当院小児科入院症例より分離された肺炎球菌およびインフルエンザ菌の薬剤耐性遺伝子の解析仙台医療センター小児科大橋芳之肺炎球菌の耐性に関わる遺伝子 β-ラクタム系薬 pbp1a （細胞壁伸長）マクロライド系薬 mefA （薬剤排泄膜蛋白） pbp2b （ﾗﾝｾｯﾄ形成） pbp2x （隔壁合成） ermB （23srRNAﾒﾁﾙ化）ｲﾝﾌﾙｴﾝｻﾞ菌耐性に関わる遺伝子 bla β-ラクタマーゼ pbp3(ftsⅠ) （隔壁合成）研究の目的小児科に入院した症例より分離された肺炎球菌およびインフルエンザ菌について、薬剤耐性遺伝子の発現を調べ、耐性遺伝子の獲得状況を解析し、各種抗生剤耐性度との関連性を分析することを目的とする。対象２００５年４月∼２００６年３月小児科入院症例：７９1例呼吸器感染症：５７５例（７２．６％）その他 27.4% 急性肺炎 32.4% 急性中耳炎 0.6% クループ 2.8% 気管支喘息 9.0% 急性上気道炎 12.0% 急性気管支炎 15.8% 呼吸器感染症症例の構成人 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 女児男児 66 42 33 76 ０歳 100 62 １歳２歳 27 18 24 37 29 11 12 38 ３歳４歳５歳６歳＜遺伝子解析方法変異特異的プライマーによるPCR 解析遺伝子肺炎球菌 pbp1a, pbp2b, pbp2x mefA, ermB ｲﾝﾌﾙｴﾝｻﾞ菌 pbp3, bla 変異遺伝子発現と肺炎球菌 pbp1a gPSSP gPISP gPRSP pbp2b pbp2x 年齢別耐性肺炎球菌検出の割合全体 4.8% 27.9% gPSSP gPISP gPRSP 67.3% (n=165) 4歳以上 5.6% 33.3% 61.1% (n=18) 3歳 5.0% 40.0% 55.0% 37.5% 56.3% (n=20) 2歳 6.3% (n=32) 1歳 14.8% 85.2% (n=54) 0歳 9.8% 29.3% 61.0% (n=41) 0% 20% 40% 60% 80% 100% 変異遺伝子発現と肺炎球菌(n=165) pbp1a 8 1 gPSSP gPISP 0 gPRSP 13 111 26 2 4 pbp2b pbp2x 肺炎球菌におけるﾏｸﾛﾗｲﾄﾞ耐性遺伝子の発現割合全体 29.1% (N=165) 57.0% 9.1% gPRSP 4.8% 36.0% (N=111) 56.8% 6.3% 0.9% 17.4% gPISP （−） mefA 両方 ermB 15.2% (N=46) 65.2% 2.2% gPSSP 75.0% 12.5% 12.5% (N=8) 0% 20% 40% 60% 80% 100% gPSSP(n=8) PIPC S I R 100.0% MINO 75.0% 25.0% IPM 100.0% CTM 100.0% CDTR-PI 100.0% CAZ 100.0% 12.5% 50.0% CAM ABPC 37.5% 100.0% 0% 20% 40% 60% 80% 100% gPISP(n=46) PIPC S I R 100.0% 17.4% MINO 30.4% 52.2% IPM 97.8% CTM 97.8% CDTR-PI 2.2% 2.2% 89.1% 10.9% 73.9% CAZ CAM 17.4% 6.5% 26.1% 4.3% 82.6% ABPC 69.6% 0% 19.6% 20% 40% 60% 80% 100% gPRSP(n=111) PIPC MINO 2.7% 97.3% 4.5% 42.3% 53.2% IPM 0.9% 99.1% CTM 6.3% 93.7% CDTR-PI 81.1% 18.9% 50.5% CAZ CAM 0.9% ABPC 2.7% 0% 9.0% 40.5% 99.1% 30.6% 66.7% 20% 40% 60% 80% 100% S I R 耐性肺炎球菌のまとめ１）呼吸器感染症症例575例中165例(28.7%) より肺炎球菌が検出され、うちPISP(27.9%), ｇPRSP(67.3%)と95.2%にﾍﾟﾆｼﾘﾝ耐性遺伝子が検出された。