
100 bp DNA Ladder, Version 2 DynaMarker®
bp
─ 100
─
75
─
60
─
50
─
40
─
30
─
20
bp
─ 500
─ 450
─ 400
─
─
─
─
350
300
250
200
─ 150
─ 100
─
50
10 % アクリルアミドゲル,1 × TBE
3.5 % アガロースゲル , 1 × TAE
kbp DNA Ladder DynaMarker®
λ Hin d Ⅲ Marker
kbp
bp ─14.0
─10.0
─23,130
─
─
─
─
─
─
─
─
8.0
6.0
5.0
4.0
3.0
2.5
2.0
1.5
─ 1.0
─ 9,416
─ 6,557
─ 4,361
─ 2,322
─ 2,027
─ 0.5
─ 0.2
0.8 % アガロースゲル , 1 × TAE
10
DNA for Plasmid D DynaMarker®
─
564
0.8 % アガロースゲル , 1 × TAE
bp
─
*well
─ 3,000
─ 2,000
─ 1,500
─
─
─
─
─
─
1,000
900
800
700
600
500
─
100
─
─
─
400
300
200
2 % アガロースゲル , 1 × TAE
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
DM112
1 set /
15,000
DNA High D DynaMarker
DM122
1 set /
15,000
BDL
DM420
1 set /
13,000
※本製品はアガロースゲル電気泳動用で , アクリルアミド電気泳動に
は適していません。
kbp DNA Ladder DynaMarker
DNA for Plasmid D DynaMarker
BDL
DM132
1 set /
15,000
マーカーサイズ:200 〜 7,000 bp
容量:1 ml( 5 〜 10 μl / lane )
DM430
1 set /
13,000
各バンドの濃淡の比較により , 試料 DNA 量を概算できる。3.0 kb
のバンド強度が高くなっている。loading dye 添付。容量:100 μg
/ 500 μl( 1 〜 2.5 μl / lane ), DNA 断片のサイズ:0.2, 0.5, 1.0,
1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 4.0, 5.0, 6.0, 8.0, 10.0, 14.0 kb
λ Hin d Ⅲ Marker
■ その他のマーカー
品名
メーカー
価格(¥)
分子量マーカー( DNA・RNA 用 )
マーカーサイズ:300 〜 10,000 bp
容量:1 ml( 5 〜 10 μl / lane )
BDL
包装 /
100 bp ラダー( 100 〜 1,000 bp までの 100 bp 間隔の DNA
断片 10 種と , 1,500, 2,000, 3,000 bp の DNA 断片の混合物 )
。
loading dye 添付。容量:60 μg / 500 μl( 0.5 〜 2 μl / lane )
マーカーサイズ:50 〜 1,000 bp
容量:1 ml( 5 〜 10 μl / lane )
BDL
商品コード
100 bp DNA Ladder, Version 2 DynaMarker
DNA Low D DynaMarker
BDL
品名
メーカー
BDL
商品コード
包装 /
価格(¥)
1 set /
16,000
DM310
1 set /
10,000
包装 /
価格(¥)
loading dye 添付。容量:100 μg / ml
DNA Small DynaMarker
BDL
DM100
20,30,40,50,60,75,100 bp の長さの平滑末端を有する二
本鎖 DNA を用いた DNA マーカー。6 × BPS loading dye 添付。
容量:7 μg / 50 μl( 1 μl / lane )
※本製品は高濃度アガロースゲルを用いた電気泳動で使用可能です
が,非変性アクリルアミドゲルを用いた場合より高分解能な電気
泳動が可能。
■ BPB ローディングダイ
品名
メーカー
商品コード
BPB Loading Dye, 6 ×
BDL
DM212
2 × 1 ml /
3,000
BDL
DM210
4 × 1 ml /
5,000
50 bp DNA Ladder DynaMarker
BDL
DM410
1 set /
13,000
50 bp ラダー( 50 〜 500 bp までの 50 bp 間隔の DNA 断片 10 種
の混合物 )
。
300 bp のバンド強度が高くなっている。
loading dye 添付。
容量:60 μg / 500 μl( 2.5 〜 5 μl / lane )
RNA サイズマーカー
RNA Size Marker DynaMarker
®
未標識 RNA サイズマーカー
変性ゲルでの RNA 電気泳動に適したサイズマーカーです。
base
base
500
400
500
400
300
base
8,000
5,000
4,000
3,000
300
200
200
100
2,000
1,500
100
1,000
50
RNA Low Ⅱ Easy Load DynaMarker®
( 0.7 μg / 5 μl )
ゲル組成:5 % アクリルアミド
8M 尿素 , 1 × TBE
RNA High DynaMarker®
( 0.9 μg / 1 μl )
ゲル組成:1 % ホルムアルデヒド
アガロース
品名
メーカー
特 長
⃝変性ゲル電気泳動用の RNA サイズマーカーです。バンド
の濃淡の比較によって試料 RNA の量が概算できます。
商品コード
包装 /
価格(¥)
RNA Low Ⅱ DynaMarker
BDL
200
20
RNA Low Ⅱ DynaMarker®
( 0.7 μg / 1 μl )
ゲル組成:5 % アクリルアミド
8M 尿素 , 1 × TBE
品名
メーカー
500
50
20
DM152
BDL
50 μg /
25,000
形状:溶液 , 容量:50 μg / 72 μl( 0.7 mg / ml ),
RNA 断片のサイズ:20, 50, 100, 200, 300, 400, 500 base
包装 /
価格(¥)
DM157
− 80℃
1 kit /
25,000
RNA loading buffer PA 添付。
形状:溶液 , 容量:25 μg / 125 μl( 0.2 mg / ml ),
RNA 断片のサイズ:20, 50, 100, 200, 300, 400, 500 base
RNA High DynaMarker
BDL
− 80℃
商品コード
RNA Low Ⅱ Easy Load DynaMarker
DM160
− 80℃
50 μg /
25,000
形状:溶液 , 容量:50 μg / 56 μl( 0.9 mg / ml ),
RNA 断 片 の サ イ ズ:200, 500, 1,000, 1,500, 2,000, 3,000,
4,000, 5,000, 8,000 base
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
11
RNA Easy Measurement N DynaMarker
®
非変性ゲルでの RNA 電気泳動に適したローディングバッファーと分子量マーカーのセットです。
分子量マーカー( RNA 用 )
base
8,000
特 長
⃝添付の RNA loading buffer AG + により,ホルムア
ルデヒド変性ゲルだけでなく,1 × TAE や 0.5 × TBE
5,000
ホルムアルデヒド
変性アガロースゲル
非変性
アガロースゲル
⃝R NA High AGN
は RNA High
3,000
2,000
1,500
1,000
の非変性ゲルでの電気泳動も容易にできます。
DynaMarker ®
4,000
500
DynaMarker ®
200
( #DM160 : p.11 参 照 ) と 同 種 類 の,200,500,
1,000,1,500,2,000,3,000,4,000,5,000,8,000
塩基の RNA から構成されています。
⃝各バンドの RNA 濃度は 0.1 μg / μl に調製されている
ため,バンドの濃淡の比較によって試料 RNA の量が概
算できます。
ゲルローディング液の調製方法
®
RNA High AGN DynaMarker ( 0.45 μg / well:
左端)と,
ヒト組織全 RNA( 0.4 μg / well )を,
RNA loading buffer AG +( ホルムアルデヒ
ド添加済み )で調製した後,各アガロースゲル
で電気泳動を行った。変性ゲルおよび非変性ゲ
ルのいずれでも同様の泳動パターンを示した。
