Page 1 Page 2 ラクツロン酸とD一グ`ルクロン酸が主なものである

4
7
弘前大学教育学部紀要第 9
4
号 :4
7
-5
2(
2
0
0
5
年1
0月)
Bu
l
l
,
Fa
c
.
Ed
u
c
.
Hi
r
o
s
a
k
iUn
i
v.
9
4:4
7
-5
2(
Oc
t
.
2
0
0
5
)
植物細胞壁多糖構成中性糖及び各種グルコ二糖類の
陰イオンクロマトによる分析
Ana
l
ys
i
so
fne
ut
r
a
ls
uga
rc
o
mpo
s
i
t
i
o
no
fpo
l
ys
a
c
c
ha
r
i
def
r
o
mt
he
pl
a
ntc
e
l
lwa
l
l
sa
ndo
fgl
uc
o
bi
o
s
e
sbya
ni
o
ne
xc
ha
ngec
hr
o
ma
t
o
gr
a
phy
加
藤
陽治事･伊
藤
聖子*† ･渡
辺
敏
幸榊
Yo
j
iKATO●
,Se
i
koI
TO●
十
,a
ndTo
s
hi
yukiWATANABE=
【
論文要旨】
植物細胞壁多糖を構成する主な中性単糖 7
種とグルコ二糖類を,短時間で連続的に分離同定する方法とし
3
0
0 (日本ダイオネクス社) によ
て,パルスドアンペロメトリー検出 (
金電極)付きのイオンクロマトDXHPAEC) を用いての条件検討を行った｡
る陰イオンクロマトグラフィー (
その結果,溶離液として超純水を用いることにより, 目的の中性単糖 7
種 (
L
フコース,L
アラビノース,
Lラムノース,D
ガ
ラクトース,D
グルコース,D
キシロース,D
マンノース) を分離することができた｡ま
boPacPAlカラムを用い,グラジェント溶出によって,aグルコ二糖類 1
a.
aた,中性単糖分析と同様のCar
トレハロース [αD
GI
c(
1
-1
)
-αDGI
c
]
, コ-ジビオース [αD
GI
c(
1
-2)
D
GI
c
]
,ニゲロース [αDGI
c(
1
-3)
D
GI
c
]
,マルトース [aDGI
c(
1
-4)
DGI
c
]
, イソマルトース [a DI
GI
c(
1
-6)
DI
GI
c
]
t 及び βグルコ
二糖類
8,
β-トレハロース [βDI
GI
c(
1
-1
)
βD
I
GI
c
]
,ソホロース [βD
GI
c(
1-2
)
DI
GI
c
]
,ラミナリビオー
1
D
GI
c(
1
-3)
DGI
c
]
, セロビオース [βD
GI
c(
1
-4)
DI
GI
c
]
, ゲンチオビオース [βDGI
c(
1
-6)
ス [βD
GI
c
]
Ⅰの分離･同定が可能であるとわかった｡このことから,植物細胞壁多糖構成中性単糖及びグルコ二
boPacPAlカラムにより,多糖の酸加水分解物及び部分分解物の分離同定
糖の分析が, ダイオネクスのCar
を迅速に行えることが示唆された｡
キーワード:細胞壁多糖,中性単糖, グルコ二糖類,陰イオンクロマトグラフィー
1.緒言
アラビノキシランなどのキシラン系多糖及びキシ
ログルカンであり, セルロース画分は, (
1-4)
植物細胞壁を構成する多糖は,一般に熱水,シュ
β-D-グルカンである｡これら細胞壁,あるいは
ウ酸アンモニウム,キレート剤 EDTA,メタリン
ペクチン質,ヘミセルロース,セルロースの各画
酸などによって抽出されるペクチン質画分,それ
分から分離精製した多糖を構成している単糖組成
4%の水酸化カリウム (
水酸化ナトリ
に続く4-2
を知る際,それぞれを酸で加水分解し,生成した
ウム) などのアルカリで抽出されるヘミセルロー
単糖類を種々のクロマトグラフィーで分離同定し
ス画分,そして,アルカリ抽出残液,セルロース
ている1･2)｡
画分に大きく分けることができる1
)
｡
高等植物細胞壁多糖を構成している単糖類は,
ペクチン質画分には, ラムノガラクツロナン,
ヘキソースとしてD-グルコース, D-ガラクトース
アラビナン及びアラビノガラクタンなどのガラク
及びDマンノース,ペントースとしてL-アラビノー
タン系多糖, ヘミセルロース画分には, (
1-3)
ス, D-キシロース, メチルペントースとしてL-ラ
β-D-グルカン, (
1-3)
,(
1
-4)
-β-D-グルカン,
ムノースとL-フコース,それに酸性糖としてD-ガ
*弘前大学教育学部家政学科講座
Depar
t
mento
fHomeEc
onomi
c
s
,Facul
t
yofEducat
i
on,Hi
r
os
akiUni
ver
s
l
t
y
**福島大学教育学部
Facul
t
yofEducat
i
on,Fukus
hi
maUni
ver
s
i
t
y
†現㈲オリジン生化学研究所 (
東京)
Or
i
gi
nBi
oc
hemi
ca
lLabor
at
or
yl
nc
.
