10 遺伝子改変動物モデルから探る多形型横紋筋肉腫のオリジン ○鈴木昇、斉藤浩充 （三重大学生命科学研究支援センター・機能ゲノミクス分野・動物機能ゲノミク ス部門） 「はじめに」 ヒト多形型横紋筋肉腫（pleomorphic rhabdomyosarcomas, pRMS と略記）は、 成人の骨格筋に原発し極めて予後不良を呈する希少癌である。希少性ゆえに、こ れまで、pRMS の発生メカニズムや有効な治療法も未解明である。これまで、私 たちは、Cre/Lox システムを応用して pRMS 動物モデルの開発し、癌型 K-ras 遺 伝子発現とｐ５３遺伝子機能欠損との協調によって、マウスの大腿骨格筋に pRMS が発生することを示し、病態を解析してきた。今回は、細胞株を樹立し pRMS オリジンについて考察を試みた。 「方法と結果」 floxK-rasG12Vp53-/-マウスの大腿骨格筋に Cre 発現プラスミドをエレクトロポレ ーションで導入し、約 10 週後に pRMS を得た。これをトリプシン処理して、DMEM ＋10％FCS 培地で培養し、細胞株 RMS3 を得た。RMS3 は、皮下移植により pRMS を形成し、また、静脈経由の移植によって肺に転移性コロニーを形成した。この 転移性コロニーを培養し、限界希釈法によって、細胞株 RMS310 を得た。さらに、 GFP 発現レトロウィルスをトランスデュースした RMS3 の肺転移性コロニーを株 化した細胞株 RMS3g2 を得た。各細胞株の RNA を抽出し、これまでに報告され ている筋再生をつかさどる細胞集団に特異的なマーカー遺伝子の発現組み合わせ を RT-PCR 法にて調べた。結果、幹細胞抗原 Sca1、CD34、PDGF 受容体α型、メ タロプロテアーゼ Adam12、間質細胞マーカーTCF4 の組み合わせの遺伝子が発現 していた。正常な筋再生の主役であるサテライト細胞のマーカーPax7 および Myf5 はいずれも発現を認めなかった。また、CD45 も陰性であった。 「考察」 したがって、floxK-rasG12Vp53-/-マウスに誘導さえる pRMS のオリジンは非骨 髄由来の間葉系幹細胞である可能性が示唆された。
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