タンパク質定量用試薬プロテインアッセイ BCA キット本品は、溶液中のタンパク質濃度をビシンコニン酸を用いて定量できるキットです。タンパク質定量法の中でも最も汎用されています。塩基性条件下でタンパク質が Cu2+ を Cu+ に還元することに基づいています。 Cu+ が BCA と錯体を形成し、紫色のキレートを生じ、タンパク質濃度に依存して紫色が濃くなります。この紫色を 562nm の吸光度で測定し、標準曲線と比較して溶液中のタンパク質濃度を定量できます。測定法 1．試薬 A と試薬 B を 50：1 で混合する。 2．種々の濃度の BSA 溶液やサンプルと混合する。試験管を用いる時には 20：1 となるように、96 穴プレートを用いるときには 8：1 となるように混合する。 3．下記条件で反応させ、室温に戻したあと、562nm の吸光度を測定する。反応条件定量範囲標準法 37℃ , 30 分間 20 〜 2,000 μg/ml 室温法室温 , 2 時間 20 〜 2,000 μg/ml 60℃ , 30 分間 5 〜 250 μg/ml 高感度法キット内容 0.8 500ml × 1 25ml × 1 Absorbance 試薬Ａ：ビシンコニン酸溶液試薬Ｂ：硫酸銅（Ⅱ）溶液 1.0 （注）本キットにはアルブミン標準液が添付されていません。測定例コード No. 品名 0.4 0.2 0.0 試薬 A と試薬 B を 50：1 で混合した後、試験管中で種々の濃度の BSA 溶液と 20：1 で混合した。その後、高感度法を用い吸光度を測定した。 R² = 0.99 0.6 0 100 200 300 BSA Concentration（μg/ml）規格容量希望納入価格（円） 297-73101 Protein Assay BCA Kit たん白質定量用 250回用 15,000 164-25935 Protein Assay BCA Reagent A たん白質定量用 500ml 13,000 167-25942 Protein Assay BCA Reagent B たん白質定量用 25ml 4,000 プロテインアッセイブラッドフォード試薬本品は、クーマシーブリリアントブルー（CBB）G-250 を含む溶液です。酸性条件下で CBB がタンパク質と結合すると最大吸収波長が 465nm から 595nm にシフトします。Bradford 法は、この吸光度の変化を利用してタンパク質濃度を定量できます。なお、測定試料に界面活性剤が含まれていても、ある一定濃度以下であれば測定に影響を及ぼすことはありません（下記、共存物質の影響をご参照下さい）。測定法 1．種々の濃度の BSA 溶液やサンプルと混合する。下表を参考に測定範囲に応じて、サンプル量と本品の混合比率をご検討下さい。 2．下記条件で反応させ、595nm の吸光度を測定する。（1）（2）（3）使用器具測定結果例試験管試験管マイクロプレート測定範囲 100 〜 1,000 μg/ml 6.25 〜 100 μg/ml 0.78 〜 25 μg/ml 10 μl 20 μl 150 μl 500 μl 380 μl 150 μl 測定サンプル量本品反応時間室温で 10 分間静置測定波長セルに移し替えて 595nm で測定プレートリーダーを用いて 595nm で測定測定例（1）（2） 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 0 250 500 750 0.3 0.2 0.1 0 1,000 0.5 R² = 0.99 0.4 Absorbance R² = 0.97 1 （3） 0.5 Absorbance Absorbance 1.2 0 BSA Concentration（μg/ml） 25 50 75 R² = 0.99 0.4 0.3 0.2 0.1 0 100 0 BSA Concentration（μg/ml） 5 10 15 20 25 BSA Concentration（μg/ml）共存物質の影響タンパク質溶液を測定するとき、下記物質の存在が表示濃度以下であれば、測定結果に影響を及ぼさないことを確認しています。物質 CHAPS 濃度濃度物質濃度 SDS 0.03% グリセロール 20% Triton X-100 0.10% NP-40 0.10% メタノール 10% Tween 20 0.10% エタノールコード No. 168-25911 5% 物質品名 Protein Assay Bradford Reagent 10% 規格容量希望納入価格（円）たん白質定量用 1L 13,000 プロテインアッセイラピッドキットワコー本品は、ピロガロールレッドを色素に用い比色法を基本原理として開発されたピロガロールレッド - モリブデン錯体発色法による測定キットです。ピロガロールレッドがモリブデン酸と結合し、470nm に極大吸収を持つ赤色錯体を形成します。この錯体は酸性下でタンパク質と結合すると波長が 604nm（青紫色）にシフトします。600nm 付近の吸光度を測定することにより、試料中の総タンパク質を定量できます。測定法 1．下表のように発色試液と種々の濃度の BSA 溶液やサンプルとを混合し、室温で 20 分間静置する。 2．600nm の吸光度を測定する。測定範囲試験管法マイクロプレート法 60 ～ 2,000 μg/ml 60 ～ 2,000 μg/ml 測定サンプル量 50 μl 10 μl 発色試液 3ml 250 μl 測定波長セルに移し替えて 600nm で測定プレートリーダーを用いて 600nm で測定キット内容発色試液 310ml × 1（100 回用）、310ml × 4（400 回用） BSA 標準液（2mg/ml） 5ml × 1（100 回用）、5ml × 4（400 回用）共存物質の影響タンパク質溶液を測定するとき、下記物質の存在が表示濃度以下であれば、測定結果に影響を及ぼさないことを確認しています。