Hirosaki University Repository for Academic Resources Title Uncoupling Protein 2の新たな遺伝子多型の検出と肥 満との関係について Author(s) 棟方, 栄治, 土田, 成紀, ムナカタ, エイジ, ツチダ , シゲキ, Munakata, Eiji, Tsuchida, Shigeki Citation Issue Date URL 弘前医学. 57(1), 2005, p.35-42 2005-08 http://hdl.handle.net/10129/195 Rights Text version publisher http://repository.ul.hirosaki-u.ac.jp/dspace/ 弘 前 原 著 医 学 57: 35 -42,2005 Uncoupl i ngPr ot ei n2の新たな遺伝子多型の 検出 と肥満 との問係について 棟 方 栄 治 1,2' 土 田 成 紀1 ) 抄録 肥満 の候補遺伝子であるアンカ ップリングプロテイ ン 2の第 8エクソンの 3'末端側の非翻訳領域 に存在す る遺伝子多 型 を健康な 日本人の成人男性 について検討 した ところ,コ-カシア人に報告 されている 41 2bpの del et i on型は認めず,457 bpの i ns e r t i on型が主要な遺伝子型であった.457bpの i ns e t i on型 に 45bpが さ らに挿入 された 502bpの新 しい遺伝子 8例中 457/ 457のホモ接合体が 1 4例,457/ 502のヘテ ロ接合体が 4例であ り,502/ 502のホ 型 を兄 い出 した.検索 した 1 モ接合体は観察 されなかった. 8例 につ いて, このアンカ ップ リングプロテイ ン 2の遺伝子多型 と体重,体格指数 ( BMI ),上腕三頭筋 と側腹部 上記 の 1 での皮下脂肪の厚 さ,安静時代謝率 ( RMR) ,脂肪率及び脂肪量 との関係 を検討 した.年齢は 27歳か ら 58歳,体重は 58 . 2 2kgに分布 した.MannWhi t ne yのU検定によ り,457/ 502型の人は 457/ 457型の人よ り,体重,上腕三頭筋 kgか ら 99. と側腹部の皮下脂肪の厚 さ,脂肪率及び脂肪量が有意 に高 く,502bpの新規遺伝子型は肥満 に関与する可能性が示唆された. 弘前 医学 57: 35 -42,2005 キーワー ド:アンカ ップリングプロテイ ン 2;β3-ア ドレナ リンリセ プター;遺伝子多型;肥満. ORI GI NALARTI CLE DEMONSTRATI ON OF A NEW GENOTYPE ENCODI NG UNCOUPLI NG PROTEI N 2AND ASSOCI ATI ON WI TH OBESI TY Ei j iMunakat al･2) and Shi gekiTsuchi da2) Abs t r ac t Unc oupl i ngpr ot ei n2( UCP2) ,ma ppe dt oc hr omos omellq13 i nhumans ,pl aysani mpor t antr ol ei n e ne r gymet a bol i s m andbodywe i ghtr egul at i on.Somepos i t i ver es ul t shavebeenr e por t edf oras s oci at i onsof obe s i t yanddi a be t e si nCauc as i answi t ht hepol ymor phi s m oft heUCP2ge nei nt he3' unt r ans l at e dr e gi on( 3' UTR) ofe 又on8( i ns e r t i onanddel e t i ont ype s ) .Wee xami nedt hege not ype sofadul tmeni nAomor iPr e f e c t ur es i t uat edi n nor t he r nJ apan,i nor dert oi nve s t i gat ea s s oc i at i onsbe t we e nt hepol ymor phi s m andobe s i t y.I nt hepr e s e nts t udy, i naddi t i ont ot hei ns e r t i ont ypeof457bp,ane w genot ypec ompos e dof502bpwasdet e c t e d,whi l et hedel e t i on t ypeof412bpwa snot .Al t hought hes e que nc eofi ns e r t e d45bpi nt he457bpt ypewase nt i r e l yi de nt i c alt ot hat r e por t e dpr e vi ous l y, t hef r agme ntwasi ns er t edatt