2.4 非臨床試験の概括評価パージェタパージェタ点滴静注420 mg/14 mL （ペルツズマブ（遺伝子組換え））［HER2陽性手術不能又は再発乳癌］第2部（モジュール2）：CTD の概要（サマリー） 2.4 非臨床試験の概括評価中外製薬株式会社 Page 1 パージェタ略語一覧略語 ADCC AUC CL Cmax Ctrough EGF EGFR ELISA ErbB2 2.4 非臨床試験の概括評価英語名 Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity Area under the concentration-time curve Clearance Maximum concentration Trough concentration Epidermal growth factor Epidermal growth factor receptor Enzyme-linked immunosorbent assay Erythroblastic leukemia viral oncogene homolog 2 F GD GLP Bioavailability Gestation day Good laboratory practice HER2 HER3 HER4 HRG IgG ICH Kd LVEF MAPK Human epidermal growth factor receptor type 2 Human epidermal growth factor receptor type 3 Human epidermal growth factor receptor type 4 Heregulin Immunoglobulin G International conference on harmonization of technical requirements for registration of pharmaceuticals for human use Dissociation constant Left ventricular ejection fraction Mitogen-activated protein kinase MCB NSCLC PI3K Master cell bank Non-small-cell lung cancer Phosphatidylinositol-3 kinase Shed ECD Shed extracellular domain t1/2 TK Vc Elimination half-life Toxicokinetics Volume of distribution of the central compartment Vss WCB Volume of distribution at steady-state Working cell bank Page 2 和名抗体依存性細胞障害濃度時間曲線下面積クリアランス最高濃度定常状態の最低濃度上皮増殖因子上皮増殖因子受容体酵素免疫測定法赤芽球性白血病ウイルス癌遺伝子ホモログ2（上皮増殖因子受容体2型と相同受容体）生物学的利用率妊娠日齢医薬品の安全性に関する非臨床試験の実施基準ヒト上皮増殖因子受容体2型ヒト上皮増殖因子受容体3型ヒト上皮増殖因子受容体4型ヘレグリン免疫グロブリン G 医薬品規制調和国際会議解離定数左室駆出率マイトジェン活性化プロテインキナーゼマスターセルバンク非小細胞肺癌ホスファチジルイノシトール-3 キナーゼ Shed 抗原（ここでは腫瘍細胞から遊離した HER2細胞外ドメインを指す）消失相の半減期トキシコキネティクス中央コンパートメントの分布容積定常状態の分布容積ワーキングセルバンク 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ Page 3 目次頁非臨床試験の概括評価 ................................................................................................................ 4 2.4 2.4.1 緒言 ........................................................................................................................................... 4 2.4.2 非臨床試験計画概略 ............................................................................................................... 4 2.4.2.1 薬理試験 ............................................................................................................................. 4 2.4.2.2 薬物動態試験 ..................................................................................................................... 5 2.4.2.3 毒性試験 ............................................................................................................................. 5 2.4.2.4 GLP 及びガイドライン .................................................................................................... 6 2.4.3 薬理試験 ................................................................................................................................... 6 2.4.3.1 効力を裏付ける試験 ......................................................................................................... 6 2.4.3.1.1 In vitro 試験 ............................................................................................................... 6 2.4.3.1.2 In vivo 試験 ................................................................................................................ 7 2.4.3.1.3 作用機序 .................................................................................................................... 8 2.4.3.2 副次的薬理試験 ................................................................................................................. 9 2.4.3.3 安全性薬理試験 ................................................................................................................. 9 2.4.4 薬物動態試験 ......................................................................................................................... 10 2.4.4.1 分析法 ............................................................................................................................... 