Title Reevaluation of azoospermic factor c microdeletions using sequencetagged site markers with confirmed physical positions from the GenBank database Author(s) Fukushima, Masato Citation 博士学位論文要旨論文内容の要旨および論文審査結果の要旨／金沢大学大学院医学研究科, 平成18年7月: 59-59 Issue Date 2006-07 Type Others Text version publisher URL http://hdl.handle.net/2297/14736 Right *KURAに登録されているコンテンツの著作権は，執筆者，出版社（学協会）などが有します。 *KURAに登録されているコンテンツの利用については，著作権法に規定されている私的使用や引用などの範囲内で行ってください。 *著作権法に規定されている私的使用や引用などの範囲を超える利用を行う場合には，著作権者の許諾を得てください。ただし，著作権者から著作権等管理事業者（学術著作権協会，日本著作出版権管理システムなど）に権利委託されているコンテンツの利用手続については，各著作権等管理事業者に確認してください。 http://dspace.lib.kanazawa-u.ac.jp/dspace/ 学位授与番号甲第１７７１号学位授与年月日平成１８年３月２２曰氏名福島正人学位論文題目 ReevaluationofAZFcmicrodeletionsusingsequence-taggedsitemarkerswithconfirmed physicalpositionsfromtheGenBanckdatabase (GenBankデーターベースにて物理学的位置が確定した配列タッグ部位を用いたAZFc微小欠失の再評価）教授井上副査教授山本金子樹博一正周論文審査委員主査内容の要旨及び審査の結果の要旨無・乏精子症患者のＹ染色体長腕遠位部には高頻度の欠失が存在しており、この領域を精子形成に関与する領域としＡＺＦ(azoospermiafblctor)という概念が提唱され､AZFa,b,cの３領域に分類された。Ｙ染色体特異的配列タッグ部位STS（sequencetaggedsite）マーカーが公表されると、STS-PCR （po]b7merasechainreaction）法によって、ＡＺＦの微小欠失が報告されるようになった．Ｙ染色体の全塩基配列が確定したが、Ｙ染色体は反復配列（Palindrome）に富むため、ＰＣＲ法では物理学的位置を特定することは困難であった。UCSCGenomeBrowserにアクセスしAZFc領域の物理学的位置が特定しているすべてのＳＴＳマーカーを選択した。１１０のＳＴＳマーカーが存在しており、重複を除くと６９のＳＴＳを認めた。それらのマーカーを用い、無・乏精子症患者４１０名に対し、ＰＣＲ法を用い、AZFc領域の微小欠失パターンを解析した。選択したプローブがＹ染色体に特異的であることを証明するために、３人の日本女性をnegativecontrolとし、妊孕'性のある日本男性をpositivecontrol とした｡またＹＰ領域にあるSRY(sex-determinigregiononY)およびZFY(zmcEngerprotein)を使用しコントロールとした｡GenBank上YPおよび常染色体に存在しているSTSおよび女`性で認めたSTS はＹ特異的ではないため除いた。結果、ＡＺＦｃ欠失は２１名で認めた。微小欠失形式は POpalindrome)1+P2(AZFc)､P3prOximal(AZFb)､P3proximal/P1(AZFb+AZFc)の３つに分類できた。 13名にＰ１+Ｐ２欠失を認め、５名にＰ３/Ｐ１欠失を認めた。ゲノムＤＮＡは線状に連続しており、もし欠失がある場合は飛び石状ではなく、連続したブロックとして欠失する。本研究で用いた６９のＳＴＳマーカーは飛び石状に欠失しており、多型性が多い部分であるために信頼出来ないマーカーが混じっていると考えられた。そこで２１例の欠失地図から連続するＳＴＳマーカーのみを選び、本邦における信頼できるマーカーを決定し、AZFc微小欠失を診断する信頼できる１９のＳＴＳを得る事ができた。以上、本研究は不妊症患者のＹ染色体異常に対する新しいアプローチであり、学位に値すると評価した。－５９－