29pmC253 バ イオ医薬 品の品質評価 にお ける全 自動二次元電気泳動法 の実行可能性 中辻 佑強 1,古岡 裕也 1,松村 千恵美 1,木下 充弘 J,早川 尭夫 2, ○掛樋 (l近畿大 ･ 薬 ,2近畿大 ･ 薬総研 ) -晃 1 【 緒言 】バイオ医薬 品の開発 において､開発 の各 ステー ジで必要 とされ る評価 の 基準は異 なるが､分子 の不均一性 と混入 しうる不純物 の確認 は最 も重要 な試験で ある｡ 二次元電気泳動法はタンパ ク質 の電荷不均一性評価 の古典的手法であ り､ 加 えて生産工程 由来不純物 の検 出にも優れた方法 として､生産 ･精製 工程 の確認 ､ 最終製 品の評価等のあ らゆるステー ジにおいて有用 な技術であるが､試験 の煩雑 さと再現性 の改善が課題 であった｡本発表では全 自動二次元電気泳動装置 を用い るタンパ ク質性バイオ医薬 品評価法 について､電荷不均一性分子種分離能 ､不純 物等 の検 出能､分析能パ ラメー タを評価 し､バイオ医薬 品評価法 としての実行 可 能性 を検討 した｡ 【 方法】装置 :全 自動二次元電気泳動装置 Aut o2D ( シャープマニ ファクチ ャ リン グシステム) を使用 した｡分離 されたタンパ ク質 はクマ シーブ リリアン トブルー ( CBB) によ り染色 した｡試料 :分析条件検討用のモデル として ヒ トアポ トラン スフェ リンを用いた｡ タンパ ク質性バイオ医薬 品には生産細胞種の異なるヒ ト化 及びキメラ抗体医薬 品を使用 した｡ 【 結果 ･考察 】1次元 目の I EFゲル な らびにアンフォライ トの種類 とフォーカシン グプ ログラムを詳細 に検討 し､糖鎖不均一性 に基づいて ヒ トアポ トランスフェ リ ンの 4種類 のグライ コフォームを分離できた｡ なお､分析バ ッチ毎のスポ ッ ト位 置のずれ は 5%以下であった｡上市抗体医薬 品を Aut o2D 分析-適用 した結果､ 糖鎖不均一性 に加 え重鎖末端 リジン残基数の違 いに基づ く電荷不均一性分子種 を 2時間以内に分離できた｡本法は従来の二次元電気泳動法 に比べ高い迅速性 と再現 性 を有 し､加 えて試料調製 と 1次元 目か ら 2次元 目移行時の人為的誤差が低い こ とか ら､バイオ医薬 品評価法 としての実行が可能 な優れた手法である｡
© Copyright 2024 ExpyDoc