２）ﾍﾟﾆｼﾘﾝ耐性菌のほとんどはpbp2xの変異を有していた。３）ﾍﾟﾆｼﾘﾝ耐性菌では高率にﾏｸﾛﾗｲﾄﾞ耐性遺伝子も有していた。ｲﾝﾌﾙｴﾝｻﾞ菌耐性に関わる遺伝子 bla β-ラクタマーゼ pbp3(ftsⅠ) （隔壁合成）ｲﾝﾌﾙｴﾝｻﾞ菌PBP3上の検出変異部位 ② Ser385→Thr Met377→Ile Leu389→Phe ① Asn526→Lys 耐性ｲﾝﾌﾙｴﾝｻﾞ菌の分類 β-ﾗｸﾀ PBP3変異ﾏｰｾﾞ ① ①＋② gBLNAS ーーー gBLPAR ＋ーー gLow-BLNAR ー＋ー gBLNAR ーー＋ gBLPACR-Ⅰ ＋＋ー gBLPACR-Ⅱ ＋ー＋耐性ｲﾝﾌﾙｴﾝｻﾞ菌の検出割合 22.8% 13.0% 全体 (n=123) 4歳以上 2.4% 60.2% 11.8% 70.6% 17.6% 7.1% (n=17) 3歳 35.7% (n=14) 42.9% 14.3% 11.8% 2歳 (n=17) 5.9% 58.8% 23.5% 1歳 1.6% 4.0% 12.0% 66.0% 16.0% 2.0% (n=50) 0歳 (n=25) 0% 32.0% 20% 52.0% 16.0% 40% 60% 80% 0.0% 100% BLNAS Low-BLNAR BLNAR BLPCR-Ⅰ BLPCR-Ⅱ gBLNAS(N=28) PIPC MINO IPM CTM CDTR-PI CAZ CAM C/A ABPC 100.0% 100.0% 100.0% 96.4% 100.0% 100.0% 82.1% 96.4% 89.3% 0% 20% 40% 60% 3.6% 7.1% 3.6% 10.7% 10.7% 80% S 100% I R gLow-BLNAR(N=16) PIPC MINO IPM CTM CDTR-PI CAZ CAM C/A ABPC 100.0% 100.0% 100.0% 93.8% 100.0% 100.0% 68.8% 75.0% 62.5% 0% 20% 40% 6.3% 18.8% 25.0% 31.3% 12.5% 6.3% 60% 80% S 100% I R gBLNAR(N=74) PIPC 100.0% MINO 98.6% 1.4% 97.3% 2.7% IPM CTM 12.2% 10.8% 77.0% 1.4% CDTR-PI 98.6% CAZ 100.0% 16.2% 62.2% 21.6% CAM 4.1% 58.1% C/A 37.8% 29.7% 35.1% 35.1% ABPC 0% 20% 40% 60% 80% S 100% I R gBLPACR-I/II(N=5) PIPC MINO IPM CTM 20.0% CDTR-PI CAZ CAM C/A ABPC0.0% 0% 60.0% 20.0% 20.0% 100.0% 100.0% 20.0% 60.0% 100.0% 100.0% 60.0% 80.0% 100.0% 20% 40% 60% 20.0% 20.0% 20.0% 80% S 100% I R 耐性ｲﾝﾌﾙｴﾝｻﾞ菌のまとめ１）呼吸器感染症症例575例中123例(21.4%) よりｲﾝﾌﾙｴﾝｻﾞ菌が検出され、うち77.2%が耐性菌であった。２）PBP3の2領域で変異を有するBLNARや BRPACR−Ⅱはあわせて61.8％で検出された。３）耐性菌においてもPIPC, MINO, IPM, CDTR-PI, CAZでは90%以上が感受性菌であった。結語１）小児呼吸器感染症では高率に耐性遺伝子を有しており、臨床経過により抗生剤選択を適切に判断する必要があると思われた。２）耐性菌の出現頻度を経時的にモニターすることは、感染症治療戦略を構築するためばかりでなく、耐性菌出現の抑制も視野にいれた抗菌薬使用の適正化という点でも重要と思われる。