he1llbpf r om t he3' e ndoft hee 又on8.I nt he502bpt ype , t he s amef r agme ntwasf ur t he radde dt ot he457bpt ype.Thene w ge not ypewa sobs e r ve di n4of18s ubj e c t sast he 457/ 502het e r oz ygot eandot he rs ubj e c t swe r et he457/ 457homoz ygot e . Si gni f i c anta s s oc i a t i onswe r ef oundbe t we e nt hepol ymor phi s m ofUCP2geneandobe s i t yi nadul tJ apanes e me n.Wei ght ,t hi ckne s s e soft hes ubc ut ane ousadi pos et i s s ue satt r i c e psandl at er ala bdome n,f a tpe r c ent a geand p <0 . 05)i ns ubj e c t swi t ht hehe t e r oz ygot e( 457/ 502)t hani ns ubj e c t swi t ht he f at ma s swer es i gni f i c ant l yhi ghe r( homoz ygot e( 457/ 457) .The s er e s ul t ss ugge s tt hatane w ge not ype( 502bp)i si nvol ve di nobe s i t y. Hi r os akiMed.∫ . 57:35 -42,2005 adr ener gi cr ecept or ;DNA pol ymor phi sm;obesi t y. Keywords:uncoupl i ngpr ot ei n 2;β3- 1 )Sec ondDepar t mel l tOfBi oc hemi s t r y,Hi r osaki Uni ver si t ySchoolofMedi c i ne 2) s ci ent i f i cl nvest i gat i onLabor at or y,Aomor i Pr e f ect ur alPol i ceHeadquar t er s Cor r es pondence:S. Ts uc hi da Rec ei vedf orpubl i cat i on, May2 ,2 0 05 Acce pt edf orpubl i cat i on,J une2 3 ,2 0 05 1 )国立大学法 人弘前大学 医学部 医学科 生化学第二講座 2 )青森県 警察本部科学捜査研 究所 別刷請求先 :土田成紀 平成 1 7 年 5月 2日受付 平成 1 7 年 6月2 3日受理 36 様 緒 方,土 田 係が無 い青森県 内の 自治体 に勤務す る男性職員 1 8 昌 ミ トコン ドリア内膜 に存在す るア ンカ ップ リン グ プ ロテ イ ン ( UCP) は 熱 産 生 に重 要 な 働 き を してお り,褐色脂肪細胞 に発現す る UCPl,骨格 名 ( 平 均 年 齢 44. 8±8. 5) か ら 口腔 内細 胞 の提 供 を受 けた. この試料 か ら QI AampDNA Mi c r o Ki t( QI AGEN) を用 いて DNA を抽 出 した. 本研 究 は国立大学法 人弘前大学 医学部倫理委員 節, 白色脂 肪細胞,節,心臓 な どに広 く発現す る 会 の承認 を得て いる. UCP2及び骨格筋 に主 として発現す る UCP3の 3 種類 の存在が知 られて いる. UCP2及び UCP3遺 ( 2)Ucp2の遺伝子型 の判定 伝子 は ヒ ト 11番染色体 11 q13に近接 して存在 し は Wal derら1 'の 報 告 に 従 い, プ ラ イ マ ー は てお り, コ-カシア人では UCP2遺伝子 の第 8エ For war d; 5' CAGTGAGGGAAGTGGGAGG3' , Re ver se; 5' GGGGCAGGACGAAGATTC3'を 3'UTR) に 45 ク ソ ンの 3'末 端 の非 翻 訳 領 域 ( i ns er t i on型,457bp bpの挿入 を持つ遺伝子型 ( 型)と欠失す る遺伝子型 ( del et i on型 , 412bp型) の 2種類 の多型 が存在 し,肥満 との関連 が示唆 さ Ucp2の 第 8エ ク ソ ン の 3 'UTR領 域 の 多 型 用 いて PCR を行 い検 索 した.PCR反応液 は終濃 度で, 10mM Tr LHCl( pH 8. 3) ,50mM KCl , れて いるが 1',本邦 にお いては UCP2遺伝子 多型 1 ･ 5mM MgC1 2 ,2 00pM dNTPs, 0･ 1U/F L ITaq Pol ymer as e( Takar a,滋賀), プライマーはそれ の頻度,肥満 との関連 は明 らかではない. ぞれ 10pmol 力止 DNA を 5ng添加 し,全量 25 白色脂肪細胞 と褐色脂肪細胞 に発現す る β3-ア ADRB3) は脂 肪代謝 と ドレナ リン レセ プター ( plの反応 系で行 った.