KURENAI : Kyoto University Research Information Repository Title Author(s) Citation Issue Date URL Involvement of myeloid dendritic cells in the development of gastric secondary lymphoid follicles in Helicobacter pyloriinfected BALB/c mice with neonatal thymectomy( Abstract_要旨) Nishi, Toshiki Kyoto University (京都大学) 2003-03-24 http://hdl.handle.net/2433/148737 Right Type Textversion Thesis or Dissertation none Kyoto University 【329】氏名にしとし西俊き希学位（専攻分野）博士（医学）学位記番号医博第2614号学位授与の日付平成15年 3 月 24 日学位授与の要件学位規則第 4 条第1項該当研究科・専攻医学研究科内科系専攻学位論文題目 InvoIvement of Myeloid Dendritic Ce11sin the Development of Gas− tric Secondary Lymphoid Folliclesin Helicobacter pylori−infected BALB／c Mice with NeonatalThymectomy （ヘリコバクターピロリ感染胸腺摘除マウスを用いた胃濾胞形成における樹状細胞の関与）（主査）論文調査委員教授真鍋俊明教授光山正雄教授千葉勉三ム剤相文内容の要主論文（緒言）ヘリコバクターピロリ感染による濾胞性胃炎は胃MALTリンパ腫の発生母地であると考えられている。ヘリコバクターピロリと宿主間における免疫応答は元来リンパ装置の存在しない胃粘膜での濾胞形成機序に重要な役割を果たしていると考えられているが，その胃粘膜におけるmicroenvironmentの成立機序の詳細については不明な点が多い。我々は新生仔期の胸腺摘出により発症する自己免疫性胃炎マウスにヘリコバクターピロリを感染させることにより早期より濾胞が形成され，さらに長期にわたるとMALTリンパ腫様病変が発症する事をすでに報告した。今回このモデルの濾胞形成過程において抗原提示細胞の中でもmicroenvironmentの形成に重要な役割を有する樹状細胞および関連するサイトカイン，ケモカインについて検討した。（方法）生後三日目のBALB／cマウスに胸腺摘出を行い，6週日にヘリコバクターピロリを経口感染させた。また，同時期の正常BALB／cマウスおよびヘリコバクターピロl）非感染自己免疫性胃炎マウス（AIG）との間で胃粘膜における樹状細胞のサブセット（Myeloid DC：CDllc＋，CDllb＋，Lymphoid DC＝CDllc＋，CD8a＋）の分布を蛍光免疫染色し共焦点レーザー顕微鏡をて経時的に感染後3ケ月まで観察し比較検討した。更に樹状細胞および濾胞形成に関連すると考えられるケモカイン，サイトカイン（Eotaxin，TARC，MIP−3α，BLC，IFN−γ，IL−4）の産生をRealTime PCR法により定量的に比較検討した。また樹状細胞誘導に深く関わるケモカインであるMIP．3αと濾胞性樹状細胞（FDC）の分布を免疫染色により併せて検討した。（成績）正常胃では樹状細胞の誘導は全く認められなかったが，AIGマウスの胃粘膜においては1ymphoid，myeloid系共に粘膜筋板近傍にわずかに誘導されていた。一方ヘリコバクターピロリ感染群におけるIymphoid系の樹状細胞は，AIG マウスと同様，粘膜筋板近傍に誘導されるにとどまったが，myelid系樹状細胞は粘膜固有層まで分布しておりその数も著しく増加していた。また，CD80，86およびMHC classIIなどの共刺激分子を発現する成熟樹状細胞はヘリコバクターピロリ感染マウスにおいてのみ認められた。サイトカイン，ケモカインの産生ではAIGマウスにおいてIFN−γの増強を認めたが，ヘリコバクターピロリ感染マウスにおいては更にIL−4の増強も認めた。Th2ケモカインであるTARC，Eotaxin およびDCの誘導に関与するMIP−3αとFDCの産生するBLCはヘリコバクターピロリ感染マウスにおいて有意な上昇を認めた。免疫染色ではヘリコバクターピロリ感染マウスのみでMIP−3aとFDCが陽性であった。（結論）以上より自己免疫性胃炎モデルマウスにおけるヘリコバクターピロリ感染によるリンパ濾胞形成にはThlの持続炎症に加えてTh2を誘導するケモカインや樹状細胞（Myeloid DC）の関与が示唆された。 −784− 論文審査の結果の要旨ヘリコバクターピロリ感染による濾胞性胃炎は胃MALTリンパ腫の発生母地であると考えられている。本研究で申請者は新生仔期の胸腺摘出（nTx）により発症する自己免疫性胃炎マウスにヘリコバクターピロリを感染させることにより早期より濾胞が形成されるモデルにおける樹状細胞および関連するサイトカイン，ケモカインの関与について検討した。マウス正常胃の免疫染色では樹状細胞の誘導は全く認められなかったが，nTxマウスの胃粘膜においては1ymphoid， myeloid系樹状細胞共に粘膜筋板近傍にわずかに誘導されていた。一方ヘリコバクターピロリ感染nTxマウスにおける Iymphoid系の樹状細胞はnTxマウスと同様，粘膜筋板近傍に誘導されるにとどまったが，myelid系樹状細胞は粘膜固有層まで分布しておりその数も著しく増加していた。サイトカイン，ケモカインのmRNAの発現ではnTxマウスにおいて IFN−γの増強を認めたが，ヘリコバクターピロリ感染nTxマウスにおいては更にIL−4の増強も認めた。Th2ケモカインであるTARC，Eotaxinおよび樹状細胞の誘導に関与するMIP−3αとFDCの産生するBLCはヘリコバクターピロリ感染 nTxマウスにおいて有意な上昇を認めた。以上の研究は胃粘膜における濾胞形成に関する新たな機構の解明に貢献し消化器病学に寄与するところが多い。従って，本論文は博士（医学）の学位論文として価値あるものと認める。なお，本学位授与申請者は，平成15年2月24日実施の論文内容とそれに関連した試問を受け，合格と認められたものである。ー785 岬