BIOLOGIE CELLULAIRE DES PROTÉINES VÉGÉTALES D’INTÉRÊT ALIMENTAIRE I- Introduction Composition des grains et graines Teneur en protéine Origine des acides aminés II- Protéines de réserve Caractéristiques communes Classification Grandes familles III- Biologie cellulaire des protéines de réserve • Biosynthèse : précurseurs et produits • Voie sécrétoire de synthèse • Lieux d’accumulation • Structure des différentes protéines de réserve • Mobilisation biologique IV- Intérêt nutritionnel et Perspectives biotechnologiques Composition moyenne de graines (% extrait sec) Protides (dont ac. nucléiques) Lipides Glucides totaux 12 2 80 Blé 12 6,5 79 Riz 9 2 82 Arachide 28 50 15 Colza 30 40 20 Soja 38 21 15 Tournesol 35 45 5 Fève 26 1,5 57 Haricot blanc 21 1,5 58 Lentille 16 1 56 Graines amylacées Graines oléagineuses et protéagineuses Graines amylacées et protéagineuses Phase de développement des grains Embryogenèse Accumulation des réserves Déshydratation ABA grandissement cellulaire Divisions cellulaires Matière fraiche Matière sèche Masse d’eau Temps après fécondation téguments Parties principales du grain de blé (% de la masse sèche) Proportion Protéines Lipides Minéraux Grain entier - 12 2 2 Albumen 80 10 1,2 0,6 Aleurone* 8 18 8,5 15 Téguments* 8,5 6 1 3,5 Embryon 3,5 25 10 4,5 * Formant le son Composition en protéines de grains de céréales et légumineuses Céréales Protéines Albumines Globulines Prolamines Glutélines (% m. s.) Blé Blé tendre tendre Orge 10-15 5-10 5-10 40-50 30-40 10-16 3-4 10-20 35-45 35-45 Avoine 8-20 5-10 50-60 10-15 5-10 Maïs 7-13 2-10 10-20 50-55 30-45 Sorgho 9-13 tr tr. 60-70 30-40 Riz 8-10 2-5 2-8 1-5 85-90 Légumineuses Soja 38-40 10 90 - - Pois 23-27 15 70 - 15 Haricot 22-35 4 67 - 29 Noms liés aux espèces napines (colza = Brassica napus) conglutine d albumines du tournesol, du ricin ALBUMINES 2S riches en soufre (cystéine) PROLAMINES (céréales) riches en glutamine et en proline a) hordéines b, g (orge = Hordeum vulgare) sécaline g (seigle = Secale cereale) gliadines a, g et petites gluténines (LMW) (blé) 1- Triticées b) hordéine C (orge) « pauvres en S » (monomères car pas de cystéines dont pas de ponts S-S) sécaline w (seigle) gliadine w (blé) c) grosses gluténines (HMW) 2- Autres céréales avénines (avoine) prolamines (riz) zéines b, g, d zéines a (maïs = Zea mays) (70-80% des prolamines totales du maïs) GLOBULINES (protéines de réserves les plus abondantes chez les plantes déficientes en cystéine et méthionine) GLUTELINES (minoritaires) 11S Légumines Edestines (chénevis) Vicilline (pois) 7S Phaséoline (haricot) Conglycinine (soja) « riches en S » (80-90% de toutes les prolamines) monomères ou polymères Quelques compositions en acides aminés Acide aminé Blé g2-gliadine Blé HMW Orge C-hordéine Maïs Zéine Pois Légumine (11S) Pois viciline (7S) Asp 1,8 0,6 1,0 3,9 11,7 13,4 Thr 2,0 2,9 0,9 3,2 3,7 3,0 Ser 4,9 5,7 3,0 5,9 6,3 7,8 Gln 39,1 36,3 38,9 20,7 17,6 18,2 Pro 18,7 15,8 32,5 13,0 5,1 4,4 Gly 2,7 20,0 0,7 3,8 7,8 5,2 Ala 3,0 2,9 0,7 11,3 5,9 4,5 Cys 1,9 0,6 0,0 1,9 0,7 0,05 Val 3,4 0,6 1,3 4,5 5,8 5,7 Met 1,7 0,0 0,2 1,9 0,8 0,13 Ile 3,7 0,6 3,2 2,9 4,5 5,5 Leu 7,2 4,5 4,0 15,3 8,3 11,3 Tyr 0,5 5,7 2,0 3,9 2,2 2,3 Phe 5,2 0,5 8,6 3,8 3,8 5,0 His 1,4 0,5 0,8 2,1 2,1 1,6 Lys 0,7 0,9 0,1 0,2 5,5 7,2 Arg 1,5 1,0 0,8 1,7 7,7 5,7 Trp 0,6 0,6 1,3 0,0 0,7 0,05 (D’après Shewry et Miflin, 1985; Pernollet et Mossé, 1983) Adressage des protéines dans corps protéiques à la vacuole de réserve Vacuole de réserve Réticulum endoplasmique Route via appareil de Golgi Globulines Albumines noyau Golgi Route directe à partir du RE (chez certaines céréales) Prolamines Vacuole lytique Maturation des légumines (Globuline 11S) préprolégumine A N a ps N Représentation d’un monomère b a B C basique acide S S C N b a Prolégumine (clivée par une protéase) C S S N C b C Légumine (monomère) Structure des globulines 7S (vicilines (vicilines,, phaséolines phaséolines)) chaperonne monomère trimère Vers Golgi puis vacuole -formation de trimères par liaison des monomères avec chaperonne dans le réticulum - adressage vers la vacuole (parfois glycosylée dans Golgi) - pas de clivage protéolytique Développement de Medicago et présence de globulines 7S Gallardo et al 2006 11S Accumulation des prolamines dans la lumière du RE Prolamines hydrophobes : aggrégation dans la lumière du RE Corps protéiques (PB) : interactions spécifiques entre prolamines riches en soufre et prolamines pauvres en soufre Remplissage des vacuoles réserve via autophagie de Herman and Larkins (1999) The Plant Cell Formation des corps protéiques dans l’albumen de maïs Zéines g et b riches en cystéine liées entre elles par ponts S-S Zéines a (et d) pénètre la matrice et augmente la taille des corps protéiques Shewry P R , Halford N G J. Exp. Bot. 2002;53:947-958 Exemple de dégradation de globulin 7S après germination Tan-Wilson and Wilson, 2012 Développement de la graine Dépôt des protéines de réserve Germination de la graine Mobilisation des protéines de réserve Vacuole de réserve ou corps protéique C Maturation Asn Asn C b a C Dégradation C b a Hexamère N N protéolyse limitée N trimère N b C a Asn -SS- Spécifique (Asn) protéolyse limitée Acides aminés Protéinases N hexamère modifié cytoplasme b a « Papain-like » ou autres protéases Légumaines C C -SS- protéolyse illimitée N N Acides aminés D ’après Trends in Plant Science
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