Les mycétomes à Pseudallescheria

Association de Biologie Praticienne
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Dr Annick DATRY
Consultant chargé de la fabrication des échantillons et de
l’exploitation des résultats
Anne-Marie Fihman
Responsable scientifique
Coordonnateur
MYCOLOGIE Confrontation N°02/2014
Rapport final 01/07/2014
1) Echantillon 1 (bouchon bleu)
Il s’agit d’un homme africain âgé de 30 ans qui présente un onyxis au niveau du gros orteil du pied droit.
1.1 - Résultats
Trichophyton rubrum (africain)
1.2 - Techniques d’identification
Le prélèvement a été ensemencé sur milieu de Sabouraud-chloramphénicol-actidione.
Examen macroscopique +++
Examen microscopique : prélever un fragment de la colonie que l’on dilacère dans 2 gouttes de lactophénol ou
bleu-lactophénol, ou utiliser la technique du scotch.
On recherche au microscope les éléments caractéristiques des dermatophytes : filaments, microconidies,
macroconidies et ornementations particulières
1.3 - Caractéristiques morphologiques :
- Voir annexe 1
1.4 - Thérapeutique recommandée
Terbinafine PO (200 mg / j) pendant plusieurs mois (au moins 6 mois si atteinte de la lunule).
1.5 - Commentaires concernant les réponses
- Réponses exactes :
- Réponses inexactes ou incomplètes :
Trichophyton rubrum, 185 fois
- Trichophyton spp, 44 fois
- Epidermophyton floccosum, 1 fois
- Autres, 2 fois
- Pas de réponse, 2 fois
- Réponse non retournée, 14 fois
2) Echantillon 2 (bouchon vert)
Patient caucasien, âgé de 40 ans, présentant une sinusite du sinus sphénoïdal.
2.1 - Résultats
Scedosporium apiospermum
2.2 - Techniques de laboratoire utilisées
Ensemencement sur milieu de Sabouraud - chloramphénicol sans actidione
Même technique d’identification que pour l’échantillon 1
2.3 - Caractéristiques morphologiques
- Voir annexe 2
2.4 - Thérapeutique recommandée
Le traitement médical repose sur le voriconazole en première intention (800mg/jour en 2 prises séparées de 12h et
loin des repas à J1 puis, 400mg/jour en 2 prises idem)
,
2.5 - Commentaires concernant les réponses
- Réponses exactes :
- Réponses inexactes ou incomplètes :
Scedosporium apiospermum ou spp, 217 fois
- Cladosporium spp, 1 fois
- Fusarium spp, 1 fois
- Scopulariopsis spp, 2 fois
- Acremonium spp, 1 fois
- Penicillium spp, 3 fois
- Aspergillus spp, 1 fois
- Chrysosporium spp, 2 fois
- Trichoderma spp, 1 fois
- Autres, 9fois
- Pas de réponse, 1 fois
- Réponse non retournée, 14 fois
3) Echantillon 3 (à Ensemencer)
Echantillon de PDP chez un patient hospitalisé en neurochirurgie présentant une pneumopathie acquise sur
ventilation mécanique.
3.1 - Résultats
Saccharomyces cerevisiae
3.2 - Techniques de laboratoire utilisées
Ensemencer sur milieu de Sabouraud-chloramphénicol et/ou milieu.chromogène
3.3 - Caractéristiques morphologiques
- Voir annexe 3
3.4 - Thérapeutique recommandée
Il est recommandé de traiter par amphotéricine B IV ou fluconazole + 5-fluorocytosine (antifongigramme
souhaitable)
3.5 - Commentaires concernant les réponses
- Réponses exactes :
- Saccharomyces cerevisiae ou spp, 205 fois
- Réponses inexactes ou incomplètes :
- Candida spp, 22 fois
- Cryptococcus spp, 4 fois
- Autres, 2 fois
- Levure non identifiée / Pas de réponse, 6 fois
-
Réponse non retournée, 14 fois
ANNEXE 1
Trichophyton rubrum (var. africain)
Strictement anthropophile, cette espèce se transmet par l’intermédiaire de lieux publics humides où l’on
marche pieds nus (piscine, sauna…).
Elle donne des onyxis et des dermatophyties de la peau (inguino-crurales, intertrigos interdigitoplantaires) et exceptionnellement des folliculites.
Diagnostic mycologique
● Aspect macroscopique
Sa croissance est rapide : colonies poudreuses, plates ou cérébriformes. Le pigment est abondant et la
colonie est rouge foncée recto et verso.
● Aspect microscopique
- Filaments en raquettes avec ramifications à angle droit ;
- Très nombreuses microconidies rondes disposées en acladium ;.
- Nombreuses macroconidies, lisses, très longues, étroites à extrèmités arrondies, en « saucisse ». Elles
mesurent (60-80) x (6-8) µm et contiennent 6 à 12 logettes
Ongles de pieds
Culture sur milieu de Sabouraud avec Actidione
Examen direct de la culture
ANNEXE 2
Scedosporium apiospermum
Deux espèces sont incriminées en pathologie humaine :
- S. apiospermum (forme sexuée Pseudallescheria boydii)
- S. prolificans
Ce sont des moisissures assez répandues dans la nature, souvent isolées en milieu rural, à partir du sol, d’eaux
polluées, de débris organiques ou de végétaux pourris. Ces champignons vivent en saprophytes.