サーマルサイ クラ- として PJ 480 ( パーキ ンエル マー) を用 いて,de nat ur e 熱産 生 に関与 して いる と考 え られてお り,肥満 の i ng66℃ 30秒,ext ens i on 94℃ 1分,anneal 候 補 遺 伝 子 で あ る.ADRB3には 64番 目の ア ミ ノ酸 残基 が トリプ トフ ァンの遺伝子 型 ( Tr p型) t e xt ens i on 72℃ 30秒 を 32サ イ クル 行 い,pos として, 72℃ 7分 を追加 し, 目的 とす る部位 を増 とアル ギニ ンの遺伝子 型 ( Ar g型) が知 られ てお 幅 した. り,外国人集 団 にお いては Ar g型 の遺伝子型 と肥 00V この PCR産物 は 2%アガ ロース ゲル で 1 満及 びイ ンシュ リン非依存性糖尿病 との間 に有意 で 40分 間電気泳 動後, エチ ジウム ブ ロミ ドで染 な相関が報告 されている 2-5' 色 し遺伝子型 を判定 した. 平成 1 6年度 学校統 計調査 結果 概要 によれ ば, ( 3 ) ADRB3の遺伝子型 の判定 青森県 の児童, 生徒 の身長,体重 な どの体格 は 日 ADRB3の 64番 目 Tr p と Ar gの 遺 伝 子 多 型 本国内の上位 に位置 し,特 に体重 は男子 で小学 生 は PCR-RFLP 法 ( Pol ymerase Chai n か ら高校 生 の 7学年で,女子 で も 6学年で 1位 を Reaction-Restriction Fragm ent 占めて いる. 青森県成人 の体格 も上位 に位置 して Length Pol ym orphi sm ) で 行 っ た. いる と考 え られ る. プ ラ イ マ ー は Cl ementら 2)の 報 告 に 従 い, 第 8エ クソ ンの 3 'UTR の遺伝子 多型 を検索 し, For war d; 5' 一 ccAGTGGGCTGCCAGGGG3' , Rever se; 5' GCCAGTGGCGCCCAACGG3'を コ- カ シア人 な どで これ まで に報 告 され て い る 用 いて,Tr p64Ar gの多型部分 を含 む 248bpを増 del et i on型 は検 出されず,代 わ って, これ まで報 i HCl 幅 した.PCR反応液 は終濃度 で 10mM Tr 今 回, 青森県 在住 の成 人男性 につ いて, UCP2 告 のな い新 たな遺伝子型 を兄 い出 し, コ- カ シア ( pH 8. 3),50mM KCl ,1 . 5mM MgC1 2 ,200〝M 人 とは遺伝子型が著 しく異な る ことを明 らか に し dNTPs,0･ lU/I L LTanPol ymer ase ( Takar a), た. さ らに これ らの遺伝子型 と体 重,肥満 な どと プ ライ マ ー は そ れ ぞ れ 1 0pmol /F L l ,DNA を の関係 を検討 した. 5ng添 加 し, 全 量 25plの 反 応 系 で 行 っ た. Denat ur e94℃ 1 分 ,anneal i ng と ext ens i on 72℃ 1分 を 1サ イ ク ル と し て 32サ イ ク ル 材料 と方法 ( 1)試料及び DNA 抽 出 イ ンフォーム ドコンセ ン トが得 られた,血縁 関 行 い,pos t ext ensi on と し て 72℃ 7分 を 追 加 し, 目的 とす る部位 を増幅 した. UCP2遺伝子の新 しい多型 と肥満 p0 0 b 0 0 / L U5 M 1 2 図 1 アンカップリングプロテイ ン ( UCP)2遺伝子の第 8エクソン 3 3'UTR の PCR産物の 2%ア ス電気泳動像. レー ン 1は 457bpのバ ン ドのみを与え,レー ン 2,3は 457bpと 502bpガロー のバ ン ドを与えた.M は DNA マーカーを の 2本 +(5× H)-(6. 8× A)W : 体重 ( k 13. 7× W) 示す. ( 得 られた PCR産物 5匹1に制 限酵 素 Ms p U 加 え全量 を 10I L 1とし, 37℃ で 2時 間反 Iを 5 た. この反 応 液 を 1 0%ポ リア ク リル ア ミ 応 させ で 400V で 1時 間電 気 泳 動 後, エ チ ジ ウ ドゲ ル ミ ドで染色 し遺伝子 型 を判定 ム ブロ H: 身長 ( cm), A: 年齢 37 , g) ( 歳) ( 6) 統 計学 ADRB3の的解析 多 型 あ る い は UCP2の 多 型 と , 皮 下 脂 肪 の 厚 さ, R の 身 長, 体 重, BMI 被験者 脂 肪 率 及 び 脂 肪 量 との相 関 性 につ い て, Ma MR, ( 4)UCP2遺 伝子 の塩基配列 した. 457/502型 の ヘ テ ロ 接 合 体 の 457 の決定 502bpの バ ン ドの 塩 基 配 列 を 決 定 す bp と に, ア ガ ロ ー ス 電 気 泳 動 後, バ ン ドを る た め し て Mi 切 り出 nEl ut eGelExt r act i onKi t( QI AG で 精 製 し, Bi gDyeTer mi nat or sv3. 