CHEMOTHERAPY

CHEMOTHERAPY
1040
NOV.1991
白血球遊走阻止試験による抗結核剤過敏症の検討
宇野
勝次1)・八木
元広1)・関根
1)水原郷病院薬剤科*
理2)・山作房之輔3)
2)水原郷病院内科
3)新潟西保健所
(平成3年7月10日
受付・平成3年8月21目
受理)
抗結核剤過敏症疑診患名を対象に,白血球遊走阻止試験(LMIT)に
定を試み,抗結核剤過敏症におけるLMITの
有用性,な
よる原因藁剤の検出同
らびに遅延型過敏反応(DTH)の
与について検討した。過敏症疑診患者は,男性11例,女
性6例
機能障害5例,発
の計17例
で,全例50歳
であり,過敏症状は,皮
膚症状9例,肝
例,血
小板減少1例(各
症状は重複)で
い,各
薬剤の抗原濃度はisoniazide(INH)とethambutol(EB)が50μg/ml,rifampicin
あった。LMITは,ア
(RFP)が10μg/mlに
調製した。LMITは,88%の
(LMAF)を71%,白
血球遊走阻止因子(LMIF)を29%検
有意(P<0.01)に
他の2剤
%に対してLMAFを59%検
出し,LMAFを
役割を演じていると考えられる。また,抗
Key
words:抗
候群1
ガロース平板法の間接法を用
血球遊走促進因子
出し,LMIFに
比べLMAFを
性率は,INHが12%,RFPが65%,
に比べて有意に高い陽性率を示した。また,RFPはLMIF6
有意(P<0.0005)に
果から,抗結核剤過敏症の原因薬剤検出にLMITは
よるDTHにLMAFの
以上
臓炎1例,PIE症
高い陽性率を得,白
高く検出した。各薬剤のLMIT陽
EBが31%で,RFPが
RFPに
熱5例,肺
関
高く検出した。以上の結
有用であり,その発現にDTHが
結核剤の中でRFPが
主要な
最もアレルギー原性が高く,
関与が高いことが示された。
結核剤,遅
延型過敏反応,白
血球遊走促進因子,白
血球遊走阻止因子,薬
剤ア
レルギー
現在,結
核の化学療法は,軽
とrifampicin(RFP)の2剤
とethambutol(EB)の3剤
る。ここで,軽
り,そ
LMIFの
症例がisoniazide(INH)
併用,重
視できない問題が抗結核剤の過敏症であ
クタム剤過敏症の原因薬剤検出同定に
白血球遊走阻止試験(leucocyte
(delayed-type
有効であり,そ
演じ,白
ing
inhibitory
inhibition
の発現に遅延型過敏反応
主要な役割を
血球遊走促進因子(leucocyte
factor,LMAF)お
tion
migration
hypersensitivity,DTH)が
migration
activat-
よび阻止因子(leucocyte
factor,LMIF)の
migra-
両因子が関与している
結核剤過敏症疑診患者を対象にLMITに
る原因薬剤の検出を試み,抗
の有用性と,そ
料
と方法
象患者および被疑薬剤
抗結核剤過敏症疑診患者は,Table
が50歳
性11例,女
性6例
の計17例
1に示すよう
で,年齢では全例
以上であった。
被疑薬剤は,Table
が17症
1に示すように,INHとRFP
例全例に関与し,EBが13症
なお,Table
1に示す17例
例に関与した。
の患者は,抗
の薬剤も投与されていた症例もあるが,臨
結核剤以外
床経過(数
年来服用している薬剤や過敏症発現後に服用しても異
状を認めなかった薬剤など)か
ら,抗結核剤以外が被
疑薬剤と考えられない症例である。
ことを明らかにした1∼3)。
そこで,抗
1.対
に,男
化学療法にとって重要な課題である。
test,LMIT)が
I.材
併用療法が大勢を占めてい
の原因薬剤の検出ならびに発現機構の解明は適正な
著者らは,β-ラ
両因子の関与について検討し,さらに各抗結核剤
のアレルギー原性について検討した。
症例がINH,RFP
結核剤過敏症におけるLMIT
の発現におけるDTHな
*新潟県北蒲原郡水原町岡山町13-23
らびにLMAFと
よ
2.LMIT
LMITは
β-ラクタム剤過敏症の原因薬剤検出に応
用した方法1)に従い,ア
ガロース平板法の間接法を用
aM
VOL.39
Table 1.
