ORFV Attenuierung und Immunmodulation

Molekulare Mechanismen der ORFV
Attenuierung und Immunmodulation.
ORFV Vektorvakzine induzieren eine exzellente, protektive Immunantwort in Wirten, die für
ORFV nichtpermissiv sind. Die Ursachen der fehlenden Virusproduktion in solchen
Wirtszellen sind unbekannt. Untersuchungen zum Einfluss der ORFV-Infektion auf
intrazelluläre Signalwege wurden begonnen. Von besonderem Interesse sind hierbei die
kürzlich beschriebenen ANK-Gene des ORFV als potentielle Bindungspartner der NFκB
Transkriptionsfaktoren. Diese Gene wurden isoliert kloniert und als EGFP-Fusionsproteine
exprimiert, um deren intrazelluläre Lokalisation zu prüfen.
Die Adaptierung des ORFV in bestimmten Kulturzellen (Vero) resultiert in einer deutlichen
Reduktion der Virus-Virulenz unabhängig vom ORFV VEGF-E (vascular endothelial growth
factor) Gen. Vergleichende Genomanalysen zweier zellkultur-adaptierter ORFV- Stämme
(D1701-B, D1701-V) und Wildtyp-ORFV zeigte die Deletion weiterer neuer Virusgene.
Im Mausmodell untersuchen wir nach Immunisierung mit ORFV und ORFV-Rekombinanten
sowohl die angeborene als auch die adaptive Immunabwehr. Neben funktionellen Tests (z.B.
natural killer Tests, Proliferationstests nach in vitro Re-Stimulierung von Milzzellen) werden
mittels ELISA die Induktion verschiedener Cytokine zu verschiedenen Zeitpunkten nach der
Immunisierung bestimmt.
Veröffentlichungen:
Cottone, R., M. Büttner, B. Bauer, M. Henkel, E. Hettich and H.-J. Rziha. 1998. Analysis of
genomic rearrangement and subsequent gene deletion of the attenuated Orf virus strain D1701.
Virus Res. 56, 53-67.
Meyer, M., C. Lanz, M. Clauss, A. Lepple-Wienhaus, J. Waltenberger, H.G. Augustin, M. Ziche,
M. Büttner, H.-J. Rziha and C. Dehio. 1999. A novel vascular endothelial growth factor encoded
by Orf virus, VEGF-E, mediates angiogenesis via signalling by VEGFR-2 (KDR) but not
VEGFR-1 (Flt-1) receptor tyrosine kinase. EMBO J. 18, 363-374.
Rziha, H.-J., M. Henkel, R. Cottone, B. Bauer, U. Auge, F. Götz, E. Pfaff, Röttgen, M., Dehio, C.
and M. Büttner. 2000. Generation of recombinant parapoxviruses: Non-essential genes suitable
for insertion and expression of foreign genes. J. Biotechnol., 83, 137-145.
Rziha, H.-J., Bauer,B., Adam, K.-H., Röttgen, M., Cottone, R., Henkel, M., Dehio, C. and
Büttner, M. 2003. Relatedness and heterogeneity in the near-terminal end of the genome of a
parapoxvirus bovis 1 strain (B177) compared to parapoxvirus ovis (Orf virus). J. Gen. Virol. 84,
1111-1116.

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