物質濃度硫酸アンモニウム物質 1mol/l ジチオトレイトール 1mol/l EDTA 0.1mol/l EGTA ※1 0.05mol/l 濃度物質塩化マグネシウム六水和物 1mol/l リン酸二水素ナトリウム二水和物塩酸 1mol/l PIPES 塩化カリウム 1mol/l アジ化ナトリウム 1mol/l 濃度 1mol/l 0.5mol/l 0.20% フルクトース 100 μg/ml メルカプトエタノール Triton X-100 0.10% グルコース 100 μg/ml HEPES 0.1mol/l トリス 2mol/l グルタチオン 500 μg/ml MES 0.7mol/l Tween 20 0.10% グリセロール 99% MOPS 0.2mol/l 尿素 6mol/l グリシン 0.1mol/l 塩化ナトリウムグアニジン塩酸塩 0.5mol/l 水酸化ナトリウム 4mol/l 0.1mol/l ※１ D TT 0 〜 1mol/l が測定サンプル中に共存している場合、使用されるタンパク質の種類や濃度（特に高濃度のタンパク質）によっては発色試液を添加した際、徐々に凝集反応を起こし、沈殿が生じることがあります。コード No. 293-56101 299-56103 品名 Protein Assay Rapid Kit wako 規格容量希望納入価格（円）たん白質定量用 100 回用 400 回用 12,500 29,800 2mg/ml アルブミン溶液，ウシ血清由来タンパク質定量時の検量線作成に使用できます。標準タンパク質として汎用されるウシ由来アルブミンを 2mg/ml となるよう調製しています。コード No. 015-25613 品名 2mg/ml Albumin Solution from Bovine Serum 規格容量たん白質定量用 1ml × 10 規格容量希望納入価格（円） 9,000 関連製品コード No. 品名希望納入価格（円） 018-25625 30w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (37.5:1) 電気泳動用 500ml 8,400 015-25635 30w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (29:1) 電気泳動用 500ml 8,600 019-25655 40w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (37.5:1) 電気泳動用 500ml 12,000 016-25665 40w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (29:1) 電気泳動用 500ml 12,000 017-08012 019-08011 011-08015 Acrylamide 電気泳動用 25g 100g 500g 1,650 2,400 4,100 138-06032 130-06031 N, N'-Methylenebis(acrylamide) 電気泳動用 25g 100g 3,100 7,900 012-08023 016-08021 Ammonium Peroxodisulfate【APS】電気泳動用 10g 100g 1,700 2,200 電気泳動用 25ml 1,900 4,200 205-06313 N, N, N', N'-Tetramethylethylenediamine 【TEMED】 192-11041 Separating Gel Buffer Solution（× 4）　電気泳動用 250ml 199-11051 Stacking Gel Buffer Solution（× 4）電気泳動用 250ml 192-16801 SDS-PAGE Buffer, pH8.5 電気泳動用 5L 198-13282 Sample Buffer Solution（2ME-）（× 4）電気泳動用 25ml 6,800 191-13272 Sample Buffer Solution（2ME+）（× 4）電気泳動用 25ml 7,600 196-16142 Sample Buffer Solution with 3-Mercapto1,2-propanediol（× 4）電気泳動用 25ml 10,000 …2 〜 10℃保存　…− 20℃保存　4,200 13,000 …− 80℃保存　表示がない場合は室温保存です。 …特定毒物　…毒物　…劇物　…毒薬　…劇薬　…危険物　…特定麻薬向精神薬原料　…化審法第一種特定化学物質　…化審法第二種特定化学物質　…化学兵器禁止法第一種指定物質　…化学兵器禁止法第二種指定物質　…カルタヘナ法　覚 …覚せい剤取締法　毒素等 …国民保護法　ダイオキシン …ダイオキシン類 …向精神薬　収載されている試薬は、試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税などは含まれておりません。掲載内容は、2014 年 11 月時点での情報です。上記以外の法律および最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。 14Y05 開 01K