4
8
加
藤
陽
治･伊
藤
聖
子･渡
辺
敏
幸
ラクツロン酸とD-グルクロン酸が主なものであ
(
1
-3
)
D
GI
c
]
, セロビオース [βD
GI
c(
1
-4)
D
-
る｡これら単糖類の分離同定には,種々の方法が
D
GI
c(
1
-6)
D
GI
c
] 及びゲンチオビオース [β-
知られている｡我々はこれまで, これら細胞壁多
GI
c
] を用いた｡
糖構成単糖のなかでも,主要な中性単糖をアルジ
トールトリフルオロアセテートにした後,GLCに
2)中性単糖の分析
て分析を行っていた｡一方,HPLCによる分析方
中性単糖のスタンダード溶液を,パルスドアン
法も用いられているが,誘導体化する必要があり
ペロメトリー検出陰イオンクロマトグラフィー
迅速的ではない｡さらに, 現在では蛍光分析
(
HPAEC分析)にて分離･定量を行った｡HPAEC
(
HPLC)なども用いられている
分析は,パルスドアンペロメトリー検出 (
金電極)
｡
HPLCでは,単糖類2
分子が縮合した二糖類な
3
0
0 (日本ダイオネク
付きのイオンクロマトDX-
ども分析されている｡二糖類は,同一の単糖類の
r
bo
Pa
cPAl (日
ス社) を用い,分離カラムはCa
結合であっても,縮合するOH基の位置が異なれ
r
本ダイオネクス社 ) を, ガードカラムはCa
ば,異なる二糖類が生成する｡例えば, グルコー
bo
Pa
cPAIGUARD(日本ダイオネクス社) を用
α-トレハロース (α1
スからなる二糖類でも, α,
6m
いた3)｡分析条件は, はじめに溶離液として1
結合), コ- ジビオース (α1-2
結合), ニ
-α1
M水酸化ナトリウム (
糖分析標準溶離液)を用い,
結合),マルトース (α1-4
結合),
ゲロース (α1-3
グラジェントをかけるなどして最適分離条件を検
結合)があり,また,β,
βイソマルトース (α1-6
討した｡
トレハロース (
β1-β1結合), ソホロース (
β1
-2
結合), ラミナリビオース (
β1-3
結合), セ
3)グルコ二糖類の分析
β1-4
結合)及びゲンチオビオース
ロビオース (
グルコ二糖類の分析も上述の2) と同様に,パ
(β1-6結合)があるグルコ二糖の結合位置の
ルスドアンペロメトリー検出陰イオンクロマトグ
違いは,物理的性質や生理的機能性の違いにも影
ラフィー (
HPAEC分析 ) を行った｡溶離液はA
響することが多数報告されている｡
液として1
0
0
mM水酸化ナトリウム,B液として
｡
我々の研究室ではこれまで,糖組成分析の迅速
1
0
0
mM水酸化ナトリウム/5
0
0
mM酢酸ナトリウ
化及びオリゴ糖の簡便な分析法の検討を進めてき
0
0
%(
開始0分) ∼7
0
%(
3
0
分後),
ムを用い,A液 1
た｡今回,植物細胞壁多糖構成中性単糖とグルコ
B液0
%(
開始0分 ) ∼3
0
%(
3
0
分後 ) の直線的グラ
二糖類の分離同定について,陰イオンクロマトを
.