ゲル組成:1% ホルムアル
デヒドアガロース
®
左)
High AGN DynaMarker
( 0.45 μg )
右)
ヒト全 RNA( 0.4 μg )
1 . 本製品の RNA loading buffer AG + とホルムアルデ
ヒド * を混合し,ホルムアルデヒド添加 RNA loading
buffer AG + を作製する。
2 . 作製したホルムアルデヒド添加 RNA loading buffer
AG + を RNA High AGN DynaMarker または RNA 試料
®
と混合し,熱処理して,電気泳動に使用する。
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
1 set /
25,000
RNA Easy Measurement N DynaMarker
BDL
DM170
− 80℃
形 状: 溶 液, 容 量:25 μg / 28 μl, セ ッ ト 内 容: RNA High
AGN DynaMarker( 0.9 mg / ml ), RNA loading buffer AG +( 1 ml )
*ホルムアルデヒドは,本製品には含まれていません。
●関連製品
DNA Fragments for RNA High Probe DynaMarker
®
RNA マーカーハイブリダイゼーション用プローブ作製のためのニ本鎖 DNA です。
base
特 長
⃝RNA High
8,000
5,000
4,000
3,000
( #DM160:p.11 参照)および
DynaMarker ®
RNA High AGN
( RNA Easy Measurement
DynaMarker®
N DynaMarker ( #DM170:上記参照)に添付)とのハイ
®
2,000
1,500
ブリダイゼーション用プローブを作製するための DNA
1,000
断片です。
500
⃝ノーザンハイブリダイゼーションの際,RNA High DynaMarker
®
と RNA High AGN
DynaMarker®
200
のすべての RNA バンドを検
出できます。
ノーザンハイブリダイゼーションの例
®
RNA High DynaMarker( #DM160 )を 1%
ホルムアルデヒドアガロースゲルで電気
泳動した後,ナイロンメンブレンにトラ
ンスファーした。
アルカリホスファターゼ標識した本製品
をハイブリダイズし,化学発光法により
シグナルを検出した。
⃝ラ ジオアイソトープ末端標識,または非ラジオアイソ
トープ標識に適しています。
⃝リ ン酸化された 5' 突出末端を持つ二本鎖 DNA( 約
170 bp と約 200 bp)から構成されています。
品名
メーカー
商品コード
BDL
DM173
容量:5 μg / 50 μl
12
包装 /
価格(¥)
5 μg /
15,000
DNA Fragments for RNA High Probe DynaMarker
dsRNA Marker DynaMarker
®
ニ本鎖 RNA サイズマーカーです。
origin
( well )
origin
( well )
1,000−
1,000−
500−
400−
300−
200−
⃝s iRNA や miRNA をはじめとする二本鎖 RNA の分析に
使用できる dsRNA サイズマーカーです。非変性ポリア
クリルアミドゲル電気泳動用に調製されており,二本鎖
RNA の分子量の確認に適しています。
30−
■ dsRNA DynaMarker
500−
400−
300−
200−
100−
50−
100−
50−
30−
20−
20−
10−
10−
®
⃝10 〜 1,000 bp の二本鎖 RNA 断片から成る RNA マー
カーです。
⃝20 bp のバンドは,マーカー 1 μl あたり 25 ng に調製
されています。
■ dsRNA Easy Load DynaMarker
®
⃝d sRNA ( #DM180 ) と同サイズの RNA 断片から成る
Ready-to-use タイプの RNA マーカーです。
⃝20 bp のバンドは,マーカー 5 μl あたり 25 ng に調製
されています。
⃝非変性アクリルアミドゲル用のローディングバッファーが
添付されています。
分子量マーカー( RNA 用 )
特 長
bp
bp
Dicer での分解により生じた約 21 bp
の二本鎖 RNA がマーカーの位置から
確認できる。
左レーン:dsRNA DynaMaker®( 0.5 μg )
右レーン:Dicer で 分 解 し た 二 本 鎖
RNA
ゲル組成:7.5 %アクリルアミド,
1 × TBE
®
dsRNA Easy Load DynaMaker
( 5 μl )
ゲル組成:7.5 %アクリルアミド,
1 × TBE
品名
メーカー
商品コード
包装 / 価格(¥)
dsRNA DynaMarker
BDL
DM180
− 80℃
25 μg /
29,000
非変性アクリルアミドゲル用。形状:溶液,容量:25 μg / 100 μl( 2 μl / lane )
dsRNA Easy Load DynaMarker
BDL
DM185
− 80℃
1 kit /
29,000
非変性アクリルアミドゲル用。Loading buffer 添付。形状:溶液,容量:25 μg / 125 μl
Small RNA Ⅱ Marker
DynaMarker®
small RNA サイズマーカーです。
特 長
⃝miRNA や siRNA をはじめとする small RNA の分析に
最適な RNA サイズマーカーです。各バンドはシャープで
視認性に優れています。
■ Small RNA Ⅱ
base
base
100
100
50
50
40
40
30
30
20
20
DynaMarker ®
⃝5 種類の一本鎖 RNA( ssRNA:20,30,40,50,100
⃝変性ポリアクリルアミドゲルを用いた電気泳動に適してい
ます。
■ Small RNA Ⅱ Easy Load DynaMarker
®
®
塩基 )で構成されています。
®
⃝Small RNA Ⅱ( #DM192)と同じサイズの RNA 断片か
ら成る Ready-to-use タイプの RNA マーカーです。熱処
理後,すぐにアプライできます。
⃝変性ポリアクリルアミドゲルを用いた電気泳動に適してい
ます。
⃝変性ポリアクリルアミドゲル用のローディングバッファー
Small RNA Ⅱ DynaMaker
Small RNA Ⅱ Easy Load DynaMaker
( 1 μl )
( 5 μl )
ゲル組成:12.5 %アクリルアミド, ゲル組成:12.5 %アクリルアミド,
7.5 M 尿素,1 × TBE
7.5 M 尿素,1 × TBE
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
Small RNA Ⅱ DynaMarker
BDL
DM192
− 80℃
30 μl /
25,000
1 kit /
25,000
容量:30 μl( 約 30 回分 )
Small RNA Ⅱ Easy Load DynaMarker
BDL
DM197
− 80℃
Loading buffer 添付。容量:125 μl( 約 25 回分 )
が添付されています。
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
13
Check!
Prestain Marker for RNA DynaMarker® シリーズの特長
これまで電気泳動の終点の確認には,Bromophenol blue( BPB )や Xylene cyanol などの低分子色素を基準とし
分子量マーカー( RNA 用 )
てきました。しかし,これら色素はゲル濃度や泳動条件によって移動度が大きく変化してしまうため,泳動しすぎなどの
トラブルの原因となっていました。特に RNA のような貴重な試料の電気泳動において,失敗は避けたいものです。
Prestain Marker DynaMarker シリーズは着色した核酸鎖で構成された,変性ポリアクリルアミドゲル用( #DM250:p.15 参照,
®
#DM253:p.15 参照 )および変性アガロースゲル用( #DM260:本ページ参照 )のプレステインマーカーです。低分子色素と
は異なり,核酸鎖を骨格としているため,ゲル濃度や泳動条件による見かけ分子量の変化がほとんどありません。また実際の核酸
鎖と同様に,シャープなバンドが得られます。
さらには,メンブレンへの転写も可能ですので,ノーザ
ンブロッティング時のブロッティング効率を確認できる
ことも最大の特長の一つです。プレステインマーカーを
同時にブロッティングすることにより,メンブレンの上
下左右を間違えることもなくなります( 右図参照 )。
Prestain Marker for RNA
DynaMarker ®
電気泳動
上下左右も一目瞭然!
転写後もシャープ!