1Cy EN) Se quenc i ngKi t( Appl i edBi os ys t ems )を用 c l e 両側検定) を行 い,p < 0 Whi t neyの U検定 ( nnの場合 を有意差 あ りと判定 し . 05 結 ( 1)UCP2の新 しい遺 た. 果 UCP2にお け る第 8 エ ク ソ ンの 3'UTR 伝子型 両側 か らダイ レク トシーケ ンス を実施 した いて, す る 45bpの i nser t i on/ del et i onの 遺 伝 に存 在 / 457型 のホモ接合体 につ いて も,. 併せ て, 457 を検 討 した と ころ, これ まで報告 され て いる 子多型 ク トシーケ ンス を行 bp ( del et i on型) と 457bp ( i nser t i on型 412 本 で は な く 457bpと約 500bpの 2本 の ) の 2 ( 5)肥満 ダイ レ った. m) , 体重 ( kg)及 び体格指数 ( B 被験者の身長 の評価 ( MI ) で割 り算 して算 出 した. 皮下脂 肪 の厚 さ ( m の 2乗 を測 定 した. BMIは体 重 ( kg)を身長 ( m) 上腕 三 頭 筋 と側 腹 部 の部 位 で デ ジマ チ ッ m)は 2bpのバ ン ドは検 出され なか っバ ン ド を認 め,41 図 1). これ らのバ ン ドとこれ まで報告 されて た ( 伝子 型 との異 同 を明 らか にす るた め に, ダ いる遺 トシー ケ ンシ ング によ り塩 基配 列 を調 べ た. イ レク ク ロメー タ ー ( Mi t ut oyo, 東 京 ) を用 い クマ イ bpの バ ン ドに は ス トッ プ コ ドン の 3'末 / 2の 数 値 を用 い た. 脂 肪 量 は 体 重 て 計 測 し, 1 111bp下流 の部位 に, CCCACCTCTTCC Tか ら 端 GCTCCTTTACCTACCACCTTCCCTCTTCC TAN 率 を掛 けて 算 出 し, 脂 肪 率 は 脂 肪 計 ( に脂 肪 TBF305,東京 ) で測 定 した. また,安 静 I TA RMR)は 以 下 に示 す Har r i sと Benedi c 率( 時代 謝 6式 + に基 づ い て 算 出 した. RMR ( kcal / day)-t 6 の 457 の 45bpの i ns er t i onが確 認 され, これ ま TTC ns er t i on型 の 457bpのバ ン で報 告 され て い る i o nser t i じで あった.約 500bpのバ ン ドは, i ドと同 38 様 方,土 田 A 412bp 160: TATGAGCAGC TGAAACGAGC CCTCATGGCT GCCTGCACTT CCCGAGAGGC TCCCTTCTGA 457bp -60: TATGAGCAGC TGAAACGAGC CCTCATGGCT GCCTGCACTT CCCGAGAGGC TCCCTTCTGA 502bp -60: TATGAGCAGC TGAAACGAGC CCTCATGGCT GCCTGCACTT CCCGAGAGGC TCCCTTCTGA 412bp 1: GCCTCTCCTG CTGCTGACCT GATCACCTCT GGCTTTGTCT CTAGCCGGGC CATGCTTTCC 457bp 1: GCCTCTCCTG CTGCTGACCT GATCACCTCT GGCTTTGTCT CTAGCCGGGC CATGCTTTCC 502bp 1: GCCTCTCCTG CTGCTGACCT GATCACCTCT GGCTTTGTCT CTAGCCGGGC CATGCTTTCC 412bp 61: TTTTCTTCCT TCTTTCTCTT CCCTCCTTCC CTTCTCTCCT TCCCTCTTTC 一一一1-----I 457bp 61: TTTTCTTCCT TCTTTCTCTT CCCTCCTTCC CTTCTCTCCT TCCCTCTTTC CCCACCTCTT 502bp 61: TTTTCTTCCT TCTTTCTCTT CCCTCCTTCC CTTCTCTCCT TCCCTCTTTC CCCACCTCTT 412bp 121:一一一---一一-I --- -- --- --I------ -I-- --I-- - -- -- -I ------ -- 457bp 121:C dCTTCCGCTC U CTTLACCTAC CACCTTCCCT CTTTC-一一一一 ---- -一一一- --I-----1502bp 121･ .CCTTCCGCTC CTTTACCTAC CACCTTCCCT CTTTCCCCAC