Real-Time PCR Methoden • Lebensmittelanalytik Schneller, Einfacher, Besser iQ-Check, Ihre Lösung in der Lebensmittelsicherheit Das iQ-Check® System macht sich alle Vorteile der Real-Time PCR zu Nutzen, um schnellere und zuverlässige Lösungen für die Untersuchung von Lebensmitteln auf Krankheitserreger zu ermöglichen. Speziell für die Anforderung in der Qualitätskontrolle und in den Servicelaboren entwickelt, trägt das iQ-Check System zu einer optimalen mikrobiologischen Kontrolle von Lebensmitteln und Proben aus der industriellen Produktionsumgebung teil. Das iQ-Check System umfasst eine Vielzahl von Tests und Geräten für die unterschiedlichsten Anforderungen. Somit ermöglicht es als flexible und offene Lösung den industriellen mikrobiologischen Laboren eine schnelle Kontrolle und Reaktion im Rahmen ihres HACCP Konzepts. 1 Eine Komplettlösung Standardisierte Reagenzien: - Anreicherungsmedien - Real-Time PCR iQ-Check Kits - Chromogene Agar n Biochemische Bestätigungstests n Validierte Geräte und Software: - Integrierte Lösung zur Automatisierung der Probenaufarbeitung - Real-Time PCR Detektionssysteme von Bio-Rad -A utomatisierte Auswertung der Daten und Rückverfolgbarkeit - Flexibler Einsatz der Geräte und Reagenzien n 1 1 Schnellere Ergebnisse Testergebnisse innerhalb von Stunden nach der Anreicherung Ergebnisse für Salmonella und E. coli O157:H7 in weniger als 12 Stunden in rohem Fleisch n Bestätigung der Kolonien durch validierte chromogene Agar n n 1 Bewährte Technologie Einfache Handhabung Gebrauchsfertige Reagenzien Einfache DNA Extraktionsprotokolle für einen hohen Probendurchsatz: automatisiert oder manuell durchführbar n Barcode Reader für die Plattenbelegung n Automatisierte Amplifikation, Detektion und Interpretation n n 1 Auf Grundlage der Genamplifikation durch die PolymeraseKetten-Reaktion (PCR) und dem Nachweis in Echtzeit (Real-Time) werden in den iQ-Check Kits DNA-Primer und Fluoreszenzsonden verwendet, die für den Zielorganismus spezifisch sind. Der Nachweis (Detektion) eines Fluoreszenzsignals für die vervielfältigten Zielsequenzen (Amplifikation) weist auf das Vorhandensein des Erregers in der getesteten Probe hin. 1 Minimales Kontaminationsrisiko Positivkontrolle, Negativkontrolle und interne PCR Inhibitionskontrolle für genaue und zuverlässige Ergebnisse n Keine post-PCR Arbeitsschritte, daher minimales Kontaminationsrisiko n Um eine höchstmögliche Genauigkeit zu erzielen, wurde der Test als Multiplex-Assay entwickelt: Die Sonden und Primer für die Ziel-DNA und die interne Kontrolle sind im gleichen Reaktionsmix enthalten und mit unterschiedlichen fluoreszierenden Farbstoffen markiert. Bei der internen Kontrolle wird die Effizienz der einzelnen Amplifikationsreaktion durch Bestimmung der Anwesenheit von Inhibitoren beurteilt, wodurch die Zuverlässigkeit von negativen Ergebnissen gewährleistet ist. Zuverlässig schnelle Ergebnisse Beschleunigen Sie die Freigabe von Endprodukten und Chargen im Produktionsprozess. Aufgrund der hohen Sensitivität und Spezifität der Real-Time PCR genügt eine einzige Übernachtanreicherung um Ergebnisse zu erzielen, die gleichwertig oder besser als der ISO Standard oder andere Referenzmethoden sind. Es wurden Protokolle entwickelt, mit denen Ergebnisse in weniger als 12 Stunden vorliegen. 