ノーザンブロッティング
シリーズの仕様
Small RNA Plus
( #DM253 )
品名( 商品コード )
RNA High
( #DM260 )
Small RNA
( #DM250 )
バンドのサイズ( base )
200 〜 8,000
20 〜 50
バンドの色
青,紫
適応ゲル
変性アガロース
変性ポリアクリルアミド
対応した
未着色 RNA マーカー
RNA High( #DM160 )
Small RNA Ⅱ( #DM192 )
用途
高分子 RNA の電気泳動
プレステイン RNA サイズマーカー
Colored DIG Marker for
Small RNA( #DM270 )
20 〜 100
青,赤
Small RNA 研究
青
miRNA 前駆体までカバー
Small RNA のノーザン
ハイブリダイゼーション
Prestain Marker for RNA High DynaMarker
®
着色済みの RNA サイズマーカーです。
特 長
base
8,000
⃝低分子有機色素とは違い,独自の色素結合方法により
核酸鎖へ直接色素を導入しているため,使用ゲル濃度
が変わっても正確な分子量を示します( 右下図参照 )
。
⃝電気泳動中にも分離状況を確認できるため,最適な時
間で泳動を停止できます。
⃝ナイロンメンブレンへの転写も可能で,RNA が転写
されているかどうかを確認することができます。
⃝青と紫の配色で,視認性に優れています。
⃝加熱変性操作せずに,そのままアプライできます。
⃝RNA High DynaMarker ( #DM160 : p.11 参照 )とよく
®
マッチします。
品名
メーカー
商品コード
包装 /
Prestain Marker for RNA High
BDL
約 30 回分
14
DM260
価格(¥)
4,000
2,000
転写後
1,000
500
200
ゲル組成:
0.8% アガロース,
2.2 M ホルムアルデヒド
1 × MOPS buffer
base
8,000
4,000
2,000
1,000
500
200
メンブレン
base
8,000
4,000
2,000
1,000
500
200
DynaMarker
− 80℃
180 μl /
25,000
1.0% アガロース
1.5% アガロース
RNA High DynaMarker®
( #DM160,未着色マーカー )
との泳動比較
それぞれの写真において
左レーン:RNA High DynaMarker®
( EtBr 染色 )
右レーン:本製品
ゲル濃度が変化しても,未着色 RNA
マーカーである RNA High DynaMarker®
( #DM160 )と高い一致率を示すこ
とが分かる。
Prestain Marker for Small RNA Plus DynaMarker
®
着色済みの Small RNA サイズマーカーです。
⃝Prestain Marker for Small RNA( #DM250:下記参照 )
50 −
40 −
30 −
に 100 mer と 75 mer の 2 つのバンドが追加されたセッ
トです。miRNA から miRNA 前駆体( pre-miRNA )のサ
分子量マーカー( RNA 用 )
base
100 −
75 −
特 長
転写後
20 −
イズをカバーします。
⃝独自の色素結合方法により RNA マーカーのプレステイン
化を実現しました。電気泳動中にも分離状況を確認できる
メンブレン
ゲル組成:10% ポリアクリルアミド ,
7.5 M 尿素 / 1 × TBE
ため,最適な時間で泳動を停止できます。
⃝ナイロンメンブレンへの転写も可能で,RNA が転写され
ているかどうかを確認することができます。
未着色の RNA 分子量マーカーとの
移動度比較
⃝青と赤の配色で,視認性に優れています。
⃝加熱変性操作せずに,そのままアプライできます。
⃝ポリアクリルアミドゲル濃度 10 〜 15% において,Small RNA
電気泳動用分子量マーカーである,Small RNA Ⅱ
( #DM192:p.13 参照 )と 95% 以上の一致率を実現しまし
た。
品名
メーカー
BPB
DynaMarker®
10% ゲル
15% ゲル
左図のように,着色済み核酸バン
ドは電気泳動において,未着色の
RNA マーカーと近い挙動をするこ
とがわかる。BPB はゲル濃度変化
で移動度が大きく変化している。
®
左レーン:Small RNA Ⅱ DynaMarker ( #DM192 )+75 mer RNA 添加
®
右レーン:Prestain Marker for Small RNA Plus DynaMarker
商品コード
包装 /
価格(¥)
Prestain Marker for Small RNA Plus DynaMarker
BDL
DM253
150 μl /
25,000
約 30 回分
Prestain Marker for Small RNA DynaMarker
®
着色済みの Small RNA サイズマーカーです。
特 長
base
⃝独自の色素結合法により RNA マーカーのプレステイン化
を実現しました。電気泳動中にも分離状況を確認できるた
50
40
30
転写後
20
め,最適な時間で泳動を停止できます。
⃝ナイロンメンブレンへの転写も可能で,RNA が転写され
ているかどうかを確認することができます。
⃝青と赤の配色で,視認性に優れています。
メンブレン
ゲル組成:
12.5% ポリアクリルアミド,
7.5 M 尿素,1 × TBE
⃝加熱変性操作せずに,そのままアプライできます。
⃝天 然 の RNA で 構 成 さ れ る Small RNA Ⅱ DynaMarker
( #DM192:p.13 参照 )とよくマッチします。
®
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
Prestain Marker for Small RNA DynaMarker
BDL
DM250
150 μl /
20,000
約 30 回分
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
15
Colored DIG Marker
for Small RNA DynaMarker
®
分子量マーカー( タンパク質用 )
base
100
75
RNA 分子量マーカーの各バンドを青色色素と共に
ジゴキシゲニン(DIG)で標識した製品です。
特 長
電気泳動中は
●電気泳動やメンブレンへの転写効率のモニタリン
特 長
グに最適です。
青色のバンドを
目視でモニタリング
●加熱変性操作なしで,そのままアプライ可能です。
可能!
転写後は,
アルカリホスファターゼ
50
40
30
修飾された抗 DIG 抗体
および化学発光基質を
用いることで検出可能!
20
※ 製品の詳細は,p.9 をご覧下さい。
タンパク質サイズマーカー
未標識タンパク質サイズマーカー
Protein Eco Marker DynaMarker
®
kDa
特 長
⃝マーカーに添付の Protein loading dye を混合して使用するタイプです( 約 120
回分 )。
97.4 ─
66.2 ─
Phosphorylase - b
BSA
45 ─
Ovalbumin
29 ─
Carbonic Anhydrase
⃝添付の Protein loading dye により,E. coli などの細胞を溶菌でき,SDS-PAGE
用細胞ライセートが簡便に得られます。得られた細胞ライセートはそのままゲルに
アプライできます。
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
1 kit /
14,000
Protein Eco DynaMarker
BDL
DM610
ミニゲル約 120 レーン分。
Protein loading dye( 1 ml )添付。容量:300 μl
20.1 ─
Trypsin Inhibitor
14.4 ─
Lysozyme
Protein Eco DynaMarker® ( 2.5 μl )
ゲル組成:12 % ポリアクリルアミドゲル
Protein Recombinant Marker
DynaMarker®
組換え体タンパク質サイズマーカーです。
kDa
150
特 長
⃝未着色の組換え体タンパク質分子量マーカーです。糖鎖な
100
どの修飾がない組換え体タンパク質であるため,シャープ
80
かつ正確な分子量を示します。
⃝20 kDa と 80 kDa のバンドを濃くしてあり,識別が容易
となっています。
20
15
10
商品コード
包装 /
価格(¥)
Protein Recombinant DynaMarker
BDL
DM640
ミニゲル約 100 レーン分
16
40
30
⃝Ready-to-use でそのままアプライできます。
品名
メーカー
60
500 μl /
14,000
ゲル組成:
5 〜 20 % アクリルアミド
グラジエントゲル
本製品
A社
B社
本製品と他社類似製品を 5 〜 20 % ポ
リアクリルアミドグラジエントゲルを
用いて泳動比較した。本製品は,バッ
クグラウンドも低く,視認性に優れて
いることが分かる。
プレステインタンパク質サイズマーカー
Protein MultiColor Ⅲ Marker DynaMarker
®
プレステインタンパク質サイズマーカーです。
70 ─
BSA
44 ─
Ovalbumin
32 ─
Carbonic Anhydrase
27 ─
Trypsin Inhibitor
17 ─
Lysozyme
Protein MultiColor Ⅲ DynaMarker
ゲル組成 :
5 〜 20 % ポリアクリルアミド
グラジエントゲル
未染色
分子量マーカー( タンパク質用 )
Phosphorylase-b
C社
β -Galactosidase
95 ─
Multi
Color Ⅲ
B社
140 ─
A社
Myosin
C社
230 ─
B社
A社
Multi
Color Ⅲ
kDa
CBB 染色後
12.5% アクリルアミドゲルでの電気泳動像の比較
®
®
特 長
⃝着色済みのタンパク質分子量マーカーです。あらかじめサ
ンプルバッファーに溶解してあり,希釈や変性処理をせず
に,そのままアプライできます。タンパク質のエレクトロ
Protein MultiColor Ⅲ DynaMarker および他社の多色着色型天然
タンパク質プレステインマーカーを電気泳動した。本製品は十分
な分子量範囲をカバーしており,シャープで強い色調のバンドを
示す。高い精製度をもつタンパク質を高密度に着色しているので,
CBB 染色後も均質かつクリアーなバンドが得られる。
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
Protein MultiColor Ⅲ DynaMarker
BDL
DM637
BDL
DM637L
Large
2 × 300 μl /
16,000
10 × 300 μl /
69,800
5 色で着色済み。ミニゲル約 60 レーン分( 300 μl あたり)
ブロッティングや電気泳動のモニタリングに適しています。
■ Protein MultiColor Ⅲ DynaMarker®
あらかじめ 5 色で着色してあり,視認性に優れています。
また,すべての色素でシャープなバンドを示します。
※ ロット毎の正確な分子量は,製品添付のデータシートをご覧下さい。
Protein BlueRed Marker DynaMarker
®
kDa
特 長
⃝着色済みのタンパク質分子量マーカーです。あらかじめサ
ンプルバッファーに溶解してあり,希釈や変性処理をせず
に,そのままアプライできます。タンパク質のエレクトロ
ブロッティングや電気泳動のモニタリングに適しています。
■ Protein BlueRed DynaMarker®
90 ─
Phosphorylase - b
71 ─
BSA
42 ─
Ovalbumin
32 ─
Carbonic Anhydrase
26 ─
Trypsin Inhibitor
17 ─
Lysozyme
®
あらかじめ 2 色で着色してあり,視認性に優れています。
Protein BlueRed DynaMarker
ゲル組成 :
5 〜 20 % ポリアクリルアミド
グラジエントゲル
また,すべての色素でシャープなバンドを示します。
※ ロット毎の正確な分子量は,製品添付のデータシートをご覧下さい。
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
Protein BlueRed DynaMarker
BDL
DM625
2 × 300 μl /
15,000
2 色で着色済み。ミニゲル約 120 レーン分
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
17
Protein MultiColor, Stable Marker DynaMarker
®
4℃で長期保存可能な,そのまま使えるプレステインタンパク質サイズマーカーです。
kDa
分子量マーカー( タンパク質用 )
特 長
230 ─
Myosin
140 ─
β -Galactosidase
⃝従来のタンパク質分子量マーカーの多くは凍結保存の必要
95 ─
Phosphorylase-b
がありましたが,本製品は 4 ℃ で長期間安定なため,凍結・
70 ─
BSA
44 ─
Ovalbumin
32 ─
Carbonic Anhydrase
27 ─
Trypsin Inhibitor
17 ─
Lysozyme
⃝天然タンパク質由来の着色済みタンパク質分子量マーカー
で,独自のタンパク質着色技術により,高い安定性を実現
しました。
融解の操作は不要で,冷蔵庫で保存できます。
⃝4℃ で均一な溶液です。あらかじめサンプルバッファーに
溶解してあり Ready-to-use のため,そのままアプライ
できます。
⃝すべてのバンドでシャープかつ強い色調を示します。
⃝Protein MultiColor Ⅲ DynaMarker®( #DM637 : p.17 参
照 )と同じバンドパターン( 約 17 〜 230 kDa )です。
⃝電気泳動やエレクトロブロッティングのモニターに適して
います。
ゲル組成:5 〜 20% ポリアクリルアミドグラジエントゲル
⃝300 μl あたりミニゲル約 60 レーン分が含まれていま
す( 5 μl / レーン )。
※ロット毎の正確な分子量は製品添付のデータシートをご覧下さい。
従来品
0 日後
21 日後
本製品
0 日後
21 日後
Point!