CTCTTCCTTC CGCTCCTTTA 412bp 1811 .I---I----- --I------- TACATTCTCA TCTACTCATT GTCTCAGTGC TGGTGGAGTT 457bp 181:一一一----I-- ---I--I--- TACATTCTCA TCTACTCATT GTCTCAGTGC TGGTGGAGTT 502bp 181:CCTACCACCT TCCCTCTTTC TACATTCTCA TCTACTCATT GTCTCAGTGC TGGTGGAGTT 412bp 241: GACATTTGAC AGTGTGGGAG GCCTCGTACC AGCCAGGATC CCAAGCGT■ CC CGTCCCTTGG 457bp 241: GACATTTGAC AGTGでGGGAG GCCTCGTACC AGCCAGGATC CCAAGCGTCC CGTCCCm GG 502bp 241: GACATTTGAC AGTGでGGGAG GCCTCGTACC AGCCAGGATC CCAAGCGTCC CGTCCCTTGG 301: AAAGTTCAGC CAGAATCTTC GTCCTGCCC C 301: AAAGTTCAGC CAGAATCTTC GTCCTGCCCC 301: AAAGTTCAGC CAGAATCTTC GTCCTGCCCC 5' -CCCACCTCTTCCTTCCGCTCCTTTACCTACCACCTTCCCTCTTTC-3' : < - Fl F2 >; 図 2 UCP2遺伝子型の塩基配列.パネル Aは UCP2遺伝子 のス トップコ ドン( 太字の TGA)か ら第 8エクソンの 3' UTR の塩基配列 を示 した.412bpア レルの配列は Wal deretal .( Hum MoIGe net1998; 7: 1 43ト5) か ら引用 した.457bpアレル と 502bpアレルの塩基配列は今回のダイ レク トシーケンシングの結果 による. l et i on型 ( 412bp)に挿入 され た塩基配列 を示 し,波線部分 は PCR に用 いた pr i mer イ タ リック文字 は de に相補的な配列を示す. 1本線の下線部分 と 2本線 の下線部分は挿入 された 45bpを構成する Flと F2と 名付けた部位の塩基配列 を示 した.パネル Bは挿入 された 45bpと Fl,F2の関係 を示 した. の 457b pに, さ らにもう 1個 の 45bpが挿入 さ さ らに, この周辺の塩基配列 を詳細 に検討 した p付 れた もの と判明 した ( 図 2). よって,500b ところ,挿入 されて いる 45b pは,CCCACCTC 近 のバ ン ドは正確 には 502b pであ り, これ まで TTCCTTCCGCTCCTTTACCTACCA の 32bp か らな る F lと,CCTTCCCTCTTTCの 1 3bp に報告のない新規 の遺伝子型 と考 え られた. UCP2遺伝子の新 しい多型 と肥満 ↓ 41 bp ↓ 1 58bp 49 ↓ ↓ Ar g型 41 bp 69bp bp 89bp ↓ 49bp M 図 3 β3-ア ドレナ リンレセ プターの Tr p型 と Ar g1 型の遺伝子型.パネル 2 A3 の矢印は制限酵 位 を示す. 248bpの PCR産物は Ms p I消化によ り Tr p型では 158bp,49bp及び 4素 Ms p Iによる切断部 Ar g型では 89bp,69bp,49bp及び 41bpの DNA 断片 となる.パネル Bは Tr p 1bpの DNA 断片に, アクリルアミ ドゲル泳動像で,レー ン 1,2は Tr p/ Tr p型,レー ン 3は Tr p/ Ar g型, M 型 と Ar g型の 10%ポ リ か らなる F2か ら構成 され レルは挿入 された 45b は DNAマーカーを示す. てお り,457bpのア pの塩基配列の上流側 2の配列 を持 ち, F2F にF ア レルは F2- F ll- F2, 502bpの と F2- F l- F2の構造 を ることが明 らかになった. U cp2第 8エ クソン く存在す る と考 え られた. 青森県在住 の成人男性 に広 ル ( del et i on ( 2) しか し,412bpア レ 型)は観察 されなかった. AA DD RR BB 33 の 遺伝子型の頻度 PCR産物は Ms で は 158bp,49bpと 4 p I消化 によ り Tr p型 のと 457/ 457型のホモ接合体 3'UTR の遺 伝 子 型 は 接合体 の 2つ のタイ プが存在 457/502型 のヘテ ロ 1b Ar g型 で は 89bp,69b p pの DNA 断片 に, 4つ の 断 片 とな った (図 3 ,49bp と 41bpの し,457/ 1 4例,457/502型 が 4例 457型 が ぞれ 0 で,457bpア 502bpア レルの遺伝子頻度はそれ レル, . 