La contamination est soit aérienne, soit cutanée ou transcutanée, à la suite d’un traumatisme, soit orale par
inhalation accidentelle d’eaux polluées de rivière ou d’étang.
Les patients immunodéprimés ont un terrain propice pour développer des formes profondes. Mais beaucoup de
patients non immunodéprimés développent des formes superficielles.
Chez l’homme, ils sont responsables :
1. Lésions superficielles :
- Les mycétomes à Pseudallescheria boydii observés surtout aux USA et en Amérique du SUD (grains blanc
jaunâtre)
- Formes articulaires
- Formes oculaires (kératites +++)
- Les infections du sinus et du conduit auditif externe simulent une aspergillose
2. Lésions profondes
- Broncho-pulmonaires réalisant des tableaux voisins de ceux des aspergilloses
- Atteintes cérébrales
- Autres localisations : endocardites et plus rarement des localisations rénales, hépatiques et prostatiques.
Diagnostic mycologique
A l’examen direct, les grains issus des mycétomes sont blancs, jaunâtres (0,5 à 2 mm de diamètre) et faits
de filaments mycéliens enchevêtrés. Dans les autres prélèvements les filaments sont difficilement discernables de
ceux des Aspergillus.
La culture est rapide à 27° ou 37° C sur milieu de Sabouraud avec ou sans actidione.
A l’examen macroscopique,
On observe des colonies duveteuses puis laineuses voire cotonneuses ; couleur blanche au début devenant
rapidement grise à marron, parfois vert foncé au recto, gris très foncé à noir au verso.
A l’examen microscopique
il existe 2 types de conidiogénèse qui peuvent coexister dans une même souche ; la forme Scedosporium est
toujours présente :
- filaments mycéliens de 2 à 3 µm de large, avec des ramifications à angle aigu ;
- des spores ovoïdes mesurant (6-10) x (3-6)µm, branchées directement sur le filament ou à l’extrémité de
conidiophores dressés perpendiculairement aux filaments (aleuriospores) et parfois le conidiophore peut former
des annelides (annellospores); ces spores sont de couleur brune.
La forme Graphium est inconstante mais toujours associée à la précédente. Les filaments portant les spores sont
regroupés en corémies, sont colorés en brun et se ramifient à leur extrémité pour former des bouquets de cellules
conidiogènes.
Les spores terminales sont plus petites (5-7) x (2-3)µm, cylindriques et produites par des annelides régulièrement
espacées.
.
Culture sur milieu de Sabouraud
Examen direct de la culture
Culture sur milieu de malt
ANNEXE 3
Saccharomyces cerevisiae
Cette levure, communément appelée « levure de bière », est très utilisée dans l’industrie agro-alimentaire
(boulangerie, bière, vin) en raison de son rôle dans la fermentation alcoolique. L’Ultralevure contient une espèce
très voisine : S. boulardii.
S. cerevisiae est parfois responsable de mycose buccale et de vulvo-vaginite. Les infections profondes sont peu
nombreuses.
Diagnostic mycologique
Ensemencement sur Sabouraud sans actidione.
Examen macroscopique :
- Sur milieu de Sabouraud, colonie blanche à crème, crèmeuse, lisse, parfois finement réticulée ;
- Sur milieu Chromagar® colonie rose à violette brillante.
Examen microscopique
Levures globuleuses, de grande taille, mesurant 5-8 x 6-12 µm
Test de blastèse : absence de filamentation
Sur PCB ou RAT, absence de pseudofilamentation ou rudimentaire
Assimilation des sucres :
- Galactose, saccharose,maltose, raffinose, variables
- Lactose négatif
Culture sur milieu Chromagar®
Examen direct de la culture
ANNEXE 4 Diagrammes
Echantillon 1 (bouchon bleu)
MYCOSES
Trichophyton rubrum ou spp
Trichophyton spp
Epidermophyton floccosum
Scedosporium sp. (= Pseudoallescheria)
Scytalidium dimidiatum
Non identifié/Pas de réponse
TOTAL
Nbre de réponse
239 sur 253
% Identification
des mycoses
185
44
1
1
1
7
77,41
18,41
0,42
0,42
0,42
2,93
239
100,00
Echantillon 2 (bouchon vert)
MYCOSES
Scedosporium apiospermum ou spp
Penicillium sp.
Scopulariopsis sp.
Chrysosporium sp.
Acremonium sp.
Aspergillus species
Cladosporium sp.
Fusarium sp.
Trichoderma
Autres
Pas de réponse
Total
Nbre de réponse
239 sur 253
% Identification
des mycoses
217
3
2
2
1
1
1
1
1
9
1
90,79
1,26
0,84
0,84
0,42
0,42
0,42
0,42
0,42
3,77
0,42
239
100,00
Echantillon 3 (à Ensemencer)
Nbre de réponse
239 sur 253
% Identification
des mycoses
205
22
4
85,77
9,21
1,67
Aspergillus niger
1
0,42
P. wickerhamii
1
0,42
Levure non identifiée / Pas de réponse
6
2,51
239
100,00
MYCOSES
Saccharomuces cerevisiae ou spp
Candida spp
Cryptococcus spp
Total