1 Ergebnisse von hoher Qualität n n 1 Zertifizierung durch NF VALIDATION gemäß ISO 16140 Protokoll Validiert durch AOAC-RI, Health Canada und NordVal Vollständige Flexibilität Bis zu 94 Proben können in einem Lauf untersucht werden Alle Testkits für Pathogene können parallel auf derselben Platte getestet werden n Geräte für hohen und niedrigen Probendurchsatz verfügbar n Offene Software n n 1 Rückverfolgbarkeit Automatisierung, LIMS Anbindung und/oder Barcode Reader verfügbar n Unterschiedliche Zugangsrechte für den Anwender n Vollständiger Datenbericht enthält alle Informationen zur Untersuchung n Anreicherung PCR Ergebnisse iQ-Check Real-Time PCR Standard Referenzmethoden Anreicherung Anreicherung Selektivagar Tag 1 Tag 2 Tag 3 Biochemische Tests Ergebnisse Tag 4–7 iQ-Check: Eine einzige Anreicherung von 8 Stunden bis 24 Stunden iQ-Check Methode AOAC NF VALIDATION Health Canada NordVal ✔ 1 Campylobacter spp. ✔ 1 Cronobacter spp. ✔ 1 E. coli O157:H7 ✔ 1 ✔ 1 Listeria monocytogenes ✔ 1 ✔ 1 Listeria spp. ✔ 1 ✔ 1 ✔ 1 Salmonella spp. ✔ 1 ✔ 1 ✔ 1 ✔ 1 ✔ 1 Salmonella Enteritidis STEC Virulenzgene* ✔ 1 STEC Top 7 Gruppen* ✔ 1 * Die USDA hat keinen sog. Einwand-Brief gesendet MiniOpticon CFX96 Touch Deep Well Thermocycler Basis MJ Mini™ C1000 Touch™ Probenkapazität 48 Wells 96 Wells Lichtquelle 48 blau-grüne LEDs 6 gefilterte LEDs im optischen Shuttle Optische Detektion 2 Photodioden 6 Photodioden im optischen Shuttle Anregungsbereich 470–500 nm 450–684 nm Detektionsbereich 523–700 nm 510–730 nm Funktion Multiplex Bis zu 2 Targets Bis zu 5 Targets Serielle Verbindungs- 1 Einheit möglichkeiten Bis zu 4 Einheiten von 1 PC Maximale Ramp-Rate2.5°C/sec. 2.5°C/sec. Gradientenfunktion 30–100°C 16°C1–24°C Abmessungen (B x T x H) 18 x 32 x 33 cm 33 x 46 x 36 cm Gewicht 6.8 kg 21.4 kg Food Science Version 2.1 © 2013 Bio-Rad Laboratories, Inc. All rights reserved. CFX Manager Software ™ Industrial Diagnostic Edition 359-3893 V21G0713 Die CFX Manager Software steuert und kontrolliert alle Arbeitsschritte im CFX96 und im MiniOpticon Real-Time PCR Detektionssystem und integriert zusätzlich das Betriebssetup des iQ-Check Prep Systems. n n Einfache Bedienung Integration der automatisierten Probenaufarbeitung, automatisierte Auswertung und vollständige Interpretation aller iQ-Check Ergebnisse; zusätzlich vollständiger Zugriff auf Amplifikationskurven und –daten JaJa Gradientenbereich 35–99°C Temperaturdifferenzbereich CFX Manager Software Industrial Diagnostic Edition n Datenimport/Datenexport aus/in ein LIMS n Ergebnisberichte können archiviert werden n Von 1 Computer aus können maximal vier CFX96 Systeme oder 1 MiniOpticon angesteuert werden. Eine Komplettlösung Aufgrund der Entwicklung als flexible und offene Lösung, kann das iQ-Check System manuell oder automatisiert durchgeführt werden. Dabei ist ein Probendurchsatz von einer einzelnen Probe bis hin zu 94 Proben möglich, die entweder auf dem kleineren (48 Wells) oder auf dem größeren Gerät (96 Wells) untersucht werden. Alle RealTime PCR Geräte von Bio-Rad liefern ein einzigartiges