89 ,0. ll Tr p64Ar gの遺伝子 多型 は ).ADRB3にお け る で, 502b ア レルは 39 合体が 16p 名で, Tr p/ Ar Tr p/ Tr p型 のホモ接 40 棟 方,土 田 名であった.Tr p型 と Ar g型の遺伝子頻度はそれ BMI , 皮 下 脂 肪 の厚 さ及 び RMR に有 意 な相 関 94,0. 06で,今 まで に報告 され て い る 日 ぞ れ 0. が 報 告 され て い る. 本 邦 にお い て は, UCP2の 本人データに比べ,Ar g型 の遺伝子頻度が低 い値 a55Val , 第 7エ ク ソ ン の 第 4エ ク ソ ン の Al p/ Ar g型が 2例 しか検 出されな であった 6- 8'.Tr Al a232Thrの遺伝 子多型 が報告 1 4 ･ 1 5 )されて いる か ったので,ADRB3の遺伝子多型 と体重,肥満 と ns er t i on/ del et i on多型 について が, この 45bpi の統計学的評価は行わなかった. l derら1)が は報告 がな い.今 回 の研究 では,Wa ( 3)UCP2遺伝子型 と体格,肥満 の関係 指摘 した 457bpの i ns er t i on型 に さ らに同一塩 457/502型 のヘテ ロ接合体 と 457/ 457型 のホ 基配列の 45bpが挿入 された 502bpか らなる新 モ接合体 の成 人男性 の身長,体重,BMI ,上腕三 規 の遺伝子型が,18名の うち 4名 に 457 /502型 頭筋 と側腹部での皮下脂肪 の厚 さ,RMR,脂肪率 のヘテ ロ接合体 として検 出された. また,41 2bp 及び脂肪量の値 を表 1にまとめた. か らなる de l et i on型は観察 されず, この部位 にお 457/502型 のヘテ ロ接合体 と 457/ 457型 のホ ける 日本人の遺伝子多型は, コ-カ シア人 とは異 さ らに,45bpの挿入箇所は, モ接合体 の間で, これ らの値 に有意差があるか, なる と考 え られ MannWhi t neyのU検定 によ り評価 した. 身長, BMI及 び RMR には有意差 を認めなか ったが,体 Wal derらは第 8エ クソンの 3'末端か ら 158番 目 重,上腕三頭筋 と側腹部 での皮下脂肪 の厚 さ,脂 果 か らは 457bp, 502bpア レル とも 111番 目 肪率及び脂肪量はヘテ ロ接合体群で有意 に高値 を で あ った. また, 挿 入 され た 45bpは 32bpか 示 した. らなる F lと,13bpか らなる F2か ら構成 され, 考 としている1 ) が, ダイ レク トシーケ ンシングの結 457bpと 502bpア レル とも挿入部 の上流 に F2 ` 察 配列 をもっ ことも判 明 した. 青森県在住 の成人男性 18名 について,UCP2第 UCP2の 457/502型 の ヘ テ ロ 接 合 体 4例 と 8エクソンの 3'UTRに存在す る 45bpi ns er t i on 457/ 457型 のホ モ 接 合 体 1 4例 の 2群 間 にお い 型 の遺伝子多型 あるいは ADRB3の Tr p型 と Ar g て, 体格 と肥満 に関係するパ ラメータを比較 した. 型の遺伝子多型 と体重, 肥満 との関連 を検討 した. 457/502型のヘテ ロ接合体では体重,上腕三頭筋 UCP2の 45bpi ns er t i on/ del et i on多型 は コ- カ と側腹部の皮下脂肪 の厚 さ,脂肪率及び脂肪量が が見 られ, 有意 に高値 を示 した. この結果 は UCP2の新規 の シア人な どにお いて多数 の報告 1 ･9- 13) 表 1 UcP2の第 8エクソンの 3' UTR における遺伝子多型 と体重,皮下脂肪の厚 さの関係 ホモ接合体 ヘテ ロ接合体 Tot al(n=18) 457/ 457(n=1 4) 457/502(n= 4) 年齢 ( 歳) 45. 3±9. 1 43. 0±7. 0 44. 8±8. 5 身長 ( m) 1 , 69±0. 05 1 . 68±0, 02 1 . 69±0. 05 体重 ( kg) 69. 7±9. 3 82. 9±12. 7* 72. 6±11 , 1 BMI( kg/m2 ) 4±3. 0 24. 29. 2±4. 1 25, 5±3. 7 側腹部 ( mm) 9. 4±1. 7 ll . 7±1 . 4* 9. 9±1 . 9 三頭筋 ( mm) 6. 3±1 . 5 8. 0±1 . 7* 6. 7±3, 7 1 , 550±150 1 , 730±210 1 , 590±180 0. 216±0. 037 0. 275±0. 024* 0. 229±0. 042 15. 2±4. 2 23. 0±5, 3* 1 6. 9±5. 4 皮下脂肪の厚 さ RMR( kc al / day) 脂肪率 脂肪量 ( kg) *はMannWhi t neyのUテス トで危険率 5%で有意差 を認 めた項 目を示す. UCP2遺伝子 の新 しい多型 と肥満 遺伝子型が, 日本人成人男子 の体重,皮下脂肪量 と相関す る可能性 を示唆 して いる. ポ リAの直前 4L J 遺 に位 置す る 3'UTR の多 型 につ いて,SEC1 伝子では mRNA の安定性 または翻訳効率 に影響 を与 える ことが示唆 されて いる 1 6 ) . Ucp2の場合 も 502bp ア レルでは UCP2mRNA の安定性 が 低下 し,UCP2の低下 をもた らす可能性が考 え ら れ るが, この点 については検討が必要で ある.