ポリアクリルアミドゲル中のタンパク質の染色には,
短 時 間 か つ 高 感 度 に CBB 染 色 で き る,QuickBlue
Staining Solution( p.31 )がお勧めです!
着色
BSA
37℃で 3 週間インキュベート
着色法の違いによるタンパク質安定性の比較
従来品( Protein MultiColor Ⅲ DynaMarker® )および本製品の製造法で着
色したタンパク質( BSA )の 4 ℃ での安定性を確認するために,過酷条
件として,37 ℃ で 3 週間インキュベートし,SDS-PAGE のバンドの状
態を確認した。
本製品の製造法で着色した BSA は,バンドの位置および形状が従来品よ
りも保たれており,安定性が高いことが分かる。
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
Protein MultiColor, Stable DynaMarker
BDL
DM660S
300 μl /
12,000
BDL
DM660
600 μl /
18,000
BDL
DM660L
5 × 600 μl /
78,500
5 色で着色済み。ミニゲル約 60 レーン分( 300 μl あたり )
18
Protein Recombinant MultiColor Marker DynaMarker
®
プレステイン組換え体タンパク質サイズマーカーです。
す。
150
100
Un
sta
in
Pr
es
tai
n
⃝5 色に着色済みの組換え体タンパク質分子量マーカーで
Un
sta
in
Pr
es
tai
n
kDa
分子量マーカー( タンパク質用 )
特 長
80
⃝糖 鎖などの修飾がない組換え体タンパク質であるため,
シャープかつ正確な分子量を示します。
⃝あらかじめ 5 色で着色してあり,視認性に優れています。
また,すべての色素でシャープなバンドを示します。
40
30
コンピテントセル(クローニング・ライブラリー作製用)
⃝Ready-to-use でそのままアプライできます。
60
20
15
品名
メーカー
本製品
商品コード
包装 /
価格(¥)
Protein Recombinant, MultiColor DynaMarker
BDL
DM650
600 μl /
17,000
5 〜 20 % アクリルアミドグ
本製品と他社類似製品を 12.5 % ポリ
アクリルアミドゲルを用いて泳動比較
した。本製品は同一分子量から成る未
着色の分子量マーカーとの整合性が高
いことが分かる。
ラジエントゲル
ミニゲル約 60 レーン分
コンピテントセル
クローニング・ライブラリー作製用
他社
ゲル組成:
Giga Competent Cell( DH5α )
クローニング・ライブラリー作製用
9
ギガ( 10 )レベルの形質転換効率を有するコンピテントセルです。
特 長
⃝形質転換効率:> 1 × 10⁹ cfu / μg DNA( pBR322 )
⃝クローニング,ライブラリー作製に適しています。
⃝lac Z が含まれるプラスミドベクターを用いた場合,青白
スクリーニングが可能です。
⃝- 80℃で 6 か月間保存しても,形質転換効率はほとんど
低下しません。
形質転換効率(×108 cfu)
30
包装 /
価格(¥)
DH5α, Giga Competent E. coli Cell
質転換効率
×109!
25
を実現
20
15
10
5
0
品名
メーカー 商品コード
形
A
B
C
Giga
他社製品との比較
BDL
DS229M
− 80℃
5 × 100 μl /
18,000
BDL
DS229G
− 80℃
10 × 100 μl /
32,000
本製品および各社コンピテントセルの形質転換効率,cfu /( μg / 100 μl
of cells )を,プラスミド pBR322 を用い,各 2 回測定した結果を示す。
A は A 社 DH5 αコンピテントセル,B は B 社 DH5α コンピテントセル,
C は C 社高効率 DH5 α コンピテントセル,Giga は本製品を示す。
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
19
Jet Competent Cell( DH5α )
クローニング・ライブラリー作製用
ヒートショック不要で迅速,高効率な衝撃のコンピテントセルです。
特 長
操作方法概略
⃝形質転換効率:> 1 × 10⁸ cfu / μg( pBR322 )
⃝ヒートショックとプレーティング前の培養操作が不要で,
10 分で形質転換! ヒートショック不要! 培養不要!