10 2.4.4.2 吸収 ................................................................................................................................... 10 2.4.4.3 分布，代謝及び排泄 ....................................................................................................... 10 2.4.4.4 薬物動態学的薬物相互作用 ........................................................................................... 11 2.4.4.5 その他の薬物動態試験 ................................................................................................... 11 2.4.5 毒性試験 ................................................................................................................................. 11 2.4.5.1 急性毒性 ........................................................................................................................... 11 2.4.5.2 反復投与毒性 ................................................................................................................... 12 2.4.5.3 遺伝毒性及びがん原性 ................................................................................................... 12 2.4.5.4 生殖発生毒性 ................................................................................................................... 13 2.4.5.4.1 胚・胎児発生に関する試験 .................................................................................. 13 2.4.5.5 局所刺激性 ....................................................................................................................... 13 2.4.5.6 その他の毒性 ................................................................................................................... 13 2.4.5.6.1 サル及びヒト正常組織の交差反応性 .................................................................. 13 2.4.5.6.2 サル及びヒトの溶血性及び血液適合性 .............................................................. 13 2.4.5.6.3 安全性薬理 .............................................................................................................. 14 2.4.5.7 動物からヒトへの外挿（曝露量のまとめ，臨床との関連性） ............................... 14 2.4.6 総括及び結論 ......................................................................................................................... 15 2.4.7 参考文献 ................................................................................................................................. 17 2.4 Page 4 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ非臨床試験の概括評価 2.4.1 緒言ペルツズマブ（遺伝子組換え）（以下，ペルツズマブ）は，米国 Genentech 社で見出された遺伝子組換えヒト化抗 HER2（human epidermal growth factor receptor type 2）IgG1κ モノクローナル抗体であり（2.3.S.1），HER2陽性転移・再発乳癌患者の初回治療を対象にトラスツズマブ及びドセタキセルとの併用で臨床第Ⅲ相試験が実施され，有効性及び忍容性が確認されている。ペルツズマブはトラスツズマブと共通の Fc 領域を有するが，両薬はそれぞれ異なるエピトープを認識する。ペルツズマブが HER2のダイマー形成に必須な領域であるドメイン II に結合するのに対し1)，トラスツズマブは膜近接部位のドメイン IV に結合する2)（図 2.4.1-1）。図 2.4.1-1 HER2細胞外領域におけるペルツズマブ及びトラスツズマブのエピトープ結合部位 Pertuzumab Trastuzumab I：ドメイン I，II：ドメイン II，III：ドメイン III，IV：ドメイン IV [文献1) Fig.6を基に作成] ペルツズマブは HER2のドメイン II に結合することにより，リガンド依存性の HER2/HER3 のダイマー形成，その下流シグナルである PI3K（phosphatidylinositol-3 kinase）-Akt 及び MAPK（mitogen-activated protein kinase）の両主要シグナル伝達経路を阻害し癌細胞の増殖を抑制するという特性を有する。一方，トラスツズマブは HER2のドメインⅣに結合しリガンド非依存性の HER2/HER3の相互作用を阻害するものの3)，リガンド依存性の HER2と HER3のダイマー形成を阻害しないことが報告されている3)。このように，ペルツズマブとトラスツズマブはそれぞれ異なる作用機序を有することから4),5)，両薬の併用により HER2シグナルを相加的又は相乗的に抑制することが期待される。 2.4.2 非臨床試験計画概略ペルツズマブに関する一連の非臨床試験はロシュ社（Genentech 社を含む）で実施され，今回の非臨床申請データパッケージはこれらの試験資料を基に構成した。以下に，非臨床試験の概略を示す。 2.4.2.1 薬理試験ペルツズマブの薬理学的特性，効力及びトラスツズマブとの違いを明らかにするために，in vitro 試験では，HER3のリガンドであるヘレグリン（HRG：heregulin）刺激による HER2/HER3 ダイマー形成に対する作用，HRG 依存性の HER2を介したシグナルに対する作用，細胞増殖抑制作用，及び抗体依存性細胞障害（ADCC：antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity）活性等について精査した。In vivo 試験では，ペルツズマブの効力を明らかにするために，各種ヒト癌細胞株及び癌患者由来組織移植モデルを用いて本薬単独投与時の腫瘍増殖抑制効果，トラ 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ Page 5 スツズマブ又は各種化学療法剤との併用効果を評価した。安全性薬理試験に関しては，交差反応性が確認されたカニクイザルを用いた反復投与毒性試験において，主要な生理的機能（中枢神経系，心血管系及び呼吸系）に及ぼす影響を評価した。 