育 森県 の児童,生徒 の体格が優れているが, これ に UCP2の遺伝子型が関与 して いるか,今後検 討す る必 要 が あ る.Wal derら 1',Bouchar dら1 0 )の 報告 によれ ば Ucp2と UCP3は連鎖不平衡 状態 に ある として いる.今 回,UCP2の新規遺伝子 型が 41 1995; 333: 34851. 4)Wal t on ∫ ,Si l verK,Bogar dusC,Knowl erWC, Cel iFS,Aust i n S,Manni ng B,etal . Ti me ofonsetofnoni nsul i ndependentdi abet es mel l i t usand genet i cvar i at i on i nt he β3adr ener gi cr ecept orgene. N EnglJMed 1995; 333: 3437. 5)Gagnon J ,Maur i egeP,Roy S,Sj bst r bm D, ChagnonYC,Di onneFT,Opper t∫ M,etal . TheTr p64Ar gmut at i onoft heβ3adr ener gi c recept orgene hasno ef f ecton obesi t y phenot ypesi nt heQuebecf ami l ys t udy and Swedi s hobes es ubj e c t sc ohor t s .∫Cl i nl nves t 1996; 98: 208693. 発見 された ことか ら, 日本人 にお いて この領域 の 詳細なハ プロタイ プ解析が必要 と考 え られ る. ADRB3につ いては, 日本 人で は Ar g型 の遺伝 子頻度 が 0. 23- 0. 16 6 8 )とされ て いるが,我 々 の検 討では遺伝子頻度 が 0. 06 と少 な い値 を示 し た. しか し, この数値が青森県 人の遺伝子型頻度 を正確 に示 しているか どうかは試料数 を増や して 検討する必要がある. 謝 6)KadowakiH,YasudaK,I wamot oK,Ot abe S,Shi mokawaK,Si l verK,Wal t on ∫ ,etal .A mut at i oni nt heβ3adr ener gi cr ec e pt orgenei s as s oci at edwi t hobes i t yandhyper i ns ul i nemi a i nJ apanes esubj ect s.Bi ochem Bi ophysRes Commun1995; 215: 55560. 7)和賀央子,岩橋和彦,吉原英児,寺島茂,池田和 隆,飴野酒,飴野節子 ら. 日本人における高血圧 辞 DNA試 料である口腔 内細胞 の提供及び身長､ 体重等 の計測 に心 よ く同意 いただいた被験者 の皆 様 に深謝 します｡ 参考文献 1)Wa l °erK,Nor manRA,Hans omRL,Sc hr auwen P,Never ovaM,J enki ns on CP,Easl i ck ∫,et al . Ass oci at i onbet weenuncoupl i ngpr ot ei n pol ymor phi sms( UCP2UCP3)and ener gy met a bol i s m/ obe s i t yi nPi maI ndi ans .Hum MoI Ge ne t1998; 7: 1 431 5. 2)Cl e mentK, Vai s s eC, Manni ngBJ , Bas de vantA, GuyGr andB,Si l ve rKD,Rui z∫ ,e tal .Ge ne t i c var i a t i oni nt heβ3adr ener gi cr ec e pt orandan i ncr e asedcapac i t yt ogai nwei ghti npat i ent s wi t hobes i t y.NEngl∫Med1995; 333: 3524. 3)Wi den E,Leht o M,Kanni nen T,Wal st on J,Shul di nerAL,Gr oop LC. Associ at i on ofapol ymor phi sm i nt he β3adr ener gi c r ecept orgenewi t hf eat ur esoft hei nsul i n r e s i s t ances yndr omei nFi nns .N Engl∫Med 症 とア ドレナ リンβ3受容体遺伝子多型 との関連 に ついて.DNA多型 200 4; 12: 2802. 