約 10 分で形質転換操作が完了します。
プラスミド DNA
⃝− 80 ℃ で 12 か月間保存しても,形質転換効率はほとん
ど低下しません。
コンピテントセル(クローニング・ライブラリー作製用)
品名
メーカー 商品コード
包装 /
価格(¥)
DH5α, Jet Competent E. coli Cell
BDL
DS225S
− 80℃ Mini
2 × 100 μl /
5,000
BDL
DS225
− 80℃
10 × 100 μl /
18,000
BDL
DS225L
− 80℃ Large
50 × 100 μl /
72,000
セルを氷上で解凍し,
DNA を加え,5 分間
インキュベートする。
2. 回復培地を入れた新
しい 1.5 ml チュー
ブにコンピテントセ
ルを入れる。
Competent Cell DH5α / JM109
3. 室 温で 5 分間イン
キュベートしプレー
ティングする。
クローニング・ライブラリー作製用
高い形質転換効率を有するコンピテントセルです。
特 長
⃝形質転換効率:> 2 × 10⁸ cfu / μg( pBR322 )
⃝SOC medium を添付しています。
⃝− 80 ℃ で 12 か月間保存しても,形質転換効率はほとん
ど低下しません。
⃝青白スクリーニングが可能です( lac Z 遺伝子を持つプラ
スミドの場合 )。
20
1. 凍
結したコンピテント
品名
メーカー 商品コード
包装 /
価格(¥)
DH5α, Competent E. coli Cell
BDL
DS220
− 80℃
10 × 100 μl /
18,000
BDL
DS220L
− 80℃ Large
50 × 100 μl /
72,000
JM109, Competent E. coli Cell
BDL
DS210
− 80℃
10 × 100 μl /
18,000
BDL
DS210L
− 80℃ Large
50 × 100 μl /
72,000
Electrocompetent Cell DH5α / JM109
クローニング・ライブラリー作製用
エレクトロポレーション用のコンピテントセルです。
特 長
操作方法概略
⃝形質転換効率:> 1 × 10⁹ cfu / μg( pBR322 )*
⃝SOC medium を添付しています。
る。
⃝lac Z 遺伝子が含まれるプラスミドベクターを用いた場合,
2 . 本製品( 50 μl )を氷上で溶かし DNA を加える。
3 . エレクトロポレーターにセットし,パルスをかける。
青白スクリーニングが可能です。
4 . 直ちに SOC medium( 0.95 ml )を加え,37 ℃ で 1
*Cell 50 μl あたりの形質転換効率が > 1 × 10⁹ cfu / μg
時間培養する。
※エレクトロポレーターが必要です。
5 . 寒天プレートに植菌し,37 ℃ で一晩培養する。
商品コード
包装 /
コンピテントセル
品名
メーカー
1 . 冷やしたエレクトロポレーション用キュベットを用意す
価格(¥)
DH5α , Electrocompetent E. coli Cell
BDL
DS228
− 80℃
5 × 50 μl /
12,000
5 × 50 μl /
12,000
SOC Medium( 5 × 1 ml )付き。
JM109, Electrocompetent E. coli Cell
BDL
DS218
− 80℃
SOC Medium( 5 × 1 ml )付き。
タンパク質発現用
Zip Competent Cell BL21( DE3 )
タンパク質発現用
ヒートショック不要,約 5 分で形質転換完了する発現用コンピテントセルです。
特 長
操作方法概略
プラスミド DNA
⃝プラスミド DNA を加えた後,ヒートショックおよびその
チューブからコンピテ
ントセルをプレーティ
ングする。
後の培養をせずに,そのままプレーティングできます。
⃝約 5 分で形質転換操作を終了でき , 操作時間の大幅な短縮
が可能です。
凍結したコンピテントセルを
氷上で解凍し,プラスミド
DNA を加え,5 分間インキュ
ベートする。
⃝形質転換効率:≧ 1 × 10⁶ cfu / μg( pBR322 )
1
BL21( DE3 )株の
発現機構
品名
メーカー 商品コード
包装 /
2 3 4 5 6
約 5 分で
形質転換操作
が完了
7 8
➡ 本製品を 90 kDa のタンパク質発現
遺伝子を組み込んだプラスミドで形
質転換した。得られたコロニーから 7
クローンを培養し発現実験を行った。
レーン 1:分子量マーカー
レーン 2 〜 8:クローン 1 〜 7
価格(¥)
BL21( DE3 ), Zip Competent E. coli Cell
BDL
DS255
カルタヘナ
− 80℃
10 × 100 μl /
20,000
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
21
Competent Cell BL21
タンパク質発現用
高い形質転換効率を有する発現用コンピテントセルです。
■ Competent Cell BL21
特 長
BL21( DE3 )株および BL21( DE3 )pLysS 株の親株と
⃝lon protease と ompT membrane protease 遺伝子
なる E. coli 株です。
を欠損しており,発現タンパク質がこれらのプロテアーゼ
■ Competent Cell BL21( DE3 )
で分解されるのを防ぐことができます。
⃝形質転換効率:≧ 2 × 10⁷ cfu / μg( pBR322 )
BL21 株のゲノム DNA に λ DE3 遺伝子が組み込まれた E.
coli 株です。λ DE3 遺伝子上には lac UV5 プロモーターの
制御下に T7 RNA ポリメラーゼ遺伝子が配置されています。
コンピテントセル(タンパク質発現用)
BL21( DE3 )pLysS 株の
発現機構
■ Competent Cell BL 21( DE3 )pLysS
BL 21( DE3 )株に T7 リゾチーム遺伝子を持つプラスミ
ド pLysS を導入した T7 発現系の宿主 E. coli です。T7 リ
ゾチームは T7 ポリメラーゼに結合して転写を抑制し,非誘
品名
メーカー 商品コード
包装 /
価格(¥)
BL21, Competent E. coli Cell
BDL
DS240
10 ×1 ml SOC medium
− 80℃ 10 × 100 μl /
導時にバックグラウンドとなる発現レベルを低下させます。
毒性のあるタンパク質の発現に有用です。
20,000
BL21( DE3 ), Competent E. coli Cell
カルタヘナ − 80℃ 10 × 100 μl /
BDL
DS250
10 ×1 ml SOC medium
20,000
BL21( DE3 )pLysS, Competent E. coli Cell
カルタヘナ − 80℃ 10 × 100 μl /
BDL
DS260
10 ×1 ml SOC medium
20,000
Electrocompetent Cell BL21
( DE3 )
タンパク質発現用
エレクトロポレーション用の発現用コンピテントセルです。
特 長
操作方法概略
⃝T7 プロモーターによる強力なタンパク質の発現が可能で
す( T7 プロモーターを持つプラスミドベクターの場合 )
。
1 . 冷やしたエレクトロポレーション用キュベットを用意す
る。
⃝高効率形質転換 > 1 × 10⁹ cfu / μg( pBR322 )*
2 . 本製品( 50 μl )を氷上で溶かし DNA を加える。
*Cell 50 μl あたりの形質転換効率が > 1 × 10⁹ cfu / μg
3 . エレクトロポレーターにセットし,パルスをかける。
4 . 直ちに SOC medium( 0.95 ml )を加え,37 ℃ で 1
※エレクトロポレーターが必要です。
時間培養する。
5 . 寒天プレートに植菌し,37 ℃ で一晩培養する。
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
BL21( DE3 ), Electrocompetent E. coli Cell
BDL
DS258
カルタヘナ
− 80℃ 5 × 50 μl /
SOC Medium( 5 × 1 ml )付き。
22
15,000
Gel Indicator™ Kit
ゲルインディケーターキット
DNA 染色用
アガロースゲルからの DNA 切り出し補助キットです。
特 長
操作方法概略
⃝電気泳動後のアガロースゲルから可視光条件下で DNA 断
■ Protocol Ⅰ:迅速法( 検出感度:> 500 ng )
1. アガロースゲル作製時に 0.1% 濃度になるように Gel
片を切り出せる便利なキットです。
⃝エチジウムブロミドや紫外線を用いないため,損傷の少な
い DNA 断片を切り出すことができ,プラスミドベクター
へのクローニング時に高い形質転換効率が得られます。
⃝UV トランスイルミネーター,暗室での操作は不要です。
⃝迅速に検出できる方法( > 500 ng )
( Protocol Ⅰ )と,
DNA をより高感度( > 50 ng )に検出できる方法
( ProtocolⅡ )
の 2 種類のプロトコルが用意されています。
⃝キットに含まれる 6 × Orange loading dye により,試
indicator solution を添加し,ゲルを着色する。
2. 分離する DNA 試料を 6 × Orange loading dye と混
合し,1. のゲルにアプライする。
3. 3-Colors indicator を同じゲルの別のレーンにアプライ
する。
4. 電気泳動し,試料を分離する。分離されたバンドは可視
光条件下で青紫色で判別でき,容易に切り出すことがで
きる。
料のゲルへのアプライがしやすく,また,色調が異なるた
め DNA バンドと容易に識別できます( Protocol Ⅰの場
■ Protocol Ⅱ:高感度法( 検出感度:> 50 ng )
合 )。
1. 通常の方法で,アガロースゲルを作製する。
Ⅰの場合 )。
2. 分離する DNA 試料を 6 × Orange loading dye と混
ゲルインディケーターキット(
⃝電気泳動中にも DNA バンドを確認できます( Protocol
合し,1. のゲルにアプライする。
⃝市 販されているキットを使用して,切り出したゲルから
3. 電気泳動後のゲルを 0.1% Gel indicator solution で,
2 時間以上振とうしながら染色する。
DNA を精製できます。
4. DNA が青紫色に染色され,判別できるようになったら切
り出す。
3 - Colors Indicator
( 10 μl )
1,000
DNA 試料( > 500 ng )10 μl
6 X Orange loading dye 2 μl
D
N
A
800
染色用)
形質転換効率( コロニー数 )
1,200
600
DNA 断片
1000 500 200
( ng / lane )
400
100 50
30
20
10
200
0
0
3
5
紫外線照射時間( 分 )
10
UV 照射による形質転換効率の低下
制限酵素処理で得られた約 500 bp の DNA を本製品または,エチジ