: male, bF:
INH,
Patients
with
suspected
hypersensitivity
RFP,
rifampicin;
agents
EB, ethambutol.
リンパ球を採取し,Hanks'balanced
洗浄後,細
salt solution
血清と10mM
HEPES-
buffer添加のTC-199meduim,Gibco)に
このリンパ球浮遊液800μlに
した被験者血清100μlと
抗原液200μl(非
清液を採取し,-20℃
食塩水と混合し,37℃,約1時
の5%デ
走用白血
なるように浮遊
つ分注し,
37℃,湿度100%で24∼48時
間培養後,イ
ミノビュ
ーワーで白血球の遊走野の面積を測定した。
判定に関しては,各
の平均
range,NR)
がNRよ
りも低値をLMIFの
り
検出と
者とも陽性とした1∼3)。
= migration
/ migration
from normal
human
(%):
area in medium
with drug
area in medium
without
drug
×100
(1)
MI of leucocytes
=
migration
/ migration
from patient
area in supernate
area in supernate
(%):
with drug
without
drug
×100
血球層の
ガロース添加の培養液で作成したアガロー
径3mm)に7μlず
より求め,こ
より求めた被験者のMI値
MI of leucocytes
常人
球とした。この遊走用白血球をさきに分離保存した上
ス平板の各ウエル(直
し,両
混合
により顆粒球を
採取し,赤血球の溶血および洗浄を行い,遊
清液に細胞数が2.5×105cells/μlに
とし,(2)式
動化
キストラン生理
間放置後,白
上清液を採取して,Ficoll-Paque液
を(1)式
正常範囲(normal
間培養後,上
に凍結保存した。次に,正
のヘパリン加末梢血を1/4容
index,MI)値
値 ±2SD(n=6)を
浮遊した。
試験薬剤溶液100μlの
液)を加え,回転培養器で37℃,72時
tion
高値をLMAF,NRよ
胞数を1.25×106cells/mlに
調製して培養液(10%馬
し,1%ア
to antituberculous
female,
isoniazid;
いた。すなわち,被験者のヘパリン加末梢血をFicoll
-Paque液(Pharmacia)を
用いた比重遠心法により
(HBSS)で
1041
抗結核剤過敏症
NO.11
薬剤を溶解した培養液に浮遊し
た正常人白血球について上記の方法で遊走試験を行
い,各薬剤に対する正常人白血球の遊走指数(migra-
(2)
被疑薬剤の抗原調製では,INHお
をHBSSに
HBSSで
溶解し,RFPは
よびEBは
原末をethanolに
原末
溶解し
希釈して抗原濃度に調製した。各薬剤の抗
原濃度は,亀
として,3種
750mgで
谷の1回
あるから,各
250μg/ml)に
Table2に
投与量の1/5,000/ml4)を
類の抗結核剤の1回
薬剤の3段
指標
投与量は約100∼
階濃度(10,50,
おける白血球の遊走指数を検討し,
示すように白血球の遊走に影響を与えない
(MIの
平均値が95∼105の
度,す
なわちINHお
範囲内である)最
よびEBは50μg/ml,RFPは
高濃
*
CHEMOTHERAPY
1042
Table
2, Migration
indices
ous concentrations
indicates
tion
mean•}2
indices
INH,
in
isoniazid;
10μg/mlと
humans
(n=6)
of
RFP,
rifampicin; EB,
suspected
hypersen-
agents
migra-
した。
果
示すように,皮
麻疹型1例),肝
肺臓炎1例,PIE症
疑診患者17例
の過敏症状は,
膚症状が9例(紅
斑型8
機能障害が5例,発
候群1例,血
状は重複している)で
に,9日
with
to antituberculous
ethambutol.
抗結核剤過敏症疑診患者17例
例,蕁
agcnts
leucocyte
in patients
sitivity
humans.
II.結
Table1に
Table
3. LMIT
at vari
of antituberculous
SD
normal
of normal
NOV.1991
熱5例,
小板減少1例(各
症
あった。
の潜伏期間は,Table1に
間以内が無く,10∼14日
示すよう
が5例(29%),
15∼28日
が6例(35%),29∼56日
が5例(29
%),57日
以上が1例(6%)で,15日
以上が70%
以上を占めた。
疑診患者17例
た。なお,医
のLMITの
結果をTable3に
の倫理上の問題から疑診患者17例
して負荷試験は実施していないが,LMIT陰
a N:
negative,
示し
ing
factor,
に対
factor, dNormal
性薬剤
gration
INH,
bLMAF:
leucocyte
cLMIF:
range:
indices
in
isoniazid;
migration
leucocyte
mean•}2
normal
RFP,
activat-
migration
SD
inhibitory
n=6
of
mi-
humans.
rifampicin;
EB,
positive
LMIT
ethambutol.