8)UedaK,Tani z awaY,Oot aY,I noueH,Ki z uki N,I noueH. Pr eval enceoft heTr p64Ar g mi ssensemut at i onoft hebet a3adr ener gi c r e c e pt orgenei nJ apanes es ubj ec t s .Met a bol i s m 1997; 46: 199202. 9)YanovskiJA,Di amentAL,Sovi k KN, NguyenTT,LiH,Sebr i ngNG,War denCH. Associ at i onsbet ween uncoupl i ng pr ot ei n 2,body composi t i on,and r est i ng ener gy expendi t ure i nl ean and obese Af ri can Amer i can,whi t e,andAs i anchi l dr en.Am J Cl i nNut r2000; 71 : 1 40520. 10)Bouc har dC,Per us s eL,ChangnonYC,War den C,Ri c qui e rD.Li nkagebet wee nmar ke r si nt he vi c i ni t yoft heunc oupl i ngpr ot ei n2geneand r es t i ngmet abol i cr at ei nhumans .Hum MoI Ge ne t1997; 6: 18879. ll)Eva nsD,Mi nouchehrS,HagemannG,Mann WA,We ndtD,Wol fA,Bei s i egelU.Fr equenc y ofandi nt er act i onbet ween pol ymor phi sms i nt hebet a3adr ener gi crecept orand i n 42 様 方,土 uncoupl i ngpr ot ei ns1and2andobes i t yi n Ger mans. I nt∫ObesRel atMet ab Di sor d 2000; 24: 123945. 12)Duar t eNL,Col agi ur iS,Pal u T,Wang XL, Wi l cken DE. A 45bp i nser t i on/del et i on pol ymor phi sm ofuncoupl i ng pr ot ei n 2i n r el at i on t oobesi t yi n Tongans.ObesRes 2003: ll : 5127. 13)Cassel lPG,Never ovaM,Janmohamed S, UwakweN,Qur es hiA,McCar t hy MI ,Saker PJ,etal . An uncoupl i ng pr ot ei n 2gene var i anti sas s oc i at edwi t har ai s edbodymas s i ndexbutnott ype Ⅱdi abet es .Di abet ol ogi a 1999; 42: 68892. 1 4)Kubot aT,Mor iH,Tamor iY,OkazakiH, FukudaT,Mi kiM,I t oC,etal . Mol ecul ar 田 scr eeni ng ofuncoupl i ng pr ot ei n 2genei n pat i ent swi t hnoni ns ul i nde pendentdi a bet es mel l i t usorobes i t y.JCl i nEndoc r i noIMet ab 1998; 83: 28004. 15)Shi i nokiT,Suehi r oT,I kedaY,I noueM, Nakamur aY,KumonY,NakauchiY,etal . Scr eeni ng f orvar i ant soft heuncoupl i ng pr ot ei n 2genei nJ apanesepat i ent swi t h noni nsul i ndependentdi abet esmel l i t us. Me t a bol i s m 1999; 48: 581 4. 16)Chi nenK,Takahas hiE,Nakam r aY.I s ol at i on andmappi ng ofahuman gene( SEC14L) , par t i al l y homol ogoust oyeastSEC14,t hat c ont ai nsavar i a bl enumberoft ande mr e peat s ( VNTR)si t ei ni t s3'unt r ansl at edr egi on. Cyt oge netCel lGe net1996; 73: 21823. u
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