modulares Design, das mit einer hochauflösenden Optik verbunden ist, die den Nachweis der Zielsequenz mit Hilfe von fluoreszierenden Sonden ermöglicht. Durch die Verwendung der bewährten Real-Time PCR Geräte sowie der intuitiven Software in Kombination mit den leistungsstarken Kits und Medien von Bio-Rad wird sichergestellt, dass die Real-Time PCR Daten und Ergebnisse für alle Anwendungen in der Lebensmittel- und Umweltanalytik von gleich bleibend hoher Qualität sind. Zusätzlich gewährleistet die Automatisierung eine hohe Rückverfolgbarkeit und zuverlässige Ergebnisse. Manuelle Lösung Vier-Schritt Protokoll 1 Probenanreicherung 2 DNA Extraktion – Überführen der angereicherten Probe und Zelllyse 3 Vorbereitung der PCR Reaktion + Amplifikation – Zugabe der extrahierten DNA in die PCR Wells 4 Automatisierte Analyse, Auswertung und Reporterstellung 5 μl oder Anreicherung Extraktion und PCR Setup Nachweis Ergebnisse Automatisierte Lösung iQ-Check® Prep Arbeitsablauf 1 Überführen der angereicherten Proben in eine Deepwell-Platte gemäß Plattenbelegung 2 Befüllen des iQ-Check Prep Systems mit Verbrauchsmaterialien, Reagenzien und Proben; das Gerät starten 3 Real-Time PCR Lauf starten und Ergebnisse ablesen Anreicherung Probenaufarbeitung Nachweis Ergebnisse iQ-Check Prep Lösung iQ-Check Prep ist eine sog. ‘‘Liquid Handling’’ Arbeitsplattform, mit der die DNA Extraktion und die PCR Plattenbelegung durchgeführt werden kann. Diese wurde für die Verwendung der vollständigen iQ-Check Kit Produktpalette sowie für das CFX96 Touch™ Deep Well Real-Time PCR System entwickelt und ermöglicht so eine vollständig integrierte, automatisierte Lösung für den Nachweis von Pathogenen in Lebensmitteln. Eine optimale einfache Handhabung sowie eine maximale Rückverfolgbarkeit wird zusätzlich durch die Verwendung der CFX Manager™ Software IDE erzielt. Die iQ-Check Prep Lösung liefert den Routinelaboren ein robustes System für zuverlässige und reproduzierbare Ergebnisse. Es passt nahtlos in den Arbeitsablauf des Labors und ist eine ideale Lösung für Labore mit mittlerem bis hohem Probendurchsatz. Durchsatz Ihr Labor untersucht bis zu 250 Tests in einer 8-Stunden Schicht n Inklusive der Probenvorbereitung und der Beladungszeit: ein iQ-Check Prep Instrument und ein CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR System werden benötigt iQ-Check Prep, CFX96 Touch Deep Well und iQ-Check Kits Ihr Labor untersucht mehr als 500 Tests in einer 8-Stunden Schicht n Einfach ein weiteres CFX96 Real-Time PCR Gerät hinzufügen MiniOpticon™ Real-Time PCR Detection System CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR Detection System Das MiniOpticon System gehört zu den kleinsten tragbaren Systemen, die es auf dem Markt für Real-Time PCR Anwendungen gibt. Das CFX96 Touch Deep Well System ist ein sensitives 5-Farben Multiplexsystem in einem 96-Well Block. MiniOpticon System n Die 2-Farben Multiplexfähigkeit ermöglicht die Detektion CFX96 Deep Well System n n Das MiniOpticon System enthält in der optischen Einheit einen festen Array von 48 LEDs ohne bewegliche Teile n Bis zu 48 Tests pro Lauf möglich Alle Komponenten für die Anregung und die Detektion der