については再投与をしている。その結果,LMIT陽
性薬剤を検出した15例
の患者ではLMIT陰
性薬剤の
Table
4.
Proportion
再投与を開始しても過敏症状は呈しなかった。また,
with
LMIT陽
berculous
性薬剤を検出しなかった症例6と9の2例
の患者では,抗結核剤3薬
る発熱を認め,他
次に,17例
し,症
示すように,LMITの
antitu-
agents
示した。
出し(た
にLMAFを
にLMAF,他
検出した),LMAFを
の1剤
有意(p<0.01)に
高
だし,
検出
にLMIFを
a: siginificantly
different
(p<0 .01).
ALMAF: leucocyte
migration
activating
a
bLMIF:
case,
with
過敏症疑診患者17例
leucocyte
LMAF
高く検出し
た。
was
and
migration
detected
LMAF
with
was
EB in another
inhibitory
both
detected
RFP
with
factor
factor
,
.
and EB * in one
RFP
and
LMIF
case.
における各被疑薬剤のLMIT
陽性率をTable5に
示した。INHは12%,RFPは
65%,EBは31%の
陽性率(た
出した)を
示し,RFPはINHと
だし,Table3に
示
0.0001)も,EBと
にLMAFを
検
陽性率を得た。また,RFPは,LMIF
検
LMAFを59%検
すように症例8はRFPとEBの2剤
出し,症
patients
to
よ
陽性率は88%と
示すように症例8は2剤
例16は1剤
17
陽性率お
検出率をTable4に
く,LMAFは71%,LMIFは29%検
Table3に
in
hypersensitivity
の薬剤による異常は認めなかった。
の過敏症疑診患者のLMITの
よびLMAFとLMIFの
Table4に
剤を再投与し,INHに
of
suspected
例16はRFPにLMAF,EBにLMIFを
比べて(p<
比べて(p<0.05)も
出し,LMAFを
有意に高い
6%に
対して
有意(p<0.0005)
VOL.39
NO.11
抗結核剤過敏症
Table
5.
a: significantly
LMIT-positive
different
LMAF: leucocyte
hibitory factor.
rates
(p<0.05),
migration
with
1043
three
antituberculous
b: significantly
activating
different
factor, bLMIF:
agents
(p<0.0005).
leucocyte
a
migration
in-
LMAF *was detected with both RFP and EB
in one case, and LMAF was
detected with RFP and LMIF with ER in another case .
INH, isoniazid; RFP, rifampicin; EB, ethambutol.
に高く検出した。さらに,RFPは,INHやEBに
べても有意(p<0.0005)に
比
高くLMAFを
検出し
た。
く,30日
ば,同
III.考
著者らは,β-ラ
察
してLMITに
よる原因薬剤の検出を試み,76%(68
例)にLMIT陽
性薬剤を検出し,31%(28例)に
にLMIT陽
に対
熱の潜伏期間が10日
では,88%(15例)
出した。したがって,β-ラ
がって,抗
だし,複数
で,肝
機能
のような場合がある)1)。した
結核剤過敏症の潜伏期間は,β-ラ
この理由には,二
性薬剤を検出し,LMAFを71%,
LMIFを29%検
あった(た
クタム
剤過敏症に比べかなり長いことが示唆される。
検出した1)。今回
の抗結核剤過敏症疑診患者17例
一症例で,発
障害の潜伏期間が14日
クタム剤過敏症疑診患者90例
LMAF,44%(40例)にLMIFを
以上がわずか1%で
の過敏症状を発現した症例は重複している。たとえ
クタム剤
つの要因が考えられる。LMIT
により原因薬剤を検出した15例
の抗結核剤過敏症患
者は,平
均年齢が62.9歳
かも全例が50歳
上,60歳