2.4.2.2 薬物動態試験ペルツズマブの薬物動態学的特性を評価するために，単回及び反復投与の薬物動態試験を実施した。単回投与試験は，薬理試験で使用した動物種である CD-1系マウスあるいは胸腺欠損ヌードマウス（以下マウス），及び毒性試験で選択した動物種であるカニクイザル（ヒト HER2に組織交差反応性を示す）を用いた。投与経路は臨床適用経路（静脈内投与）及び非臨床の薬理試験並びに毒性試験で用いた経路を考慮し，マウスでは静脈内及び腹腔内投与，ラット（Sprague-Dawley：SD，以下ラット）は静脈内投与，カニクイザルでは静脈内及び皮下投与により行った。反復投与の薬物動態は，カニクイザルを用いた7及び26週間反復投与毒性試験（週1回静脈内投与の TK 試験）の結果を用いて評価した。分布に関しては，ペルツズマブが遺伝子組換えヒト化 IgG1モノクローナル抗体であることを考慮し，放射性標識体を用いた一般的な分布試験は実施していない。このため，毒性試験において，ヒト及びカニクイザルの正常組織を用いた交差反応性試験を実施し，ペルツズマブの組織内分布特性を調べた。更に，妊娠19日のカニクイザルを用いた胚・胎児発生に関する静脈内投与試験において，母動物及び胎児の血清中ペルツズマブ濃度を測定し，本薬の胎児への移行性についても評価した。代謝及び排泄試験は，ペルツズマブが他のヒト化 IgG1モノクローナル抗体医薬と同じヒト IgG1フレームワークを有し，代謝及び排泄の経路は内因性 IgG と同様であると判断したことから実施していない。IgG は乳汁中に移行することが知られており，乳汁中排泄試験についても実施していない。なお，分布，代謝及び排泄試験の実施・評価に関する方針決定には，「バイオテクノロジー応用医薬品の非臨床における安全性評価」（ICH S6）を参考にした。また，及び変更に伴う臨床試験製剤間の薬物動態学的な比較，並びに他剤との薬物相互作用の有無を，ラットに単回静脈内投与を行い評価した。 2.4.2.3 毒性試験ペルツズマブの安全性を評価するため，反復投与毒性試験，生殖発生毒性試験，正常組織交差反応性試験，溶血性及び血液適合性試験を実施した。使用動物は，本薬の交差反応性がヒト組織と類似していること，ヒト HER2タンパクの細胞外ドメイン，及びサル ErbB2タンパクのアミノ酸配列が高い相同性を示すこと，及び in vitro 試験系におけるペルツズマブの結合親和性がヒトと類似していることが確認されたことからカニクイザルを選択した。毒性試験の投与経路は臨床適用経路と同じ静脈内投与を主に用いた。反復投与毒性試験及び生殖発生毒性試験では，本薬の曝露量を評価するために血清中薬物濃度の測定を行った。急性毒性は，反復投与毒性試験における高用量群の初回投与結果を用いて評価した。反復投与毒性試験は4週間，7週間及び26週間の反復静脈内投与試験，並びに4週間反復皮下投与試験を実施した。最長投与期間については，バイオ医薬品では一般的に6カ月の試験期間が適当と考えられていることから6カ月間（26週間）とした。本薬はバイオ医薬品であり，適応症は転移・再発乳癌であることから，遺伝毒性試験及びがん原性試験は実施しなかった。生殖発生毒性試験としては，胚・胎児発生に関する試験を実施し，雌雄の生殖能については，反復投与毒性試験における生殖器の病理組織学的検査結果を用いて評価した。出生前及び出生後の発生並びに母体の機能に関する試験は，転移・再発乳癌の適応症を考慮して実施しなかった。        Page 6 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ局所刺激性は，反復投与毒性試験における投与部位についての検討結果より評価した。以下に実施した主な非臨床毒性試験項目を示す。カニクイザル4週間（週2回投与）反復静脈内投与毒性試験（予備試験）カニクイザル7週間（週1回投与）反復静脈内投与毒性試験カニクイザル26週間（週1回投与）反復静脈内投与毒性試験カニクイザル4週間（週1回投与）反復皮下投与毒性試験カニクイザル胚・胎児発生に関する試験組織交差反応性試験（正常ヒト及びカニクイザル組織） In vitro の溶血性試験及び血液適合性試験（ヒト及びカニクイザルの血液・血清・血漿） GLP 及びガイドライン 2.4.2.4 非臨床試験は ICH ガイドラインに準じて，十分な科学的信頼性をもって実施した。また，予備試験を除く主な毒性試験（TK 試験を含む）は GLP 適合条件下で実施した。 2.4.3 薬理試験 2.4.3.1 効力を裏付ける試験ペルツズマブの薬理学的特性，効力及びトラスツズマブとの違いを各種 in vitro 及び in vivo 試験で検討した。その結果，ペルツズマブはトラスツズマブとは異なり HER3のリガンドである HRG 刺激による HER2/HER3ダイマー形成を阻害し，HRG 依存性の HER2を介するシグナルを阻害できること，ADCC 活性に関してはトラスツズマブと同様に強い ADCC 活性を有することが明らかとなった（表 2.4.3.1-1）。効力に関しては，ペルツズマブは単独投与で HER2 高発現及び低発現両癌細胞株並びに癌患者由来組織 xenograft モデルの腫瘍増殖を強く抑制し，またトラスツズマブ抵抗性株移植モデルにも効果を示した。更に HER2高発現株 xenograft モデルでは，本薬とトラスツズマブ又はタキサン系の薬剤等との併用により腫瘍増殖抑制効果の増強又は増強傾向が認められた。表 2.4.3.1-1 HRG 刺激による HER2/HER3ダイマー形成に対する作用ペルツズマブの薬理学的特性ペルツズマブ 100 nmol/L で HRG による HER2/HER3ダイマー形成を阻害 HRG 依存性の HER2を介するシグナルに対する作用 100又は200 nmol/L で HRG による PI3K-Akt 及び MAPK の活性化を阻害 ADCC 活性有り 2.4.3.1.1 トラスツズマブ 100 nmol/L で HRG による HER2/HER3ダイマー形成に対する阻害作用は観察されなかった 100又は200 nmol/L で HRG による PI3K-Akt 及び MAPK の活性化に対する阻害作用は観察されなかった有り In vitro 試験 (1) HER2に対する結合親和性スキャチャードプロット法でヒト及びサル HER2/ErbB2に対するペルツズマブの親和性を調べたところ，本薬のヒト及びサル HER2/ErbB2に対する Kd 値はそれぞれ0.80及び0.53 nmol/L と強い結合活性を示した。 (2) リガンド依存性の HER2/HER3ダイマー形成，HER2シグナル，及び細胞増殖に対する阻害作用 HRG は HER3又は HER4のリガンドであり，HRG 刺激により HER2/HER3及び HER2/HER4 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ Page 7 ダイマーが形成されることが知られている6)。HER2低発現ヒト乳癌株 MCF7において，ペルツズマブ100 nmol/L は HRG 刺激による HER2/HER3ダイマー形成を阻害した。一方，トラスツズマブ100 nmol/L には HER2/HER3ダイマー形成阻害作用はみられなかった。MCF7細胞を用いて HRG 刺激による HER2のリン酸化，及びその下流シグナルの PI3K-Akt 及び MAPK 経路に対する作用を調べた結果，ペルツズマブは HER2のリン酸化，PI3K-Akt 及び MAPK 両キナーゼの活性化を阻害した。一方，トラスツズマブにはいずれの阻害作用もみられなかった。これらの結果から，ペルツズマブは，トラスツズマブとは異なりリガンドによって活性化される HER2を介するシグナルを阻害できると推定された。ヒト乳癌株 MCF7，MDA-MB-134，T-47D 及び ZR-75-1を用いて細胞増殖抑制作用を調べたところ，ペルツズマブ300 nmol/L はいずれの細胞株においても HRG 刺激による細胞増殖を抑制した。 HRG で誘導される癌細胞株増殖に対するペルツズマブの抑制作用については上述の他にも公表論文があり7),8)，ヒト乳癌細胞株 MDA-MB-175においてペルツズマブは HRG 誘導性の増殖を抑制するのに対し，トラスツズマブの抑制作用は弱いことが示されている7)。一方，HRG で刺激していないヒト乳癌株 SK-BR-3では，トラスツズマブは増殖抑制作用を示すのに対し，ペルツズマブは抑制作用を示さないことが報告されている7)。HRG 依存性の細胞増殖を抑制するペルツズマブに対し，トラスツズマブは HRG 非依存性の増殖を抑制することから，両薬の併用により細胞増殖抑制効果が増強することが推定される。