第 3 回関西生殖医学集談会 2015.03.07、大阪 DMSO-free ガラス化凍結試薬の生存性について大浦朝美 1)、濱聡子 1)、佐藤学 1)、橋本周 1)、中岡義晴 1)、森本義晴 2) 医療法人三慧会 1)IVF なんばクリニック、2)HORAC グランフロント大阪クリニック目的本邦で使用される凍結保存液の大半に DMSO が含まれている。一方で、DMSO は細胞の分化誘導に使用されること、一過性の細胞内 Ca++の上昇を引き起こすことが知られており、DMSO の凍結保護剤としての可否がしばしば議論されている。そこで生殖医療におけるリスク低減を目的とし DMSO-free のガラス化凍結試薬を用いて生存性の検討を行ったので報告する。方法廃棄および研究に同意が得られた 33 症例 49 個の凍結良好胚盤胞を対象とし、比較検討の凍結融解液には北里バイオファルマ社（K：Vitrification Media、Thawing Media）と Vitrolife 社(V：RapidVit Blast＝DMSO-free、RapidWarm Blast)を使用した。デバイスには全て Rapid-i を用いた。49 個の凍結胚盤胞全てを K で融解後、25 個を K、24 個を V で再凍結融解した後、Propidium iodide、Hoechst 33342 を用いて蛍光二重染色し、総細胞数および死細胞数を蛍光顕微鏡で観察し、死細胞率を比較した。結果採卵時患者年齢は K 群 32.8 歳、V 群 31.6 歳と有意差はなかった。比較検討に用いた凍結胚盤胞を Blastocyst Quality Score（BQS）法で数値化した結果、K 群 21.6、V 群 22.2 と両群に有意差はみられなかった。死細胞率は K 群 12.4％、V 群 20.0％と V 群で高い傾向はあったが差はみられなかった。考察凍結融解後の死細胞率に差はなく、凍結融解の過程での影響は本検討では認められなかったことから DMSO-free のガラス化凍結試薬は有用であると考えられた。今後、発生率や妊娠率も検討し、臨床応用につなげていきたい。