O
ml
/分の流速で行った｡
ジェントで1
用いて検討した結果を報告する｡
2.実験方法
1)試料
LFuc),
市販の標準中性単糖であるフコース (
アラビノース (
L
Ar
a
)
, ラムノース (
LRha
)
,ガ
3.結果及び考察
多糖の糖組成を分析するには,多糖を酸加水分
解などで単糖類に分解し,それから種々の方法で
L
Rha
,L
Fuc
,LAr
a
,D
Ⅹyl
,D
GI
c
,
中性単糖類 (
l
,D
Ma
n)の分離･定量を行う｡
D
Ga
D
Ga
l
),グルコース (
D
GI
〔
)
,キシロー
ラクトース (
PPC及びTLC分析は,加水分解で調製したサン
D
Ⅹyl
)及びマンノース (
D
Ma
n)の7
種を超
ス (
プルをそのまま漉紙及び薄層上に負荷して多重展
純水に溶解し,それぞれ0
.
1〟mo
l
相当量を含むス
開を行い,個々の単糖類を識別できる｡しかし,
ml
を試料として用いた｡ま
タンダード混合溶液 1
その状態からは定量することはできず, さらに定
デオキシグルコース
た, 内部標準物質として2
量分析を必要とするものである｡さらに, この分
(
2
DG) を用いた｡
析は数時間から場合によっては半日以上の時間を
α-トレハロース
また, グルコ二糖として, α,
要することもあり,数多くの試料を分析する時な
[aD
I
GI
c(
1
-1)
-aD
GI
c
],コ-ジビオース [aD
-
どは好ましくない｡そして,当研究室で主に用い
c(
1
-2)
D
GI
c], ニゲロース [aD
GI
c(
1
-3
)
D
GI
てきたGLC分析は,加水分解で得られた単糖をア
, マルトース [αD
GI
c(
1
-4)
D
GI
c
]
,イソ
GI
c
]
ルジトールアセテートなどの誘導体化する必要が
D
GI
c(
1
-6)
D
GI
c
]
, β,
β-トレハ
マルトース [α-
あり, この分析法によって分離･定量が同時に可
D
GI
c(
1
-1
)
βD
GI
c
]
, ソホロース
ロース [β-
能となるが,分析の前処理に非常に時間を要する
[
βD
GI
c(
1
-2)
D
GI
c
]
,ラミナリビオース [
βD
GI
c
ものである｡また,HPLC分析は,GLC分析に比
4
9
植物細胞壁多糖構成中性糖及び各種グルコ二糖類の陰イオンクロマトによる分析
ベると誘導体化の前処理なしに直接クロマトグラ
-3)
DGI
c
]
, イソマルトース [a D
GI
c(
1
-6
)
フィーにかけられ,PPCやTLCと同程度のサンプ
DGI
c
]は清酒中の酷味成分として知られており,
ル量で数十分のオーダーで分析が可能となり,修
コ-ジビオースは抗う蝕性, イソマルトースはビ
飾することなく分離精製したものを分取できるこ
フィズス菌の増殖を促進することなども報告され
となど利点が多い｡しかし,HPLCの一つ,単糖
ている6)｡また, トレハロースは非還元性オリゴ
に蛍光標識をつけて高感度選択的検出をする方法
糖で,デンプンの老化防止や骨租擬症改善効果な
は,個々の糖を特異的に認識できないという欠点
どが報告されている7･8)｡近年では, グルコ二糖
もある｡もう一つ,そのままクロマトグラフィー
はインターロイキン1
2(
I
L1
2)依存症の1
型ヘル
にかける方法もあるが, これはカラムの種類に
パーT細胞 (
Th) タイプの免疫応答の活性化を通
よって分離できるものと分離できないものがある
して免疫を賦活することが報告されるなど9･
1
0
)
,
ため,その目的に合わせてその都度カラムを変え
グルコシド結合
生理的機能が注目されている｡ β-
なければならない｡これは,連続分析には適さな
のゲンチオビオースは,糖類の中でも甘味ではな
いものと考える｡