実際，ヒト乳癌株 BT474ではペルツズマブ/トラスツズマブの併用によりアポトーシスが増強することが報告されている9)。 (3) ADCC 活性エフェクター細胞としてヒト末梢血単核球，標的細胞として HER2高発現ヒト乳癌株 KPL-4 を用いて ADCC 活性を調べたところ，ペルツズマブはトラスツズマブと同様に強い ADCC 活性を示した。 2.4.3.1.2 In vivo 試験 (1) 単独投与による腫瘍増殖抑制効果 HER2高発現（HER2(3+)* ）のヒト乳癌株 BT474JB 及び非小細胞肺癌（NSCLC：non-smallcell lung cancer ）株 Calu-3 ，又は HER2 低発現（ HER2(1+)* ）のヒト乳癌患者由来組織 MAXF449及び NSCLC 株 NCI-H522 xenograft モデルにペルツズマブを初回0.8 mg/kg/週，その後0.4 mg/kg/週（以下，0.8/0.4 mg/kg）～120/60 mg/kg の用量範囲で単独投与したところ，これら4株すべてで腫瘍増殖抑制率（TGI：tumor growth inhibition rate）が約80%以上の強い抑制効果が認められ，その時のトラフ濃度は5～25 μg/mL であった。国際共同第Ⅲ相臨床試験（CLEOPATRA 試験）（2.7.2.2.7）で得られたトラフ濃度63.6 μg/mL は本試験でのトラフ濃度5 ～25 μg/mL を上回っており，本薬は臨床で十分な効果を示していると考えられた。 BT474JB xenograft モデルにペルツズマブ又はトラスツズマブを同じ用量及び同じスケジュールで投与し両薬の効力を比較したところ，両薬は同等の腫瘍増殖抑制効果を示した。トラスツズマブ抵抗性株 Founder 2-134R 移植モデルでも，ペルツズマブの単独投与により TGI 50%以上の抑制効果がみられ，TGI が約50%を示した時のトラフ値は50 μg/mL 以上であった。また，ヒト癌患者由来癌組織 MAXF449を含む総数28種類の xenograft モデルにペルツズマブを単独投与した場合にも，MAXF449を含む6種類に腫瘍増殖抑制効果がみられた。 * 免疫組織化学染色法で評価。 (2) トラスツズマブ又はタキサン系薬剤パクリタキセルとの併用による腫瘍増殖抑制効果の増強 HER2高発現ヒト乳癌株 KPL-4 xenograft モデル（同所性移植）にペルツズマブ/トラスツズマブを併用投与したところ投与開始後の初期から腫瘍の縮小及び消失を伴う強い腫瘍増殖抑制効果の増強が認められた。HER2高発現 NSCLC 株 Calu-3 xenograft モデルでもペルツズマブ/トラ 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ Page 8 スツズマブを併用投与した時に腫瘍の縮小を伴う顕著な腫瘍増殖抑制効果の増強がみられた。また，Calu-3 xenograft モデルでは，ペルツズマブ/パクリタキセルの併用投与で腫瘍増殖抑制効果の増強傾向が観察された。 (3) パクリタキセル以外の各種化学療法剤との併用による腫瘍増殖抑制効果の増強ヒト NSCLC 株 QG-56 ， Calu-3 ，卵巣癌株 IGROV-1 ，及びヒト卵巣癌患者由来癌組織 OVXF550の4種類の xenograft モデルにペルツズマブ/ゲムシタビンを併用投与したところ，腫瘍増殖抑制効果の増強傾向が観察された。ヒト乳癌患者由来癌組織 MAXF583，MAXF574，及びヒト大腸癌患者由来癌組織 CXF264の3種類の xenograft モデルにペルツズマブ/カペシタビンを併用投与したところ，CXF264を除く2種類にカペシタビン単独投与に比べて腫瘍増殖抑制効果の増強又は増強傾向がみられた。Calu-3 xenograft モデルにペルツズマブ/シスプラチン，ペルツズマブ/エルロチニブ又はペルツズマブ/イリノテカンの組み合わせで併用投与したところ，すべての併用群で腫瘍増殖抑制効果の増強傾向が観察された。 2.4.3.1.3 作用機序 EGFR，HER2，HER3及び HER4の HER ファミリーは癌細胞の増殖に関与しており10),11)，癌細胞ではこれら HER ファミリーの過剰発現が報告されている 10) 。乳癌細胞では15～30%に HER2の過剰発現が観察され10)，現在ヒト化 HER2モノクローナル抗体であるトラスツズマブが乳癌治療薬として幅広く使用されている。一連の in vitro 試験結果からペルツズマブは，1) トラスツズマブと同様に HER2に対して高親和性を示す（2.4.3.1.1(1)），2) トラスツズマブとは異なりリガンド（HRG）依存性の HER2シグナルを阻害する（2.4.3.1.1(2)），3) トラスツズマブと同等の ADCC 活性を有する（2.4.3.1.1(3)）ことが明らかとなった。以上の試験結果，及びペルツズマブ又はトラスツズマブとヒト HER2との結合に関する X 線結晶解析の論文知見1),2)から，ペルツズマブの作用機序及びトラスツズマブとの違いは以下のように推定される。 1) HRG 刺激により HER2を介したシグナル伝達が亢進する。その結果 PI3K-Akt・MAPK が活性化され，腫瘍増殖やアポトーシスの抑制が引き起こされる（図 2.4.3.1.3-1A）。 2) ペルツズマブ及びトラスツズマブはともに HER2に対して高親和性を示す。しかし両薬のエピトープは異なり，ペルツズマブが HER2ダイマー形成に必須な領域であるドメイン II に結合するのに対し，トラスツズマブは HER2の膜近接部位のドメイン IV に結合する1),2)。 3) ペルツズマブは HRG による HER2/HER3のダイマー形成を阻害し，その結果 HER2及び HER3のリン酸化11)，並びにその下流シグナルである PI3K-Akt・MAPK の活性化を阻害する（図 2.4.3.1.3-1B）。一方，トラスツズマブは HRG 刺激による HER2シグナルを阻害できない。ペルツズマブは HER2のダイマー形成領域に結合することから，HER2/HER3ヘテロダイマーに加えて HER2と他の HER ファミリーとのヘテロダイマー形成〔HER2/EGFR （epidermal growth factor receptor），HER2/HER4〕も阻害すると考えられる。 4) ペルツズマブは，トラスツズマブと同等の強い ADCC 活性を有する。 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ図 2.4.3.1.3-1 Page 9 ペルツズマブの作用機序 A）HRG 依存性の HER2シグナル伝達経路，3: HER3，2: HER2，K: チロシンキナーゼ。B）ペルツズマブの HER2/HER3ダイマー形成，及びその下流シグナル PI3K-Akt・MAPK に対する阻害作用，2C4：ペルツズマブ。 HER3の K 領域は欠損している。また，HER2のリガンドは現時点では同定されていない。 [文献12) Fig.1を基に作成] 以上，ペルツズマブはリガンド依存性の HER2/HER3，HER2/EGFR，及び HER2/HER4のヘテロダイマー形成を阻害することで，HER2シグナル伝達を阻害すると推定される。実際， HER3のリガンドである HRG 依存性ヒト乳癌株 MDA-MB-175 xenograft モデルにおいて，ペルツズマブは腫瘍増殖を強く抑制するのに対し，トラスツズマブは増殖抑制効果を示さないとの試験結果が報告されている13)。一方，トラスツズマブはリガンド依存性のダイマー形成を阻害しないものの，リガンド非依存性の HER2/HER3の相互作用3)，及び HER2シグナルの異常な活性化に寄与すると考えられている HER2の細胞外領域断片の遊離（Shedding）を阻害する作用があることが報告されている14)。このように，ペルツズマブとトラスツズマブは異なる作用機序を有することから，両薬の併用により抗腫瘍効果が増強することが期待される。 2.4.3.2 副次的薬理試験該当なし。 2.4.3.3 安全性薬理試験ペルツズマブの安全性薬理試験は，2.4.5.6.3安全性薬理を参照。 2.4.4 Page 10 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ薬物動態試験 2.4.4.1 分析法サンドイッチ型酵素免疫測定法（サンドイッチ ELISA 法）を開発し，マウス，ラット及びカニクイザル血清中（カニクイザルは胎児血清中を含む）のペルツズマブ濃度測定用にバリデートした。また，カニクイザル血清中の抗ペルツズマブ抗体測定用にブリッジング型酵素免疫測定法（ブリッジング ELISA 法）を開発し，バリデートした。 