ウムブロミド染色と紫外線照射によりアガロースゲルから切り出した
( 図で 0 分が Gel Indicator による )。紫外線照射は,切り出したゲル
片を時々 UV イルミネーター上で反転しながら,一定時間行った( 図で
3, 5, 10 分 )
。DNA は,切り出したゲル片からスピンカラムキットによ
り精製し,プラスミドベクターへライゲーションした後 E. coli を形質
転換した。縦軸に,本実験で得られたプレート上の白色コロニーの数を
示す。Gel Indicator により切り出した DNA を用いたものが高い形質
転換効率を示している。
品名
メーカー
Protocol Ⅰ による
アガロースゲル電気泳動像
Protocol Ⅱ による
アガロースゲル染色像
キット内容
⃝Gel indicator solution
⃝3-Colors indicator
商品コード
包装 /
価格(¥)
1 set /
12,000
⃝6 × Orange loading dye
Gel Indicator Kit
BDL
DM510
Protocol Ⅰ で使用した場合,ゲル溶液 3 L 分( ミニゲル約 200 枚 )
※キットに含まれる試薬の取り扱いや廃棄は,細胞染色用色素の
処理方法に準じた方法で行って下さい。
6 × Orange Loading Dye
BDL
DM530
1 ml /
3,500
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
23
Gel Indicator™ DX Kit
Gel Indicator Kit の DNA 検出感度を増強したキットです。
特 長
操作方法概略
⃝迅速に操作を行える方法( Protocol Ⅰ )と,DNA をよ
り高感度( > 20 ng )に検出できる方法( Protocol Ⅱ )
の 2 種類のプロトコルが用意されています。
⃝エチジウムブロミドや紫外線を用いないため,損傷の少な
い DNA 断片を切り出すことができ,プラスミドベクター
へのクローニング時に高い形質転換効率が得られます。
⃝UV トランスイルミネーター,暗室での操作は不要です。
■ Protocol Ⅰ:迅速法( 検出感度:> 500 ng )
1. アガロースゲル作製時に Gel indicator solution DX を
添加し,ゲルを着色する。
2. 分離する DNA 試料を 6 × Orange loading dye と混
合し,1. のゲルにアプライする。
3. Four-colors indicator を同じゲルの末端のレーンにア
プライする。
⃝キットに含まれる 6 × Orange loading dye により,試
4. 電気泳動し,試料を分離する。分離されたバンドは可視
料のゲルへのアプライがしやすく,また,色調が異なるた
光条件下で青紫色で判別でき,容易に切り出すことがで
め DNA バンドと容易に識別できます。
きる。
⃝電気泳動中にも DNA バンドを確認できます( Protocol
■ Protocol Ⅱ:高感度法( 検出感度:> 20 ng )
Ⅰの場合 )。
⃝高感度プロトコル( Protocol Ⅱ )の場合,従来の 2 倍
ゲルインディケーターキット(
の感度( > 20 ng )で DNA を検出できます。
⃝市 販されているキットを使用して,切り出したゲルから
1. Gel indicator solution DX を添加せずに,アガロース
ゲルを作製する。
2. 分離する DNA 試料を 6 × Orange loading dye と混
合し,1. のゲルにアプライする。
DNA を精製できます。
3. 電気泳動後のゲルを 0.2 % GI coloring solution で,2
1,000 500 200
100 50
30
20
10
DNA 断片
( ng / lane )
時間以上振とうしながら染色する。
4. DNA が青紫色に染色され,判別できるようになったら切
り出す。
※ Gel indicator solution DX を添加して作製したアガロースゲルで
も Protocol Ⅱ を行えます。
D
N
A
染色用)
Gel Indicator™ DX Kit( Protocol
Ⅱ )によるアガロース染色像
Gel Indicator solution DX を添加し
て作製した 0.8 % アガロースゲルで,
図に示した量の DNA 断片を電気泳動
し,GI coloring solution で染色した。
⃝Gel indicator solution DX
形質転換効率( コロニー数 )
2,500
⃝GI coloring solution
2,000
⃝6 × Orange loading dye
⃝Four-colors indicator
1,500
1,000
※キットに含まれる試薬の取り扱いや廃棄は,細胞染色用色素の
処理方法に準じた方法で行って下さい。
500
0
Gel Indicator™ DX
紫外線照射
( 3 分間 )
Gel Indicator™ DX Kit を使用した高効率クローニング
2 kb の DNA 断片を Gel Indicator™ DX Kit を使用してアガロースゲ
ル電気泳動し,
DNA を切り出し精製( 左 ),または通常の方法でアガロー
スゲル電気泳動し,エチジウムブロミドで染色したゲルを 3 分間紫外線
照射した後に,DNA を切り出し精製( 右 )した。DNA の量をそろえ,
ベクターにライゲーションし,形質転換した。縦軸は形質転換体のコロ
ニー数を示す。
24
キット内容
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
1 set /
18,000
1 ml /
3,500
Gel Indicator DX Kit
BDL
DM580
6 × Orange Loading Dye
BDL
DM530
Gel Indicator™ DNA Extraction Kit
Gel Indicator Kit に DNA 精製試薬も含まれた,便利なキットです。
特 長
み合わせ,アガロースゲルからの DNA バンドの切り出し
から DNA の精製までを行えます。
⃝エチジウムブロミドや紫外線を用いないため,損傷の少な
い DNA 断片を切り出すことができ,プラスミドベクター
へのクローニング時に高い形質転換効率が得られます
( 右図参照 )。
形質転換効率( コロニー数 )
⃝Gel Indicator™ Kit( p.23 参照 )に DNA 精製試薬を組
1,800
1,600
1,400
1,200
1,000
800
600
400
200
0
⃝UV トランスイルミネーター,暗室での操作は不要です。
0
1
⃝キットに含まれる 6 × Orange loading dye により,試
料のゲルへのアプライがしやすく,また,色調が異なるた
⃝電気泳動中にも DNA バンドを確認できます( Protocol
⃝1 × TAE,0.5 × TBE いずれのバッファーで作製したア
ガロースゲルからでも DNA を回収できます。
10
約 2 kb の DNA 断片 5 種類を本キットでアガロースゲル電気泳動後,
切り出した。そのうち 1 つはそのまま本キットで DNA を精製し,残り
はエチジウムブロミド染色後,紫外線を 1,3,5,10 分間照射した後
に DNA を精製した。等量の精製 DNA を使用して,プラスミドベクター
にクローニングし,E. coli への形質転換効率を比較した。紫外線照射し
なかった DNA では,高いクローニング効率を示している。
ゲルインディケーターキット(
Ⅰの場合 )。
5
UV 照射による形質転換効率の低下
め DNA バンドと容易に識別できます( Protocol Ⅰの場
合 )。
3
紫外線照射時間( 分 )
⃝精製した DNA は,クローニング,制限酵素処理,シーク
エンシング,PCR のほか,様々な実験に使用できます。
⃝DNA( 直鎖状 )の回収率は 70 〜 80 % です。
⃝本キットではクローニングに適するよう環状 DNA より直
キット内容
⃝Gel indicator solution
鎖状 DNA が選択的に得られるよう調製されています。環
⃝3-Colors indicator
状 DNA の収率は 10 分の 1 以下です。
⃝6 × Orange loading dye
D
N
A
染色用)
⃝Dissolving and binding solution
⃝Wash buffer
⃝Elution buffer
⃝Collection tube
⃝Spin column
※キットに含まれる試薬の取り扱いや廃棄は,細胞染色用色素の
処理方法に準じた方法で行って下さい。
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
1 kit /
20,000
Gel Indicator DNA Extraction Kit
BDL
DM550
Protocol Ⅰ で使用した場合,ゲル溶液 3 L 分( ミニゲル約 200 枚 )
の Gel Indicator Kit と 50 回分の DNA 精製試薬・スピンカラムを含
む。
6 × Orange Loading Dye
BDL
DM530
1 ml /
3,500
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
25
RNA 染色用
Gel Indicator™ RNA Staining Solution
ポリアクリルアミドゲルからの RNA 断片抽出に適した RNA 染色試薬です。
特 長
⃝電 気泳動後のポリアクリルアミドゲルから可視光条件下で
RNA 断片を切り出せます。
⃝染色済みゲルから crush and soak 法で抽出でき,抽出した
RNA は RT - PCR,酵素反応,標識反応等に使用できます。
21 mer の RNA を 12.5 % 変性ポリアクリルアミドゲル( 7.5 M
尿素 )で電気泳動した。50 ng からの RNA が検出されている。
⃝20 〜 30 分間で染色できます。
⃝低分子量の RNA( 20 mer )も検出できます。
⃝UV トランスイルミネーター,暗室は不要です。
⃝1 × 溶液 500 ml でミニゲル約 10 枚が染色できます。
⃝検出感度:> 50 ng( UV shadowing 法の約 5 倍の感度 )
品名
メーカー
BDL
※キットに含まれる試薬の取り扱いや廃棄は,細胞染色用色素の
処理方法に準じた方法で行って下さい。
ゲルインディケーターキット(
染色用)
R
N
A
26
商品コード
包装 /
価格(¥)
Gel Indicator RNA Staining Solution, 100 ×
DM595
10 ml /
12,000
クローニング・ライゲーションキット
クローニングキット
TA Cloning Kit DynaExpress
迅速,高効率な TA クローニングキットです。
特 長
操作方法概略( #DS120 および #DS127 の場合 )
⃝わずか 30 分で高効率のライゲーション反応が行えます。
PCR 産物
⃝キットに含まれる T ベクターは非常に安定で,室温で 3
週間放置してもクローニング効率に変化はありません。
T ベクター
⃝pTAC-2 と pTAKN-2 は,薬剤耐性遺伝子部分以外は同一
すべての操作が
約 40 分で
完了します!