く苦味を呈するグルコ二糖であり,構成糖が同じ
そこで,HPAEC分析は,多糖の酸加水分解物
でも,結合位置によって様々な性質を示す｡これ
をすぐにクロマトにかけられ,分析に要する時間
らオリゴ糖の構造解析の一手法として,部分分解
の短縮及び微量分析が可能で,多糖構成単糖の分
とそれに引き続くオリゴ糖分析が一般になされて
析には非常に有効な方法である｡ HPAEC分析が
いる｡オリゴ糖分析にはHPLCが主に用いられ
最も簡便であるとし,その測定条件を検討した｡
1
ト1
3
)
, グルコ二糖のような結合位置異性体は高感
これまで,
HPAEC分析での中性単糖の分離には,
度分析が必要となるが,迅速に行える方法は少な
1
6mM Na
OHを溶離液として用いて行われてき
たが,図1
のAより,7
種の中性単糖のいくつかの
ピークが重なって検出された｡この条件ではすべ
てを分離できず,それぞれの糖を定量することも
できなかった｡そこで,7
種の中性単糖を分離で
きるまで溶離液のアルカリ濃度を薄くしていった
結果, 図1
のBに示したように超純水のみを使用
することで,7
種の中性単糖すべてを分離･定量
することが可能であるとわかった｡
一方,食品中の糖質の分析にも,各種クロマト
が使用されている｡食品中の糖質のなかでもグル
コ二糖類に注目し,含有食品と構造を表 1にまと
めた2･
4
･5
)｡ αグルコシド結合のコ- ジビオース
図 1 中性単糖のHPAECクロマトグラム
溶離液 -A:
1
6
mMNa
OH,
B:
超純水
[aD
I
GI
c(
1-2)
DGI
c
]やニゲロース [aDGI
c(
1
表 1 食品中のグルコ二糖類
グルコ二糖
食
品
構
造
トレハロース
椎茸･しめじ･マッシュルーム･酵母
αDGI
c(
1
-1
)
-αD
GI
c
コ-ジビオース
清酒･蜂蜜
c(
1-2)
DGI
c
αDGI
ニゲロース
清酒･蜂蜜･みりん･ビール
c(
1
-3)
DGI
c
αDGI
マルトース
麦芽･蜂蜜･デンプン
c(
1-4)
DGI
c
αDGI
イソマルトース
清酒･蜂蜜･水飴
c(
1-6)
DGI
c
αDGI
ソホロース
エンジュ (
薬用植物)
β
D
GI
c(
1-2)
DGI
c
ラミナリビオース
褐藻 (コンプ,
ワカメ)
P
I
D
GI
c(
I-3
)
DGI
c
セロビオース
野菜や果実などのセルロース
c(
1-4)
DGI
c
βDGI
ゲンチオビオース
蜂蜜
c(
1-6)
DGI
c
βDGI
5
0
加藤
陽
治･伊
藤
い｡微量で定量分析が可能な4
アミノ安息香酸エ
聖
子･渡
辺敏
幸
の分離･同定が可能であるとわかった｡
チルエステル標識化法 (
ABEE標識化法) を用い
以上の結果から,HPAEC分析によって, 中性
た高感度分析 14 16)や αグルコシダーゼ分解物 (
マ
単糖とグルコ二糖類の分離･定量を迅速に行える
ルトオリゴ糖･ニゲロオリゴ糖)のHPAEC分析 17)
ことが示された｡我々は,細胞壁多糖の詳細構造
について一部報告されているが,我々は, α-及
解析法として, キシログルカン多糖の,HPAEC
び βグルコ二糖類を簡便に分離･同定する方法
を用いた構成オリゴ糖単位での分析結果を報告し
として,HPAEC分析を試みた｡中性単糖分析と
ており18･19),ca
r
bo
Pa
cPAlカラムを用い,溶離
同様のCa
r
bo
Pa
cPAlカラムを用い,前処理なし
液や溶出グラジェントを検討することで,様々な
にグラジェン下落出した結果,結合位置の異なる
糖質の微量分析が可能である｡また,糖質の生理
グルコ二糖 (
図3)
各 αグルコ二糖 (
図2) 及び β-
的機能についても注目される近年,詳細な構造解
G
l
c
a
,
α
ト
レ
ハ
鼻O
.