2.4.4.2 吸収ペルツズマブを単回投与したときの薬物動態をマウス（3～90 mg/kg 静脈内，30 mg/kg 腹腔内），ラット（3～90 mg/kg 静脈内）及びカニクイザル（15～150 mg/kg 静脈内，50 mg/kg 皮下）を用いて評価した（表 2.4.4.2-1）。各動物種とも静脈内投与後の血清中ペルツズマブは2 相性の消失を示し，消失相の半減期（t1/2）は約10日であった。中央コンパートメントの分布容積（Vc）は30～60 mL/kg と各動物種の血清容量とほぼ同じ15)であり，定常状態での分布容積（Vss）は70～150 mL/kg であった。これらの薬物動態学的特性はトラスツズマブで得られている結果とほぼ同じであった。カニクイザルに単回静脈内投与後のクリアランス（CL）は15 ～150 mg/kg の投与量範囲で4.98～5.24 mL/day/kg とほぼ一定であった。マウス腹腔内投与及びカニクイザル皮下投与時の生物学的利用率（F）は，それぞれ91.3及び81.5%であった。表 2.4.4.2-1 ペルツズマブを単回静脈内投与したときの動物種間での主な薬物動態パラメータ動物種マウス a) ラット b) カニクイザル c) 用量範囲 (mg/kg) 3～90 3～90 15～150 CL (mL/day/kg) 5.58～9.23 7.24～10.1 4.98～5.24 Vc (mL/kg) 44.6～57.9 27.4～44.0 30.9～37.4 t1/2 (day) 11.4～15.7 8.92～9.22 9.89～10.4 a)：資料番号4.2.2.2-1 Table 2より抜粋 b)：資料番号4.2.2.2-2 Table 2より抜粋 c)：資料番号4.2.2.2-3 Table 2より抜粋カニクイザルにペルツズマブ15，50及び150 mg/kg を7及び26週間反復静脈内投与（週1回）したときの薬物動態を評価した。26週間試験において血清中ペルツズマブ濃度はいずれの投与量においても，投与開始後1～2カ月で定常状態に達した。AUC は7及び26週間投与のいずれの場合にも用量の増加に伴い増加したが，150 mg/kg 投与群の値は15 mg/kg 投与群に対して用量増加比をやや下回った。CL は150 mg/kg 投与群では他の投与群に比較して大きかった。血清中抗ペルツズマブ抗体は試験期間を通して検出されなかった。 2.4.4.3 分布，代謝及び排泄 2.4.2.2に記載した理由により定型的な分布，代謝及び排泄試験は実施していないが，本薬の組織内分布特性を評価するため，カニクイザル及びヒト正常組織を用いたペルツズマブの交差反応性試験を実施した（2.4.5.6.1）。その結果，いずれの種においても交差反応が認められた組織は，被毛皮膚，胎盤，乳腺，尿管等であった。これらはいずれも HER2/ErbB2発現が予想される組織16)であり，ペルツズマブは生体内で主に HER2/ErbB2発現組織に分布すると考えられた。妊娠19日のカニクイザルを用いた胚・胎児発生に関する試験（2.4.5.4.1）において本薬の胎児移行性を評価した。本薬を初回用量として30, 100及び150 mg/kg，その後維持用量として10, 33.3及び100 mg/kg を週2回（GD26, 29, 33, 36, 40, 43, 47及び50）反復静脈内投与したとき，胎児血清中にペルツズマブが検出され，本薬の胎児への移行性が確認された。母動物血清中濃度 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ Page 11 に対する胎児血清中濃度比は，いずれの投与量においても類似しており，それぞれ0.294， 0.399及び0.338であった。 2.4.4.4 薬物動態学的薬物相互作用臨床で併用するトラスツズマブ及びドセタキセルとの薬物相互作用試験は非臨床においては実施していないが，本薬と同じヒト IgG1のフレームワークを有するベバシズマブを併用したときの薬物動態学的薬物相互作用試験をラットを用いて行った。ラットにペルツズマブ及びベバシズマブのそれぞれ30 mg/kg を単独又は併用で単回静脈内投与したとき，両抗体薬の薬物動態はいずれも併用投与による変化は認められなかった。臨床試験においてはペルツズマブ，トラスツズマブ及びドセタキセルの3剤を併用したときの相互作用の有無を評価しており，これらの薬剤間での薬物動態学的薬物相互作用は認められていない（2.7.2.3.3参照）。 2.4.4.5 その他の薬物動態試験ヌードマウスを用いて HER2が発現したマウス由来腫瘍（Founder 2-134R）を移植した個体（担癌マウス）及び移植していない個体（非担癌マウス）にペルツズマブを単回静脈内投与したときの薬物動態を評価した。本薬 3又は30 mg/kg 投与時の CL は，非担癌マウスがそれぞれ 4.62又は5.24 mL/day/kg であったのに対して，担癌マウスではそれぞれ17.8又は16.0 mL/day/kg と大きかった。この結果より，主として腫瘍細胞上に発現した HER2及び shed ECD へのペルツズマブの結合を介した抗原依存性の消失が考えられた。その他の要因として，する可能性が推定される。本薬の臨床開発の過程で及びの変更が行われたことから，ラットを用いて3つの薬物動態比較試験を実施したところ，いずれの試験においても各製剤間に薬物動態学的な差のないことが確認された。 2.4.5 2.4.5.1 毒性試験急性毒性ペルツズマブの急性毒性試験は実施せず，反復投与毒性試験（週1回投与）における高用量群の初回投与結果より急性毒性を評価した。雌雄カニクイザルを用いた反復静脈内投与毒性試験（表 2.4.5.2-1参照）において，初回投与後に死亡例は認められなかった。7週間静脈内投与試験の初回投与後に，下痢が高用量群（150 mg/kg）の雌2例に認められたが，その他，投薬に関連すると考えられる特記すべき所見は認められず，本薬の150 mg/kg までの静脈内投与は良好な忍容性を示した。 2.4.5.2 Page 12 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ反復投与毒性ペルツズマブの反復投与毒性を評価するために，カニクイザルを用いて4週間（予備試験）， 7週間及び26週間反復静脈内投与試験，並びに4週間反復皮下投与試験を実施した。表 2.4.5.2-1 動物種投与期間カニクイザル 4週間：（雌雄）週2回投与カニクイザル 7週間：（雌雄）週1回投与カニクイザル 26週間：（雌雄）週1回投与カニクイザル 4週間：（雌）週1回投与 a: mM 回復期間反復投与毒性試験一覧表投与経路設定なし静脈内溶媒 GLP 適合用量（mg/kg）非適合 10, 50, 100 溶媒 a a 適合 15, 50, 150 予備試験 (pH 4週間静脈内溶媒 8週間静脈内溶媒 a 適合 15, 50, 150 設定なし皮下溶媒 a 適合 250 )， mM ， % カニクイザル4週間及び7週間静脈内投与試験，並びに4週間皮下投与試験においては，死亡例は認められず忍容性は良好であった。カニクイザル26週間静脈内投与試験では，頻繁な下痢による脱水症状に起因すると考えられる一般状態の悪化により，50 mg/kg 群の雌1例を安楽死させた。カニクイザル7週間及び26週間静脈内投与毒性試験において，対照群も含めて下痢が散見され，投薬群では発現率が増加した。7週間試験では，下痢は重篤ではなく脱水に至らず，体重や臨床検査パラメータに影響はみられなかった。26週間試験では，下痢は対照群よりも投薬群で発現頻度が高かったものの，用量依存的ではなかった。頻繁な下痢により脱水症状を呈した 50 mg/kg の雌1例は，脱水症状の二次的な影響により一般状態が悪化したため安楽死させたものの，他の投与群の結果も含めて評価すると，忍容性はおおむね良好であった。脱水症状に起因すると考えられる腎機能の低下（血中尿素窒素の軽度増加）を除いては，投薬に関連すると考えられる特記すべき所見は認められなかった。いずれの試験においても，腸管粘膜に病理組織学的な異常を示す所見は観察されなかった。下痢は4週間又は8週間の休薬期間に，回復又は回復傾向が認められた。ペルツズマブによる下痢の発現メカニズムは十分には解明されてはいない。EGF は EGFR に作用し腸管上皮細胞における Ca 依存性の塩素イオン分泌に対して抑制的に作用することが報告されており，また，塩素イオン分泌は腸管内容液分泌における主要機構であり，腸管内の水分バランスの維持に重要な役割を果たしている17),18)。腸管の正常な塩素イオンバランスの破綻は，腸管上皮組織に障害がみられていなくても，機能的に下痢を引き起こすことになると考えられる。したがって，ペルツズマブ反復投与毒性試験でみられた下痢の発現は，ペルツズマブによる EGFR/HER2ヘテロダイマー形成阻害を介した EGFR 経路の抑制が関係している可能性が示唆される。 