Fluorophore werden durch das hochentwickelte optische Design des sog. “photonic shuttle” direkt in jedes einzelne Well gebracht einer Vielzahl von Fluorophoren n Bis zu 96 Tests pro Lauf möglich KatalognummerBeschreibung KatalognummerBeschreibung Reagenzien iQ-Check Kits 357-8135iQ-Check Campylobacter Kit, 96 Reaktionen 357-8137iQ-Check Cronobacter spp. Kit, 96 Reaktionen 357-8114iQ-Check E.coli O157:H7 Kit, 96 Reaktionen 357-8124iQ-Check Listeria monocytogenes II Kit, 96 Reaktionen 357-8113iQ-Check Listeria spp. Kit, 96 Reaktionen 357-8123iQ-Check Salmonella II Kit, 96 Reaktionen 357-8142iQ-Check S. Enteritidis Kit, 96 Reaktionen 357-8139 iQ-Check STEC VirX Kit, 96 Reaktionen 357-8140 iQ-Check STEC SerO Kit, 32 Reaktionen Geräte und Verbrauchsmaterialien Instrumente 359-4990Industrial Diagnostic CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR Detection System, 96 Wells (360-0037 für Nordamerika) 359-3995Industrial Diagnostic MiniOpticon Real-Time PCR Detection System, 48 Wells 359-3893 CFX Manager Software Industrial Diagnostic Edition 359-4910 iQ-Check Prep System (Konfiguration) Medien für die Probenanreicherung 355-4179 Gepuffertes Peptonwasser, 225 ml x 6 Flaschen 355-5795 Gepuffertes Peptonwasser, 3 L x 4 Beutel 355-5790 Gepuffertes Peptonwasser, 5 L x 2 Beutel 356-4684 Gepuffertes Peptonwasser, dehydriert, 500 g 355-5797 Fraser ½ Bouillon, 225 ml x 6 Flaschen 355-5794 Fraser ½ Bouillon, 3 L x 4 Beutel 355-5792 Fraser ½ Bouillon, 5 L x 2 Beutel 356-4604 Fraser ½ Bouillon, Basismedium, dehydriert, 500 g 356-4616 Fraser ½ Supplement, 10 Fläschen 355-3454 TCS (Trypton-Casein-Soja), 10 ml x 25 Röhrchen 355-5703 LSB (Listeria Special Broth), 225 ml x 6 Flaschen 355-5793 LSB (Listeria Special Broth), 5 L x 2 Beutel 356-4703 LSB (Listeria Special Broth), dehydriert, 500 g 356-4753 LSB (Listeria Special Broth), dehydriert, 5 kg 356-4001 SEB (STEC Enrichment Broth), dehydriert, 500 g 356-4002 SEB (STEC Enrichment Broth), dehydriert, 5 kg Chromogene Medien für die Bestätigung 356-4748RAPID’E.coli O157:H7 Agar, 100 g 356-4610 Novobiocin Supplement für RAPID’E.coli O157:H7, 1 g Flasche 356-4744RAPID’Listeria spp. Agar, 500 g 356-4745RAPID’Listeria spp. Agar, Supplement 1, 10 Fläschchen (1 Fl. ausreichend für 500 ml) 356-4746RAPID’Listeria spp. Agar, Supplement 2, 10 Fläschchen (1 Fl. ausreichend für 500 ml) 356-3694RAPID’L.mono Agar, 90 mm x 20 Petrischalen 356-3964RAPID’L.mono Agar, 90 mm x 120 Petrischalen 356-4293RAPID’L.mono Agar, Basismedium, 500 g 356-4294RAPID’L.mono Agar, Supplement 1, 10 Fläschchen (1 Fl. ausreichend für 500 ml) 356-4746RAPID’L.mono Agar, Supplement 2, 10 10 Fläschchen (1 Fl. ausreichend für 500 ml) 355-5294RAPID’L.mono Agar, Kit: 190 ml Agar + 2 Supplemente 356-3971RAPID’Sakazakii Agar, 90 mm x 20 Petrischalen 356-3963RAPID’Salmonella Agar, 90 mm x 120 Petrischalen 356-4705RAPID’Salmonella Agar, 500 g 356-4709RAPID’Salmonella Supplement in Kapseln, 10x konz.,100 356-4710RAPID’Salmonella Supplement in Kapseln, 1x konz., 100 356-4712RAPID’Salmonella Supplement, 1 Box ausreichend für 100 Analysen Verbrauchsmaterialien für das CFX96 Touch Deep Well und MiniOpticon System HSP-96551, 2Hard-Shell® 96-Well (skirted) PCR Platten, niedriges Profil, weiße Schale, weiße Wells, x 50 48-Well PCR Platten (unskirted), niedriges Profil, weiß, x 50 MLL-48511, 2 MSB-1001Microseal® 'B' Film, optisch klare, adhäsive Abdeckfolien, x 100 TLS-08511, 20.2 ml 8-er PCR Gefäßstreifen, niedriges Profil, ohne Deckel, dünnwandig, weiß, x 120 TCS-08031, 28-er Streifen mit optischen Flachdeckeln für 0.2 ml Gefäße und Platten, ultraklar, x 120 Verbrauchsmaterialien für die DNA Extraktion 224-01101, 2Konische Reaktionsgefäße, 1.5 ml, Schraubdeckel mit integriertem O-Ring, steril, x 500 359-4900 1 ml Deepwell Platten, 96 Wells, x 50 X-Pierce Films, x 100 360-00401 2 X-Pierce Films, x 100 359-3977 Verbrauchsmaterialien für das iQ-Check Prep System 359-4900 1 ml Deepwell Platten, x 50 359-4901 5 ml Röhrchen für den PCR Mix, x 50 359-4902 Pipettenspitzen 50 µl, x 5760 359-4903 Pipettenspitzen 1000 µl, x 3840 359-4904 Vorratsbehälter 60 ml, x 28 HSP-99551, 2 Hard-Shell PCR Platten mit Barcode Zusammensetzung der Kits Die iQ-Check Kits sind vollständige und gebrauchsfertige Reagenzienkits, inklusive der Reagenzien für die Probenaufarbeitung: n Lysisreagenz für die DNA Extraktion n Fluoreszierende Sonden n PCR Amplifikationsmix mit interner Inhibitionskontrolle n Positiv- und Negativkontrolle (1) Für die in Nordamerika bestellten Artikel gelten die folgenden Artikelnummern: MLL-4851XTU, TLS-0851XTU, TCS-0803XTU, 224-0110XTU, HSP-9655XTU (2) Für die in Europa bestellten Artikel gelten die folgenden Artikelnummern: 35MLL4851, 35TLS0851, 35TCS0803, 352240110, 35HSP-9655 X-Pierce is a trademark of Excel Scientific, Inc. Notice regarding Bio-Rad thermal cyclers and real-time systems: These products are covered by one or more of the following U.S. patents or their foreign counterparts owned by Eppendorf AG: U.S. Patent Numbers 6,767,512 and 7,074,367. Hard-Shell plates are covered by one or more of the following U.S. patents or their foreign counterparts owned by Eppendorf AG: U.S. Patent Numbers 7,347,977; 6,340,589; and 6,528,302. Bio-Rad Laboratories, Inc. Life Science Group Web site www.bio-rad.com USA 800 424 6723 Australia 61 2 9914 2800 Austria 01 877 89 01 Belgium 09 385 55 11 Brazil 55 31 3689 6600 Canada 905 364 3435 China 86 21 6169 8500 Czech Republic 420 241 430 532 Denmark 44 52 10 00 Finland 09 804 22 00 France 01 47 95 69 65 Germany 089 31 884 0 Greece 30 210 777 4396 Hong Kong 852 2789 3300 Hungary 36 1 459 6100 India 91 124 4029300 Israel 03 963 6050 Italy 39 02 216091 Japan 03 6361 7000 Korea 82 2 3473 4460 Malaysia 60 3 2117 5260 Mexico 52 555 488 7670 The Netherlands 0318 540666 New Zealand 64 9 415 2280 Norway 23 38 41 30 Poland 48 22 331 99 99 Portugal 351 21 472 7700 Russia 7 495 721 14 04 Singapore 65 6415 3170 South Africa 27 861 246 723 Spain 34 91 590 5200 Sweden 08 555 12700 Switzerland 061 717 95 55 Taiwan 886 2 2578 7189 Thailand 66 2 6518311 United Kingdom 020 8328 2000 © Bio-Rad 14-1293 16540 Rev B 0814 1213 Bio-Rad, S.N.C. au capital de 50 000 000 €, Locataire-Gérant, 449 990 712 RCS Nanterre • N° Intracommunautaire FR 62 449 990 712 • Siret 449 990 712 00019 Bestellinformationen
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