i
ロ
ス
析ができると同時に,機能性食品素材の分析も簡
便に行える方法として非常に有効であると考え
.
｡
る｡
引用文献
1)桜井直樹, 山本良一,加藤陽治 :腰働戯彪壁
1
l
z
O
l
_
_
∩l
】
l
I
.
,
･
ヾ
L
/
｣
･
一
言
下
し
_
/
･
.
･
E
l
∩
と多厳粛■
,培風館 (
1
9
91
)
2)新家龍,南浦能至,北畑寿美雄,大西正健 :
倉F
I
D
F
l
成分シリーズ,勝者の# 学,朝倉書店
(
1
9
95)
3)高性能イオン交換クロマトグラフィーとパル
スドアンペロメトリ検出 (
HPAEPAD)法
■
∼l
I
l
による糖質の分析 (
第4
版), 日本ダイオネク
ス株式会社 (
1
9
9
9)
4)As
°,K.
,a
ndWa
t
a
na
be
,T.:St
udi
e
so
nbe
e
r
.
hq
l
e
s
図2
Nl
bpo
nNo
ge
l
'
Pa
r
tⅡ.Gl
uc
o
bi
o
s
e
si
nbe
e
r
.
HPAECクロ
0 -グルコシド
結合グルコ二糖類の
マトグラム
i
L
∴
'
.
,35,1
0
7
8-1
0
8
2(
1
9
61
)
ka
ga
kuKa
l
'
s
hl
5)wes
t
on,R.
∫.
,a
ndBr
oc
kl
e
bank,L.
K.:The
o
l
i
gos
a
c
c
ha
r
i
dec
ompos
i
t
i
ono
fs
omeNew
Zeal
andhoneys
.Fo
odChe
m.
,64,33-37
_
二
)
(
1
9
9
9)
6)Ko
hmot
o
,
T.
,Fukui
,
F.
,
Ta
ka
ku,
H.
,
Ma
c
hi
da
,
Y.
,Ar
a
i
,M.
,a
ndMi
t
s
uoka
,T.:Ef
f
e
c
to
fi
s
0
ma
l
t
0
01
i
go
s
a
c
c
ha
r
i
deonhuma
nf
e
c
a
lf
l
o
r
a
.
Bi
Gdo
b
a
c
t
.
Ml
'
c
T
O
nO
m,
7,
61
6
9(
1
9
8
8)
7)El
bei
n,A.
D.
,Pan,Y.
T.
,Pa
s
t
us
zak,Ⅰ
.
,and
l
l
,∫
.
D.:Ne
wi
ns
i
ght
sont
r
e
ha
l
o
s
e:a
Ca
r
r
o
mul
t
i
f
unc
t
i
ona
lmo
l
e
c
ul
e
.Gl
yc
o
b
l
'
o
l
o
gy,13,
1
7
R2
7
R(
2
0
0
3)
8)久保田倫夫
:トレハロースの新しい機能.
NewFo
o
dI
ndu
s
t
r
y,
44,1
8(
2
0
0
2)
9)Mur
o
s
a
ki
,S.
,Mur
o
ya
ma
,K.
,Ya
ma
mo
t
o
,Y.
,
1
5
1
8
1
山■
t
t
･
t
Kus
aka
,H.