2.4.5.3 遺伝毒性及びがん原性ペルツズマブはバイオ医薬品であり，適応症は転移・再発乳癌であることから，「バイオテクノロジー応用医薬品の非臨床における安全性評価」（ICH S6）及び「抗悪性腫瘍薬の非臨床評価に関するガイドライン」（ICH S9）に基づき，in vitro 及び in vivo の遺伝毒性試験並びにがん原性試験は実施していない。 2.4.5.4 Page 13 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ生殖発生毒性ペルツズマブはバイオ医薬品であり薬理作用を示す動物種はサルのみであること，及び適応症は転移・再発乳癌であることから，ICH S6及び ICH S9を考慮し，生殖発生毒性試験としてはカニクイザルを用いた胚及び胎児発生に関する試験のみを実施した。受胎能に対する影響については，カニクイザルを用いた反復投与毒性試験における生殖器の病理組織学的検査結果により評価した。26週間までの反復投与試験では，生殖器の病理組織学的検査に変化は認められなかった。 2.4.5.4.1 胚・胎児発生に関する試験ペルツズマブのカニクイザルを用いた胚・胎児発生に関する試験において，流産，胚・胎児死亡が全投薬群で用量依存的に認められた。これらの死亡は妊娠25-70日目に生じた。更に羊水量減少（羊水過少症）がみられ，胎児の病理組織学的検査により腎臓の発育遅延（腎形成不全），及び胎児の外形・内臓・骨格異常が観察された。これらの所見から，本試験でみられた流産，胚・胎児死亡及び胎児の異常は，本薬が腎臓の発育分化に影響を及ぼして腎臓の形成不全を引き起こし，胎児腎臓により生成される羊水量が減少し，胚・胎児死亡及び胎児の外形・内臓・骨格異常を誘導する羊水過少症によるものと考えられた。トラスツズマブはカニクイザル胚・胎児発生に関する試験において，胚・胎児への影響は観察されていないが，市販後の症例報告で妊娠中の投与は羊水過少症のリスクがあり，胎児及び新生児の毒性と関連していることが報告されている。ペルツズマブ及びトラスツズマブで観察された胚・胎児毒性は，HER2ファミリーの外胚葉/上皮組織（腎臓など）の発育・分化における役割と一致している16),19)。表 2.4.5.4.1-1 動物種投与期間カニクイザル器官形成期：胚及び胎児発生に関する試験投与経路静脈内溶媒溶媒 a 初回用量を妊娠19日， GLP 適合用量（mg/kg）適合初回用量：30, 100, 150 維持用量：10, 33.3, 100 維持用量を週2回（妊娠26, 29, 33, 36, 40, 43, 47, 50日）投与 a: 20 mM 酢酸-L-ヒスチジン(pH 6.0)，120 mM ショ糖，0.02%ポリソルベート20 2.4.5.5 局所刺激性ペルツズマブの局所刺激性は，本薬を静脈内及び皮下投与したカニクイザルの反復投与毒性試験で評価した結果，投与部位に薬物に関連した肉眼的（静脈内及び皮下）及び病理組織学的（静脈内）変化は認められなかった。 2.4.5.6 その他の毒性 2.4.5.6.1 サル及びヒト正常組織の交差反応性ペルツズマブの交差反応性試験は，カニクイザル及びヒト正常組織を用いて実施した。交差反応はヒト正常組織では被毛皮膚，胎盤，上皮小体，扁桃，乳腺，尿管，膀胱，腎組織等で確認され，この交差反応パターンは，上記の組織で予想される HER2発現16)と一致した。カニクイザル正常組織では，交差反応は被毛皮膚，乳腺，胎盤，尿管，腎組織等で認められた。このように，ペルツズマブはヒト及びサルの正常組織に対して，類似の交差反応性を示した。 2.4.5.6.2 サル及びヒトの溶血性及び血液適合性ペルツズマブは21.6 mg/mL の濃度まで，カニクイザルやヒトの赤血球に対して溶血を起こさ 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ Page 14 ず，カニクイザルとヒトの血清及び血漿に対し，凝固・沈殿作用を示さなかったことから，適合性が確認された。 2.4.5.6.3 安全性薬理ペルツズマブの安全性薬理試験は，ペルツズマブが高度に標的化されたバイオテクノロジー応用製品であるため，交差反応性が確認されたカニクイザルを用いた反復投与毒性試験において，主要な生理的機能（中枢神経系，心血管系及び呼吸系）に及ぼす影響を評価した。7週間及び26週間反復投与試験において，一般状態・行動，体温，血圧及び呼吸数に対する影響は認められなかった。ペルツズマブのカニクイザルを用いた反復投与毒性試験において，心毒性を精査するために，テレメトリー法による心電図・心拍数・血圧，血清中トロポニン T，クレアチンキナーゼのアイソザイムの測定等を行った。これらの検査項目において，実施した高用量群の150 mg/kg まで心毒性を示唆する結果はみられなかった。トラスツズマブにおいても，非臨床のカニクイザル安全性薬理試験において心血管系に異常は認められていないが，特にアントラサイクリンとの併用患者において，左室駆出率（Left ventricular ejection fraction，以下 LVEF）減少の心毒性が報告されている20),21)。非臨床探索試験の in vitro 培養細胞及び遺伝子改変マウスモデルから得られた知見より22)–24)，抗 HER2治療薬は直接的な心毒性があるというよりも，損傷を受けた心臓に対して，HER2シグナル伝達経路による心臓保護機能（心筋の生存性及び障害の修復）を阻害すると推察される。 2.4.5.7 動物からヒトへの外挿（曝露量のまとめ，臨床との関連性）カニクイザルの反復投与毒性試験及び胚・胎児発生に関する試験における毒性発現用量での血清中 Cmax 及び Ctrough と，ヒトにおける臨床推奨用量（初回用量14 mg/kg，維持用量7 mg/kg）での曝露量との関連性を表 2.4.5.7-1に示した。カニクイザル26週間反復投与毒性試験では，臨床推奨用量の約2倍の用量である15 mg/kg から高用量の150 mg/kg までいずれの用量においても下痢が発現し，下痢の発現に対する曝露量比は Cmax で4倍，Ctrough で6倍であった。しかしながら，非臨床試験では腸管に病理組織学的な変化はみられなかった。また，心毒性を含めた他の毒性は認められず，全般的な忍容性は高用量群の150 mg/kg まで良好であった。本用量は臨床推奨用量の約20倍であり，曝露量比は Cmax で27倍，Ctrough で26倍である。カニクイザル胚・胎児発生に関する試験では低用量群の10[30] mg/kg（維持用量 [初回用量]）においても羊水過少症が観察され，本用量は臨床推奨用量の約2倍，曝露量比（Cmax）で3倍であった。羊水過少症の無毒性量は求められていないこと，類薬トラスツズマブでは市販後に胎児の致死的な肺形成不全を伴う羊水過少症が報告されていること，及びヒトでの妊娠中の投与に関する安全性は確認されていないことから，妊婦等に対して注意が必要である。表 2.4.5.7-1 ペルツズマブの曝露量比較（動物及びヒト）動物種試験の種類（検査日） {資料番号} 用量又は維持用量 [初回用量] (mg/kg) カニクイザル 26週間 (1回/週)，静脈内，(Day 182) {4.2.3.2-4} カニクイザル生殖発生，静脈内 (GD50)c) {4.2.3.5.2-1} ¢15 ¢50 ¢150 ¢10[30] ¢33.3[100] ¢100[150] 臨床推奨用量 420[840] mg 連投 (1回/3週)，静脈内 (7[14] mg/kg)d) {CLEOPATRA PK substudy}e) —: 未測定 ¢: 毒性発現用量 a) b) c) d) e) 2.4.6 Page 15 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ血清中 Cmax 血清中 Ctrough 曝露量比 b) 雄雌又は母動物 Ctrough (μg/mL)a) 曝露量比 b) 789 ± 90.1 2830 ± 318 5630 ± 787 3.7 13.3 26.6 340 ± 86.8 993 ± 373 1610 ± 599 5.5 15.9 25.8 644 ± 137 2030 ± 344 5360 ± 908 3.0 9.6 25.3 — — 雄雌又は母動物 Cmax (μg/mL)a) 212 62.3 Mean ± SD 曝露量比 = 動物曝露量 (μg/mL)/ヒト曝露量 (μg/mL) 投与後30分に採血体重60 kg で換算日本人を含む国際共同第Ⅲ相臨床試験 PK sub-study 総括及び結論ペルツズマブは，トラスツズマブと同様に HER2を標的とするヒト化モノクローナル抗体である。