の配列から成る T ベクターで,マルチクローニング部位
( MCS )の両端にレアカッター配列( Not Ⅰ )とプロモー
ライゲーション(30 分)
ター配列( T7 / SP6 )を有します。
⃝pTAKN-2 は,カナマイシン耐性遺伝子( Kan )を持ち,
ベクター間での PCR 断片のサブクローニングが容易です。
形質転換(5 分)
⃝#DS120 および #DS127 に含まれる Jet Competent Cell
は,ヒートショックおよびプレーティング前の培養が不要
なため,約 10 分で形質転換操作が終了します。また,高
回復培地で室温静置(5 分)
効率( > 5 × 10⁷ cfu / 50 μl )の形質転換が可能です。
プレーティング
キット内容
⃝T-vector, linearized( キットにより異なります )
⃝Ligation buffer
クローニング・ライゲーションキット(クローニングキット)
⃝Ligase mixture
⃝Forward sequence primer
⃝Reverse sequence primer
⃝Jet competent cell( DH5α )
( #DS120, #DS127 のみ )
⃝Recovery medium( #DS120, #DS127 のみ )
コロニー数(個)
各キットに含まれる T ベクター
白色コロニー
青色コロニー
(偽陽性)
6,000
4,000
2,000
0
0
5
10
20
40
80
PCR 断片の量(ng)
約 1 kb の PCR 断片を #DS120 を用いてクローニングした結果。
セルフライゲーションによる偽陽性クローンが少ないことが分かる。
品名
メーカー 商品コード
包装 / 価格
(¥)
TA PCR Cloning Kit, pTAC-1 DynaExpress BDL
DS125
( 20 reactions ) 20 units / 12,500
BDL
DS125L
Large( 80 reactions ) 80 units / 39,000
TA PCR Cloning Kit, pTAC-1, with Jet Competent Cell
DH5α DynaExpress( 20 reactions )
BDL
DS120
− 80℃
20 units / 27,000
Jet Competent Cell( DH5α ), 回復培地( Recovery medium )添付。
TA PCR Cloning Kit, pTAC-2 DynaExpress
BDL
DS126
( 20 reactions ) 20 units / 12,500
BDL
DS126L
Large( 80 reactions ) 80 units / 39,500
TA PCR Cloning Kit, pTAC-2, with Jet Competent Cell DynaExpress( 20
reactions )
BDL
DS127
− 80℃
20 units / 27,000
Jet Competent Cell( DH5α ), 回復培地( Recovery medium )添付。
TA PCR Cloning Kit, pTAKN-2 DynaExpress BDL
DS130
( 20 reactions ) 20 units / 12,500
BDL
DS130L
Large( 80 reactions ) 80 units / 39,500
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
27
ライゲーションキット
DNA Ligation Kit Ver. 2 DynaExpress
極めて高い効率で短時間に DNA のライゲーション反応が行えます。
特 長
操作方法概略
⃝高いライゲーション効率を有します。
1. ベクター DNA とインサート DNA の混合溶液 10 μl に,
⃝ライゲーション反応が短時間( 16 ℃,5 〜 30 分 )で行
等量の 2 × Ligation buffer と,0.25 〜 1 μl の Ligase
mixture を加える。
えます。
⃝反応後,直ちに形質転換に使用できます。
2. 16 ℃ で 5 〜 30 分インキュベートする。
⃝2 × Ligation buffer は凍結・融解を繰り返しても活性を
3. 反応終了後,そのまま形質転換に使用する。
保ちます( 下図参照 )。
※上記の Ligase mixture の使用量は,レギュラーサイズ( #DS110 )
⃝レギュラーサイズのキット( #DS110 )では 50 〜 200
回のライゲーションができるので経済的です。
を 50 回分として使用する場合です。Ligase mixture の使用量によ
り,各キットの使用回数は変わります。詳細は下表をご参照下さい。
⃝お 試 し 用 Mini キ ッ ト( 10 〜 40 回 分 ) と, お 得 な
Large キット( 250 〜 1,000 回分 )もあります。
ライゲーション効率[%]
DNA Ligation Kit, ver. 2,
DS105
Mini
120
100
DNA Ligation Kit, ver. 2
DS110
0.25 μl
0.5 μl
1 μl
40 回分
20 回分
10 回分
200 回分 100 回分 50 回分
DNA Ligation Kit, ver. 2,
DS115 1,000 回分 500 回分 250 回分
Large
80
60
40
20
0
キット内容
0回
50回
⃝Ligase mixture
Ligation buffer の凍結・融解数
⃝2 × Ligation buffer
700
コロニー数
600
500
品名
メーカー 商品コード
400
DNA Ligation Kit, Version 2 DynaExpress
BDL
300
200
100
0
5 15 30 60
5 15 30
5 15 30
50 回分
100 回分 200 回分
として使用 として使用 として使用
30 30 30
[分]
T Y N
社
社
社
クローニング・ライゲーションキット(ライゲーションキット)
28
Ligase mixture 使用量
商品
コード
キット名
140
各社のライゲーションキットを用いて,pBluescript の Eco RV 部位
へ平滑末端を有する約 1 kb の DNA 断片をサブクローニングした。各
データ左側は白色コロニー数を,右側は青色コロニー数を示す。DNA
Ligation Kit DynaExpress の効率は極めて高く,#DS110 を 200 回分とし
て用いた場合でも充分な高活性を示す。50 回分として用いた場合,30
分で反応は飽和している。付着末端ライゲーションの場合は 200 回分
として用いても 5 分以内に反応は終結する。
包装 /
価格(¥)
DS105
Mini( 10 - 40 reactions ) 1 kit /
6,000
BDL
DS110
( 50 - 200 reactions ) 1 kit /
20,000
BDL
DS115 Large( 250 - 1,000 reactions ) 1 kit /
85,000
発現ベクター
Expression Vector DynaVector
強力な T7 プロモーターを持つ,E. coli での高効率タンパク質発現ベクターです。
特 長
⃝6 種類のベクターのマルチクローニングサイトはすべて共
通です。そのため,DynaVector のシリーズ間で,他の
ベクターへのサブクローニングが容易に行えます。
⃝ベクターのサイズが小さいため,大きなサイズのインサー
トを挿入しても高効率の形質転換が期待できます。
⃝N 末端に 6 × His タグを融合したタンパク質を発現でき
ます。また,クローニングサイト中の Nde Ⅰ部位に目的
遺伝子を挿入すると,タグなしのタンパク質を発現できま
す。
各ベクターの特長
薬剤耐性遺伝子
アンピシリン カナマイシン
プラスミドの
コピー数
特 長
プラスミドの精製が容
pETUA
pETUK
高コピー
易。宿主に毒性のない
( #DV200 ) ( #DV220 ) ( 500 〜 700 個 ) タンパク質の発現に適
している。
幅広い種類のタンパク
pETBA
pETBK
中程度
質発現に使用できる。
( #DV210 ) ( #DV230 ) ( 10 〜 20 個 )
IPTG による誘導発現
が可能。非誘導時の発
pETIA
pETIK
中程度
現を抑制できるため,
( #DV215 ) ( #DV235 ) ( 10 〜 20 個 ) 宿主に毒性を有するタ
ンパク質の発現に適し
ている。
発現するタンパク質の宿主 E. coli への影響が明らかでな
い場合,またベクターの選択に迷った場合は,pETBA をお
試し下さい。非誘導時に発現を抑えたい場合は,pETIA の
使用が考えられます。発現するタンパク質が宿主 E. coli に
あまり影響しない場合は,pETUA を使用すると,プラスミ
ドのコピー数が多いため,ミニプレップ,シークエンシング
などがしやすいメリットがあります。カナマイシン耐性のベ
クターは,アンピシリン耐性のクローニングベクターからの
サブクローニングに有効です。
ベクターマップ
発現ベクター
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
29
kDa
M
1
2
3
4
5
6
DynaVector と Zip Competent Cell BL21( DE3 )
( #DS255:p.21 参照 )を用いた各種タンパク質発現例
97.4
66.2
M:Protein Eco DynaMarker®( #DM610:p.16 参照 )
1:pETUK( 65 kDa タンパク質 )
2:pETBA( 65 kDa タンパク質 )
3:pETUA(
45 kDa タンパク質 )
4:pETBA(
44 kDa タンパク質 )
5:pETBK( 44 kDa タンパク質 )
6:pETIK ( 30 kDa タンパク質 )
45