,andYo
s
hi
kai
,Y.:I
mmuno
po
-
t
e
nt
i
a
t
i
nga
c
t
i
vi
t
yo
fni
ge
r
o
o
l
i
go
s
a
c
c
ha
r
i
de
s
図3 βグルコシド結合グルコ二糖類のHPAECクロ
f
o
rt
heThe
l
pe
r1
l
i
kei
mmuner
e
s
pons
ei
n
マトグラム
mi
ce.Bl
'
os
c
l
'
.Bl
'
ot
ec
hno
l
.Bl
'
oc
he
m.
,63,
5
1
植物細胞壁多糖構成中性糖及び各種グルコ二糖類の陰イオンクロマトによる分析
3
7
3
3
7
8(
1
9
9
9)
l
i
gos
ac
c
har
i
de
sbypami
nobenzoi
cac
i
d
1
0)Mur
o
s
a
ki
,S.
,Mur
o
ya
ma
,K.
,Ya
ma
mo
t
o
,Y.
,
Li
u,T.
,a
ndYo
s
hi
ka
i
,Y.:Ni
ge
r
o
o
l
i
go
s
a
c
c
ha
r
i
de
sa
ugme
nt
sna
t
ur
a
lki
l
l
e
ra
c
t
i
vl
t
yO
f
Appl
.Gl
ye
t
hyle
s
t
e
r
c
o
nve
r
s
i
o
nme
t
ho
d.
I.
c
o
s
c
l
'
.
,
49,461
4
6
8(
2
0
0
2)
,Ⅰ
.
,To
kuda
,M.
,Ha
s
hi
mo
t
o,H.
,
1
6)Ko
ba
ya
s
hi
Z
nt
.Zmhe
pa
t
i
cmo
no
nuc
l
e
a
rc
e
l
l
si
nmi
c
e
.
Ko
nda
,
T"Na
ka
no
,
H.
,a
ndK
it
a
ha
t
a
,
S.:Pr
i
-
mu
no
pl
z
a
z
･
ma
c
o
1
.
,
2,1
51
-1
5
9(
2
0
0
2)
f
l
C
a
t
i
o
na
ndCha
r
a
c
t
e
r
i
z
a
t
i
o
no
fane
wt
ype
l
l
)Ko
i
z
umi
,K.
,Oka
da
,Y.
,a
ndFukuda
,M.:
o
fαgl
uc
o
s
i
da
s
ef
r
o
m Pa
e
c
i
l
o
myc
e
sl
i
l
a
c
t
i
-
Hi
ghpe
r
f
わ
r
ma
nc
el
i
qui
dc
hr
o
ma
t
o
gr
a
phyo
f
nust
ha
tha
st
r
a
ns
gl
uc
o
s
yl
a
t
i
o
na
c
t
i
vi
t
yt
o
mono
-andol
i
go
s
a
c
c
ha
r
i
de
sonagr
a
phi
-
,
3
-a
nd α1
,
2
l
i
nkedo
l
i
go
s
a
c
pr
oduc
e α1
z
･
bo
l
z
yd
z
･
.
Re
s.
,215,
t
i
z
e
dc
a
r
bo
nc
o
l
umn.Ca
'
o
s
c
l
'
.Bl
'
ot
e
c
I
z
no
l
.Bl
'
oc
I
z
e
m.
,67,
c
ha
r
i
de
s
.Bl
6
7
8
0(
1
9
91
)
2
9
3
5(
2
0
0
3)
1
2)Shi
o
t
a
,M.
,a
ndKo
ba
ya
s
hi
,S.:Ana
l
ys
e
so
f
1
7)Ya
mamot
o,T.
,Unno,T.
,Wat
anabe,Y.
,
αl
i
nkeddi
s
ac
c
ha
r
i
deso
fDgl
uc
os
eby
Ya
ma
mo
t
o
,M.
,Okuya
ma
,M.
,Mo
r
i
,H.
,Chi
-
hi
ghpe
r
f
o
r
ma
nc
el
i
qui
dc
hr
o
ma
t
ogr
a
phy.
ba
,S.
,a
ndKi
mur
aA.:Pr
i
f
i
c
a
t
i
o
na
ndc
ha
r
-
Ca
z
･
bo
l
z
yd
z
･
.