以上が80%も
たがって,患
で,し
以
占めている高齢者である。し
者自身の免疫能が低下していると考えら
過敏症以上に抗結核剤過敏症の原因薬剤検出に
れる。すなわち,抗
LMITは
主要な役
い要因の一つは,過敏症患者自身が高齢で免疫能が低
割を演じていると考えられる。また,抗結核剤過敏症
下しており,容易に感作が成立しないためと考えられ
疑診患者は,LMIFに
る。他の一つは,抗
有効であり,そ
(p<0.01)に
の発現にDTHが
比べLMAFの
高く,β-ラ
検出率が有意
クタム剤過敏症疑診患者と
比べても有意(p<0.001)にLMAFの
結核剤過敏症患者の潜伏期間の長
結核剤自体の免疫原性あるいはア
レルギー原性が,β-ラ
クタム剤に比べ低いと言う点
検出率が高
である。しかしながら,抗
結核剤(特
関与が高い
る)過敏症の発現率は,炉
ラクタム剤過敏症に比べ
い。これは,抗結核剤過敏症にLMAFの
ことを示唆している。
始から過敏症発現までの期間)が
伏期間(薬
剤投与開
験等でさらに検討する必要があるが,結
全例10日
以上であ
DTHの
り(以前に感作が成立していれば3日以内に過敏症状
ることから,結核菌感染症が高齢者(免
前に抗結核剤の投与を受
た生体)に
けたことがないことから,今
回の抗結核剤の服用によ
り感作が成立したものと考えられる。また,LMIT
で,15日
LMIT陽
の患者の潜伏期間は,平
未満が27%と
が33%で,30日
なわち抗結核剤によりDTH
少なく,15日
以上も33%を
均31.8日
以上30日
未満
占めた。一方,
性薬剤を検出した β-ラクタム剤過敏症患者
68例の潜伏期間は,平
均11.0日
で,15日
未満が85
%と大半を占め,15日
以上30日
未満が14%と
少な
核菌自体が
高い免疫原性とアジュバント作用を持ってい
を呈すると考えられる),以
が成立した15例
よ
て決して低くはない。この点については,今後動物実
17例の過敏症疑診患者は,潜
陽性薬剤を検出した,す
にRFPに
おける抗結核剤(免
い抗原)のDTHの
疫能の低下し
疫原性のあまり高くな
誘発を高めている可能性も考えら
れる。
各結核剤のLMITの
RFPが65%,EBが31%で,RFPが
陽性率は,INHが12%,
他の2剤
より
有意に高い陽性率を示した。したがって,RFPが3
剤の中で最もアレルギー原性が高いと考えられる。ま
た,RFPはLMAFを59%も
か6%し
検出し,LMIFを
わず
か検出してない。すなわち,RFPに
よる
DTHはLMAFの
関与がきわめて高く,抗結核剤過
敏症におけるLMAFの
関与の高さはRFPに
ている。著者らは,LMAFはDTHの
後期(感
期間が長い場合)に
作程
1)
産生され,
免疫原性
2)
過程をどこかでブロッ
かしながら,LMIT陽
例6と9は,INHの
K,
- reactivity
薬剤による異常は認めなかったことから,INHに
る過敏症状がDTH以
によるacetylisoniazideと
このacetylhydrazineが
5)
生体内高分子と共有結合を作
けではないと考えられる。
drugs
to ƒÀ-lactam
Chemother.
24:
in
antibi241-250,
in
F: Structural
correlation
of ƒÀ-lactam
antibiotics
hypersensitivity.
- Cross
hypersensitivity
group
Chemother.
in
the
24:
to
C-3
side
cephems
chain.
251-264,
with
in
- alien
with
J.
a
Antimi-
1989
宇野勝次: 白血球遊走促進及び阻止因子の検出から
1990
亀谷麟与隆: 薬物による肝炎,
肝炎をめぐる諸問題。
日本医学会総会会誌S
53: 1157∼1160,
Mitchell
Timbrell
J R,
J A,
Thorgeirsson
U P, Black
M,
Snodgrass
W R, Potter
W Z,
Jollow D J, Keiser H R: Increased
incidence
of
isoniazid
hepatitis
in rapid
acetylator: pssible
relation
to hydrazine
metabolites.