今回実施した一連の薬理試験及び論文知見から，ペルツズマブはトラスツズマブと異なるエピトープを認識すること1),2)，トラスツズマブとは異なりリガンド依存性の HER2/HER3のダイマー形成，HER2のリン酸化，及び PI3K-Akt・MAPK の活性化を阻害できることが明らかとなった。一方，トラスツズマブは，ペルツズマブと異なりリガンド非依存性の HER2/HER3 の相互作用3)，及び HER2シグナルの異常な活性化に寄与すると考えられている Shedding に対し強い阻害作用を示すことが報告されている14)。したがって，作用機序の異なるペルツズマブ /トラスツズマブの併用投与により抗腫瘍効果の更なる増強が期待される。また，ペルツズマブとトラスツズマブは共通の Fc 領域を有しており，両薬はともに強い ADCC 活性を示した。 HER2高発現ヒト乳癌株 KPL-4及び NSCLC 株 Calu-3 xenograft モデルではペルツズマブ/トラスツズマブの併用により腫瘍の縮小を伴う強い腫瘍増殖抑制効果の増強が認められ，Calu-3 xenograft モデル等ではパクリタキセル又はゲムシタビン等の他の化学療法剤との併用で腫瘍増殖抑制効果の増強傾向が観察された。これらの結果は，HER2高発現株においてペルツズマブ/トラスツズマブ併用に他の化学療法剤を併用することにより抗腫瘍効果が増強することを示唆している。ペルツズマブをマウス，ラット及びカニクイザルに単回静脈内投与したとき，血清中ペルツズマブは二相性の消失を示した。t1/2は約10日であり，Vc は小さく各動物種の血清容量にほぼ等しかった15)。これらの薬物動態学的特性は，同じヒト IgG1フレームワークを有するトラスツズマブで得られている成績とほぼ同様であった。カニクイザルに本薬を単回静脈内投与したときの CL は15～150 mg/kg の投与範囲でほぼ一定であった。カニクイザルに皮下投与あるいはマウスに腹腔内投与した際の F はそれぞれ約80%あるいは90%であった。カニクイザルに本薬15～150 mg/kg を週1回7又は26週間反復投与したとき，本薬の血清中 AUC は投与量の増加に伴い増加したが，7及び26週間投与のいずれの場合にも150 mg/kg 投与群の値は15 mg/kg 投パージェタ 2.4 非臨床試験の概括評価 Page 16 与群に対して用量増加比をやや下回った。CL は150 mg/kg 投与群では他の用量に比べて大きかった。いずれの反復投与試験においても試験期間中に血清中抗ペルツズマブ抗体は検出されなかった。ペルツズマブの交差反応性をカニクイザル及びヒト正常組織を用いて評価した結果，細胞表面に陽性反応が認められた組織は被毛皮膚，胎盤，乳腺，尿管等であり，いずれも HER2/ErbB2発現が予想される組織 16)であり，その他の組織への移行性はないものと考えられた。ヒト乳癌又は NSCLC 腫瘍を移植したヌードマウスにペルツズマブを週1回静脈内又は腹腔内投与（0.4～60 mg/kg）を行った薬効薬理試験の結果，これらのモデルでは，定常状態のトラフ濃度 5～25 μg/mL で80%以上の腫瘍増殖抑制効果が得られ，臨床用量の設定に利用した（2.7.2.3.4参照）。海外臨床第Ⅰb 以降の試験において，臨床用法・用量である420 mg（初回用量840 mg）を3週に1回投与した際の血清中ペルツズマブのトラフ濃度は，大半の患者で目標血清中薬物濃度20 μg/mL を超え，用量設定の妥当性が裏付けられた（2.7.2.3.4参照）。本薬の臨床開発中に及びの変更が行われたが，ラットを用いた比較試験の結果，各臨床開発段階で使用した製剤間に薬物動態学的な違いは認められなかった。一般毒性試験はペルツズマブとの交差反応性が確認されたカニクイザルを用いて行った。急性毒性試験は実施していないが，反復投与毒性試験の初回投与結果より評価した。静脈内投与では最高用量の150 mg/kg まで死亡はみられず，下痢の発現を除いては特記すべき所見はなく，忍容性は良好であった。カニクイザルを用いて7週間静脈内投与試験（週1回投与；4週間の回復期間）及び26週間静脈内投与試験（週1回投与；8週間の回復期間）を実施した。26週間試験では頻繁な下痢による脱水症状に起因すると考えられる状態悪化により50 mg/kg 群の雌1例を安楽死させたが，いずれの試験においても忍容性は高用量の150 mg/kg（曝露量比で26倍）まで概ね良好であった。7 週間及び26週間静脈内投与試験でみられた主な毒性は下痢であったが，腸管に病理組織学的変化は認められず，休薬後には回復又は回復傾向が認められた。しかしながら，臨床では重症度は低いものの，下痢はペルツズマブ投与に伴い高頻度に発現する事象であるため，添付文書ではその他の副作用に記載をし，注意喚起することとした。投与部位の病理組織学的検査では投薬に関連した変化は観察されなかった。ヒト及びサルの血液を用いた溶血性・適合性試験において，本薬21.6 mg/mL の濃度まで，カニクイザル及びヒトの赤血球に対して溶血を起こさず，また，カニクイザル及びヒトの血清及び血漿との適合性が確認された。ペルツズマブの安全性薬理を，カニクイザルの反復投与毒性試験の結果より評価した。その結果，中枢神経系（一般状態・行動，体温など），心血管系（心電図，血圧など）及び呼吸系（呼吸数）に対する作用は認められなかった。また，本薬の7週間及び26週間静脈内投与毒性試験では心臓に対する作用を精査したが，影響は認められなかった。一方，トラスツマブでは非臨床試験において心血管系に影響は認められなかったものの，臨床で心毒性が報告されていることから，ペルツズマブのヒトにおけるリスクについて臨床試験において検討した結果，本薬の併用による発現率の上昇や重篤化は認められなかった（2.5.5.3(2)参照）。しかしながら， LVEF が低下している患者等においては心障害が懸念されるため，添付文書の慎重投与及び重要な基本的注意において注意喚起を行うこととした。カニクイザル胚・胎児発生に関する試験では，胚・胎児死亡，羊水量減少（羊水過少症），及び胎児の腎形成不全が，いずれの用量でも観察されたため，無毒性量は求められておらず，安全係数は3倍より下である。本試験においては，胎児血清中にペルツズマブが検出され，本薬の胎児への移行性が確認された。本薬の乳汁移行試験は実施していないが，IgG は乳汁中に移行することが知られており，ペルツズマブも乳汁中に移行する可能性が考えられる。更に，ヒトでの妊娠中及び授乳中の投与に関する安全性は確認されていないことから，添付文書の妊 2.4 非臨床試験の概括評価パージェタ Page 17 産婦，授乳婦の項に注意喚起を行う。以上，ペルツズマブはトラスツズマブと異なる作用機序で抗腫瘍効果を発揮すると同時にトラスツズマブに匹敵する ADCC 活性を示した。ペルツズマブとトラスツズマブの併用では著しい腫瘍増殖抑制効果の増強が認められた。また，Calu-3 xenograft モデル等では本薬とパクリタキセル又はゲムシタビン等の他の化学療法剤との併用で腫瘍増殖抑制効果の増強傾向が観察された。薬物動態学的には同じヒト IgG1フレームワークを有するトラスツズマブの特性とほぼ同様であり，安全性の面では下痢及び羊水過少症がみられたが，本薬の推奨用法・用量において治療上の有益性に対して問題となる副作用は，臨床で注意喚起することにより管理可能であると考えられた。これらのことから，ペルツズマブとトラスツズマブの併用に他の化学療法剤を加えることで更なる効力の増強が期待でき，HER2陽性手術不能又は再発乳癌に対して有効性に優れ，かつ忍容性のある新たな治療法になり得ると考えられる。 