Re
s
.
,
215,
2
0
3
1
2
0
9(
1
9
91
)
ac
t
er
i
zat
i
ono
fAc
r
emoni
um i
mpl
i
c
a
t
um
1
3)Suz
uki
,J
.
,Ko
nda
,A.
,Ka
t
o
,Ⅰ
.
,Ha
s
e
,S.
,a
nd
αgl
uc
o
s
i
da
s
eha
vi
ngr
egl
O
S
e
l
e
c
t
i
vi
t
yf
o
r
l
ke
na
ka
,T.:Ana
l
ys
i
sbyhi
ghpe
r
f
o
r
ma
nc
e
a1
,
3
1
gl
uc
o
s
i
di
cl
i
nka
ge
.Bl
'
oc
I
z
l
'
m Bl
'
o
pI
z
ys
a
ni
o
ne
xc
ha
ngec
hr
o
ma
t
o
gr
a
phyo
fc
o
mpo
-
Act
a.
,1700,1
8
9
1
9
8(
2
0
0
4)
ne
nts
uga
r
sa
st
he
i
rf
luo
r
e
s
c
e
ntpyr
i
dyl
a
mi
-
1
8)Koni
s
hi
,YHMi
t
s
ui
s
hi
,Y.
,andKa
t
o,Y.:
･
I
c.Bl
'
0
1
.CI
z
em.
,55,
noder
i
vat
i
ves
.Agz
Ana
l
ys
I
SO
ft
heo
l
i
go
s
a
c
c
ha
r
i
deuni
t
so
fxy-
2
8
3
2
8
4(
1
9
91
)
l
o
gl
uc
a
nsbydi
ge
s
t
i
o
nwi
t
hi
s
o
pr
l
me
Ve
r
O
S
e
-
,
K.
,
Ya
ma
gu1
4)Ya
s
uno
,
S.
,Mur
a
t
a
,
T.
,
Ko
kubo
pr
oduc
i
ngo
l
i
goxyl
ogl
uc
anhydr
o
l
a
s
ef
o
1
-
,T.
,a
ndKa
me
i
,M.:Two
mo
dea
na
l
ys
t
s
c
hi
l
o
we
dbya
ni
o
ne
xc
ha
ngec
hr
o
ma
t
o
gr
a
phy.
byhi
ghpe
r
f
o
r
ma
nc
el
i
qui
dc
hr
o
ma
t
o
gr
a
phy
Bl
'
os
c
l
'
.Bl
'
ot
ec
I
z
no
l
.Bl
'
oc
I
z
e
m.
,45,4
01
1
40
5
o
fpa
mi
no
be
nz
o
i
ca
c
i
de
t
hyle
s
t
e
r
de
r
i
va
'
o
s
c
l
'
.Bl
'
ot
ec
I
z
no
l
.
t
i
z
edmo
no
s
a
c
c
ha
r
i
de
s
.Bl
(
1
9
9
8)
,
61
,1
9
4
41
1
9
4
6(
1
9
9
7
)
Bl
'
o
c
I
z
e
m.
,Y.
,I
t
o
,
S.
,a
ndMi
t
s
ui
s
hi
,Y.:St
udyo
n
1
9)Ka
t
o
t
hes
t
r
uc
t
ur
e
so
fxyl
o
gl
uc
a
nsus
l
ngXyl
o
g
l
u
-
,
Ⅰ
.
,
Ya
s
uno
,
S.
,
Ha
s
hi
mo
t
o
,
H.
,
I
ku
1
5)Ko
ba
ya
s
hi
-
r
a
,K.
,Na
ka
no
,H.
,a
ndKi
t
a
ha
t
a
,S.:Ana
l
ys
i
so
fpo
s
i
t
i
o
na
li
s
o
me
r
so
fαl
i
nke
dg
l
uc
o
o
-
c
a
ns
pe
c
i
f
i
cenz
yme
s
.TZ
GG,16,3
9
31
40
6
(
2
0
0
4)
(
2
0
0
5
.
7
.
2
9受理)

Download Report