Clin. Phar-
り易く,肝細胞障害を発現することが報告されてい
によるDTHだ
leucocyte
allergenic
1975
なり,
る5,6)。したがって,INHの
代謝産物によるアレルギ
ー原性も充分考えられ ,INH過
敏症がINHそ
のもの
type
第19回
らに酸アミダーゼ
acidとacetylhydrazineに
hypersensitivity
ルギー 39: 1605∼1611,
4)
よ
体内でアセチル化酵素
なり,さ
of
of
みた β-ラクタム剤過敏症の発現機構の検討。アレ
外の発現機序もある可能性が示
唆される。また,INHは,生
によりisonicotinic
crob.
3)
性薬剤を検出できなかった症
の
detection
Yamasaku
tetrazolyl
よる
再投与による発熱を認め,他
to
Antimicrob.
cross
genicity
性率は12%で,INHに
J.
Uno
り,動物実験等で更に検討する必要があると考える。
比べきわめて低率と考えられる。し
with
F: Application
1989
delayed
INHのLMIT陽
献
Yamasaku
tests
otics.
クするのかが示唆される。この点も興味ある問題であ
DTHはRFPに
K,
patients
作程度が強いか抗原の感作
るいはDTHの
Uno
migration
産生されることをすでに明らかに
している2,3)。したがって,RFPはDTHの
が低いのか,あ
文
起因し
前期(感
度が弱いか抗原の感作期間が短い場合)に
LMIFはDTHの
NOV.1991
CHEMOTHERAPY
1044
macol.
6)
Timbrell
Ther.
18: 70-79,
J A, Wrigth
1975
J M,
Baillie
T A: Mono-
acetylhydrazine
as a metabolite
of isoniazide
in
man. Clin. Pharmacol.
Ther. 22: 602-608,
1978
VOL.39
NO.11
1045
抗結核剤過敏症
STUDIES
ON ANTITUBERCULOUS
BY LEUCOCYTE
AGENT-INDUCED
MIGRATION
HYPERSENSITIVITY
INHIBITION
TEST
Katsuji Uno, Motohiro Yagi
Pharmacy, Suibarago Hospital, Okayama-cho 13-23, Suibara-machi,
Kitakanbara-gun, Niigata 959-21, Japan
Osamu Sekine
Department of Internal Medicine, Suibarago Hospital
Fusanosuke Yamasaku
Niigata nishi Health Center
In
17
patients
genic
drugs
LMIT
and
sitivity
suspected
were
the
all
5 of
by
cases
over
1 of
factor
(LMAF)
LMAF
being
antituberculous
rate
LMAF
of
being
LMIT
found
is valuable
DTH
allergenicity
plays
in
leucocyte
three
a
was
detecting
major
antituberculous
12%
for
LMAF
in
the
agents,
often
INH,
65%
and
LMIF
pathogenesis
while
often
in
and
than
in
detected
LMIT-positive
for
at
59%
LMIF
Our
this
is
highly
in
EB,
and
The
for
activat-
71%
and
29
rate
(RFP
having
6%,
with
findings
for
the
RFP,
indicate
that
patients,
hypersensitivity.
involved
cases
10ƒÊg/ml
migration
The
31%
1 of
the
method.
were
LMIF
9 females,
and
extent
and
Leucocyte
of
hepatopathy,
syndrome
(EB),
cases.
detected
and
5 of
some
aller-
hypersen-
antituberculous-agent-hypersensitive
of
LMAF
RFP
for
agarose-plate
(LMIF)
than
for
to
the
evaluation
males
eosinophilia
indirect
17
were
more
drugs
all
11
ethambutol
factor
more
causative
an
or
for
inhibitory
(p<0.0005)
the
role
88%
(p<0.01)
drugs).
using
The
eruptions,
overlapped
(INH)
was
migration
significantly
in
performed
of
investigated
was
skin
with
symptoms
isoniazide
rate
of
identities
(LMIT).
were
distribution
9 cases
infiltration
allergic
was
for
sex
of
the
test
(DTH)
overall
pulmonary
LMIT
significantly
agents,
inhibition
consisted
of
50ƒÊg/ml
agent
the
of
LMIT-positive
and
found
The
categories
An
The
migration
These
1
antituberculous
hypersensitivity
agents.
the
was
to
leucocyte
pneumonititis,
(RFP).
highest
old.
symptoms.
%,
and
50
concentration
ing
each
years
by
Also,
concomitant
rifampicin
delayed-type
antituberculous
were
pyrexia.
antigen
of
determined
thrombocytopenia.
with
hypersensitivity
involvement
induced
and
of
RFP
in
DTH
has
induced
the
by
highest
RFP

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