29
20.1
14.4
kDa
M
1
2
3
4
5
6
pETIA を用いた 70kDa タンパク質発現例( lac Ⅰ での制御 )
97.4
M:Protein Eco DynaMarker®( #DM610:p.16 参照 )
1:培養開始 3.5 時間後 A( IPTG 誘導無 )
2:培養開始 3.5 時間後 B( IPTG 誘導直前 )
3:培養開始 5.5 時間後 A( IPTG 誘導無 )
4:培養開始 5.5 時間後 B( IPTG 誘導後 2 時間 )
5:培養開始 7.5 時間後 A( IPTG 誘導無 )
6:培養開始 7.5 時間後 B( IPTG 誘導後 4 時間 )
66.2
45
29
同一のタンパク質を pETIA を用いて発現させた。A は培地に IPTG を添加しな
かった場合,B は IPTG を添加した場合。pETIA では lac Ⅰ により厳密な発現制御
がなされるため,非誘導時の発現が極めて低レベルに抑えられる。
20.1
発現ベクター
14.4
品名
メーカー 商品コード
包装 /
価格(¥)
Expression Vector DynaVector
30
BDL
DV200
pETUA
15 μg /
20,000
BDL
DV210
pETBA
15 μg /
20,000
BDL
DV215
pETIA
15 μg /
20,000
BDL
DV220
pETUK
15 μg /
20,000
BDL
DV230
pETBK
15 μg /
20,000
BDL
DV235
pETIK
15 μg /
20,000
分子生物学関連試薬
Alkaline Phosphatase from
Shewanella sp. SIB1
BAP と CIAP の長所を併せもつ低温性細菌由来アルカリホスファターゼです。
特 長
他のアルカリホスファターゼとの比較
⃝ DNA 末端を脱リン酸化後,容易に熱失活できます。
⃝速やかに,効率の良いライゲーション反応が可能です。
⃝PAP は DNA の末端構造が変性しやすい 60 ℃ において
37 ℃ の約 4 倍高い活性を示すため,DNA の末端構造を
選ばず脱リン酸化できます。
※低温性細菌 Shewanella sp. SIB1 は 0 〜 20 ℃ で生育する,低温条
件に適応したバクテリアです( 特許第 3507890 号 )。
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
熱失活
フェノール
失活処理
60 ℃
酵素反応
TE 中での
活性
PAP
( Shewanella 由来 )
できる
できる
高活性
あり
BAP
( E. coli 由来 )
できない
残存する
場合あり
高活性
あり
CIAP
( ウシ腸由来 )
できる
できる
急速に
失活
弱い
BAP は高い活性を有しますが,フェノール処理でも容易に失活しないた
め,その後のライゲーション反応にしばしば悪影響を及ぼします。一方,
CIAP は熱失活できますが反応条件によっては活性が弱いといった欠点
があります。 PAP は BAP と CIAP の長所を併せもつ酵素です。
Alkaline Phosphatase, Shewanella sp. SIB1, Recombinant〈 PAP 〉
BDL
DE110
1,000 units /
15,000
BDL
DE112
5 × 1,000 units /
60,000
PAP によるベクター DNA からの脱リン酸化と
サブクローニング
濃度:5 units / μl
3,000
2,500
2,000
1,500
1,000
500
0
白0
青 2412
白 13.5
青0
白 664
青8
PAP 処理後熱失活
─
○
○
Insert 断片添加
─
─
○
○
○
○
ライゲーション反応
白は White colony 数を,
青は Blue colony 数を示す。
QuickBlue Staining Solution
ポリアクリルアミドゲル中のタンパク質に適した染色試薬です。
特 長
時間かつ高感度に CBB 染色できる試薬です。
分子生物学関連試薬
⃝電気泳動したポリアクリルアミドゲル中のタンパク質を短
( 操作時間 )
QuickBlue
Staining
Solution
⃝検出限界は 8 ng( BSA )と高感度です。
⃝染色開始から数分でバンドが確認できます( 右図参照 )
。
⃝ゲルの脱色は脱イオン水のみで行えます。
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
QuickBlue Staining Solution
BDL
DS500
ミニゲル約 20 枚分
500 ml /
11,000
他社
染色液
他社製品との比較
高感度な上,全工程を短時間で完了できるため迅速に結果が
確認できます。
BioDynamics Laboratory 社 製品カタログ 2013
31
RNase - free Water
RNase フリーグレードの水です。
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
Water, DEPC - Treated
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
Water, RNase - free, Non DEPC - Treated
BDL
DR110
5 × 1 ml /
3,000
BDL
DR120
5 × 1 ml /
3,000
BDL
DR115
2 × 50 ml /
4,000
BDL
DR125
2 × 50 ml /
4,000
BDL
DR117
500 ml /
8,000
BDL
DR127
500 ml /
8,000
DEPC( Diethylpyrocarbonate )処理水。オートクレーブ済み。
限外ろ過による精製水。RNA 実験に有用。
Salmon Sperm DNA
ブロッキング剤として有用なサケ精子由来 DNA です。
特 長
⃝超音波破砕,および Shearing によって断片化処理した
サケ精子 DNA です。
⃝ハイブリダイゼーションの際のブロッキング剤として有用
です。
⃝DNA のサイズは 300 〜 700 bp です。
⃝DNase フリーです。 ⃝濃度:10 mg / ml
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
DNA, Salmon Sperm, Sonicated
BDL
F012
1 ml /
4,000
BDL
F013
5 × 1 ml /
18,000
抗 6 × His タグモノクローナル抗体
6 × His タグ融合タンパク質の検出用抗体です。
1
特 長
2
3 4
5 6 7
8
⃝N 末端側に 6 × His タグのついた融合タンパク質を認識
します。
⃝一般的な 6 × His タグ融合タンパク質発現ベクターを用
いて産生した組換え体タンパク質を認識することを確認し
ています。
⃝E LISA,ウエスタンブロッティング,アフィニティクロマ
トグラフィーなどに適用できます。
⃝アフィニティ精製品です。
品名
メーカー
商品コード
包装 /
価格(¥)
Anti - 6 - His, Mouse - Mono( H21-5 )〈 Anti - 6 × Histidine 〉
BDL
F008
100 μg /
25,000
Mono:Monoclonal,( )内はクローンを表します。
NOTE
※ 本紙に記載されている価格は,2013 年 1 月 1 日現在です。
※ 本紙に掲載されている製品は,すべて研究目的用にのみ販売しています。医薬品,
診断用医薬品,食品検査等の用途には使用できません。
「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様
※ カルタヘナ 印の製品は,
分子生物学関連試薬
性の確保に関する法律( 通称:カルタヘナ法 )」使用規制対象となりますので,ご
使用に際しては規制に則し,適切にお取り扱い下さい。詳細は当社テクニカルサポー
ト( 試薬に関して:下記参照 )までお問い合わせ下さい。
※ − 80℃ 印は,− 80℃ での保存を要する製品です。ドライアイス包装で配送して
いますが,製品到着後,直ちに − 80℃ のフリーザー等に保存して下さい。
6 × His タグ融合タンパク質の検出
市販されている発現ベクターを使用して産生した 6 × His タグ融合タンパ
ク質( レーン 3 〜 7 )を,本抗体を用いてウエスタンブロッティングによ
り検出した。レーン 1,8 は分子量マーカー。レーン 2 は 6 × His タグを
含まないタンパク質を泳動したコントロール。
※ 外観・仕様は改善のため,予告なく変更することがあります。
※ 記載されている会社および商品名は,BioDynamics Laboratory 社の商標または登
録商標です。
※ 表示価格に,消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合
がありますので,あらかじめご了承下さい。
※ ご注文の際は,
[ 品名,メーカー( BDL ),商品コード,包装,数量 ]をお知らせ
下さい。 フナコシのライ フ サ イ エ ン ス 研 究 用 試 薬 と 機 器
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不 要となった 際
は、古 紙 回 収・
リサイクルに出し
てください
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〒 113-0033 東京都文京区本郷 2 丁目 9 番 7 号
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試薬に関して:Tel. 03-5684-1620 Fax 03-5684-1775
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Z1-W01T-01( 2013.01 )