2.4.7 1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) 8) 9) 10) 11) 12) 13) 14) 参考文献 Franklin MC, Carey KD, Vajdos FF, Leahy DJ, de Vos AM, Sliwkowski MX. Insights into ErbB signaling from the structure of the ErbB2-pertuzumab complex. Cancer Cell 2004;5:317-28. Cho HS, Mason K, Ramyar KX, Stanley AM, Gabelli SB, Denney DW Jr, et al. Structure of the extracellular region of HER2 alone and in complex with the Herceptin Fab. Nature 2003;421:756-60. Junttila TT, Akita RW, Parsons K, Fields C, Lewis Phillips GD, Friedman LS, et al. Ligandindependent HER2/HER3/PI3K complex is disrupted by trastuzumab and is effectively inhibited by the PI3K inhibitor GDC-0941. Cancer Cell 2009;15:429-40. Lewis GD, Lofgren JA, McMurtrey AE, Nuijens A, Fendly BM, Bauer KD, et al. Growth regulation of human breast and ovarian tumor cells by heregulin: evidence for the requirement of ErbB2 as a critical component in mediating heregulin responsiveness. Cancer Res 1996;56:1457-65. Baselga J, Swain SM. Novel anticancer targets: revisiting ERBB2 and discovering ERBB3. Nat Rev Cancer 2009;9:463-75. Fitzpatrick VD, Pisacane PI, Vandlen RL, Sliwkoski MX. Formation of a high affinity heregulin binding site using the soluble extracellular domains of ErbB2 with ErbB3 or ErbB4. FEBS Lett 1998;431:102-6. Schaefer G, Fitzpatrick VD, Sliwkowski MX. γ-Heregulin: a novel heregulin isoform that is an autocrine growth factor for the human breast cancer cell line, MDA-MB-175. Oncogene 1997;15:1385-94. Mann M, Sheng H, Shao J, Williams CS, Pisacane PI, Sliwkowski MX, et al. Targeting cyclooxygenase 2 and HER-2/neu pathways inhibits colorectal carcinoma growth. Gastroenterology 2001;120:1713-9. Nahta R, Hung MC, Esteva FJ. The HER-2-targeting antibodies trastuzumab and pertuzumab synergistically inhibit the survival of breast cancer cells. Cancer Res 2004;64:2343-6. Yarden Y, Sliwkowski MX. Untangling the ErbB signalling network. Nat Rev Mol Cell Biol 2001;2:127-37. Hynes NE, Lane HA. ErbB receptors and cancer: the complexity of targeted inhibitors. Nat Rev Cancer 2005;5:341-54. Baselga J. A new anti-ErbB2 strategy in the treatment of cancer: prevention of ligand-dependent ErbB2 receptor heterodimerization. Cancer cell 2002;2:93-5. Lee-Hoeflich ST, Crocker L, Yao E, Pham T, Munroe X, Hoeflich KP, et al. A central role for HER3 in HER2-amplified breast cancer: implications for targeted therapy. Cancer Res 2008;68:5878-87. Molina MA, Codony-Servat J, Albanell J, Rojo F, Arribas J, Baselga J. Trastuzumab (herceptin), a humanized anti-Her2 receptor monoclonal antibody, inhibits basal and activated Her2 ectodomain パージェタ 15) 16) 17) 18) 19) 20) 21) 22) 23) 24) 2.4 非臨床試験の概括評価 Page 18 cleavage in breast cancer cells. Cancer Res 2001;61:4744-9. Brian D, Tim M. Physiological parameters in laboratory animals and humans. Pharm Res 1993;10:1093-5. Press M, Cordon-Cardo C, Slamon DJ. Expression of the HER-2/neu proto-oncogene in normal human adult and fetal tissues. Oncogene 1990;5:953-62. Keely SJ, Uribe JM, Barrett KE. Carbachol stimulates transactivation of epidermal growth factor receptor and mitogen-activated protein kinase in T84 cells. Implications for carbachol-stimulated chloride secretion. J Biol Chem 1998 ;273:27111-7. Keely SJ, Halverson MJ, Barrett KE. Colonic epithelial ErbB2 receptors: a possible role in diversification of inhibitory signaling via the EGF receptor. Gastroenterology 1998 ;114:A385. Chailler P, Briere N. Mitogenic effects of EGF/TGF alpha and immunolocalization of cognate receptors in human fetal kidneys. Biofacctors 1998;7:323-5. Suter TM, Cook-Bruns N, Barton C. Cardiotoxicity associated with trastuzumab (Herceptin) therapy in the treatment of metastatic breast cancer. Breast 2004;13:173-83. Hudis C. Trastuzumab-mechanism of action and use in clinical practice. N Engl J Med 2007;357:3951. Crone SA, Zhao YY, Fan L, Gu Y, Minamisawa S, Liu Y. et al. ErbB2 is essential in the prevention of dilated cardiomyopathy. Nat Med 2002;8:459-65. Sawyer D, Zuppinger C, Miller T, et al. Modulation of antracyclin-induced myofibrillar disarray in rat ventricular myocytes by neuregulin-1 beta and anti-erbB2: potential mechanism for trastuzumabinduced cardiotoxicity. Circulation 2002;105:1551-4. Negro A, Brar B, Lee K. Essential roles of Her2/erbB2 in cardiac development and function. Resent Prog Horm Res 2004;59:1-12.