0 . 総胆管結紮による急性胆汁うっ滞における 1 Keap1-Nrf 2 systemの役割筑波大学大学院　人間総合科学研究科　消化器内科杉本　浩一、岡田　浩介、兵頭一之介筑波大学大学院　人間総合科学研究科　スポーツ医学　スポーツ医科学基礎論正田　純一東北大学大学院　医学系研究科　医化学分野田口　恵子、山本　雅之筑波大学大学院　人間総合研究科　環境分子生物学蕨　栄治、石井　哲郎田辺三菱製薬株式会社後藤　信冶【目的】胆管結石や悪性腫瘍によって引き起こされる閉塞性胆汁うっ滞は、肝における toxic bile acid や bilirubin の貯留により肝細胞に強い障害を与える。障害を受けた肝臓では大量の活性酸素が発生し、その消去のために還元型グルタチオンが消費されることが報告されているが、生体の閉塞性胆汁うっ滞への防御機構についての分子メカニズムの詳細は不明な点が多い。今回我々は、生体の肝解毒代謝、酸化ストレス応答に密接に関与する転写因子 Nrf 2 に着目し、Nrf 2 過剰発現モデルである Keap1 knock down（ KD）マウスにおける総胆管結紮下（ CBDL）での生体応答について検討した。また、Nrf 2 活性化、それによる肝細胞の抗酸化ストレス応答、解毒代謝、輸送の賦活の観点より検討した。【方法】ラット肝細胞に胆汁酸を添加して培養し、転写因子 Nrf 2 の発現レベルについて解析した。また、野生型および Keap 1 KD マウスに対してBDLを 2 日間行い、閉塞性胆汁うっ滞病態モデルにおける生体の反応を解析した。更に、肝臓における Nrf 2 、抗酸化ストレス応答、肝解毒代謝および肝輸送蛋白の各因子の発現レベルについて解析した。【成績】胆汁酸は、ラット肝細胞における Nrf 2 の核への集積を促進し、 Nrf2を活性化した。この反応は cholic acid（ CA）にて最も強い傾向が見られた。Keap 1 KD マウスにおいては、野性型マウスと比較して CBDL による肝壊死および活性酸素量を反映する 4 -HNE の発生が抑制されており、血清ビリルビンの上昇も有意に抑制されていた。また、Keap 1 KD マウスでは酸化ストレス応答分子γ -GCS、NQO 1 、GSTa 1 などの酸化ストレス応答分子の基礎発現が顕著に増加していた。また、CBDL によって毛細胆管膜に存在する肝輸送蛋白 Mrp 2 の発現には変化が認められなかったが、基底膜側に存在する Mrp 3 、Mrp 4 の発現は有意に増加し、更にその発現亢進も Keap 1 KD マウスでは顕著であった。これらの結果から転写因子 Nrf 2 は、CBDL による閉塞性胆汁うっ滞病態において活性酸素消去やビリルビン排泄亢進によって生体の防御機能を果たすものと考えられた。【結論】転写因子 Nrf 2 は、総胆管結紮による急性閉塞性胆汁うっ滞病態において肝細胞の抗酸化ストレス応答、解毒代謝、肝細胞輸送を賦活化し、生体において防御的機能を果たした。Nrf 2 は胆汁うっ滞症に対する治療の新しい分子標的として重要であると考えられた。