Title
Steroid Alcohol の測定法に就て
Author(s)
細井, 稔; 神戸川, 明
Citation
金沢大学結核研究所年報 = Annual report of the Research Institute of
Tuberculosis, Kanazawa University, 16(1): 135-144
Issue Date
1958-06-20
Type
Departmental Bulletin Paper
Text version
publisher
URL
http://hdl.handle.net/2297/41225
Right
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http://dspace.lib.kanazawa-u.ac.jp/dspace/
135
SteroidAIcoholの測定法に就いて
帝国臓器製薬株式会社研究部
（部長：薬学博士新延信吉）
金沢大学結核研究所薬理製剤部
(主任：伊藤亮教授）
細
井
稔
神 戸 川 明
（受付：昭和33年1月6日）
’一二巨
緒、
生体Steroidの化学的測定法に関しては，
SteroidAlcoholを酢化し，次に生成した酢化
C17位にKeto基をもつ17-Ketosteroidや
物にアルカリ性でHydroxylamineを反応ざ
側鎖にa-ketol基をもつCorticoid等の如
せAcetohydroxam酸を分離せしめ，最後に
く，その分子中に特有な反応基をもつものの場
第二鉄イオンで赤紫色のAcetohydroxam酸
合には，測定も比較的容易であって，今日迄に
鉄にして比色定量するものであって，原理的に
種々な検出定量法が研究報告されている．しか
はHydroxam酸による水酸基-OHの定量法
し,この様な特異反応基をもたない例えば所謂
を利用した方法である．
NeutralNon-ketonicSteroidAlcoholと称
されているSteroid類の様なものでは，簡易
な特異的検出法がない為に，従来は殆んど臨床
検査の対象外にあることが多かった．しかるに
最近，これらNon-ketonicSteroidAlcohol
及びalcohl基含有の一部Keto-steroidをも
含めたSteroidAlcohol(又はHydroxysteroid)群の尿中排泄量の消長がSteroidホルモ
ピリヂン
ROH+(CH3CO)20−→
CH3COOR+CH3COOH
NaOH
CH300R-I-NH20H−→
CH3CONHOH-￨-ROH
＋＋十
3CH3CONHOH+Fe−→
(CH3CONHO)3Fe+3H+
Hydroxam酸生成法を応用した定量法には
ンの代謝，引いては性腺や副腎皮質等の内分泌
Lipmann等3)のAcetylphosphate定量法を
器管の機能状態の検知や疾病の診断上，極めて
重要な意義をもつものであることが論ぜられる
初めとして，その他種々エステル類9)10)11)12)や
アミド'3)の測定に関する研究がある．
様になった為，こ上にSteroidAlcoholの検
Hydroxam酸法が−OH基の定量に応用し
出・定量に関する研究が相次いで報告されるに
得ることはHill9)によってリポイドの定量実験
至った．即ち，三塩化アンチモン法')無水フタ
で実証されたのであるが，その後Zaffaronil4)
ール酸法2)，無水コハク酸法3)･'),Dinitromlth-
が本法をDesoxycorticosteroneの定量に利
alate法5),Dinitrobenzoate法6)等があるが
用し，次いでEngel7)15)が之をSteroidAlc-
何れも感度が低く臨床検査法としては尚十分で
oholの一・般定量法としたのである．著者等は
はないEngel7)は1954年Acetohydroxam酸
本法を更に詳細に検討し種々反応条件の吟味改
法を発表した．本法は3段階より成り，第一に
良を行ったのでその結果を報告する．
｝
136
細井・神戸川
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実験必要な試薬類及び器具
試薬：何れもJIS特級を用う.e.5N-HaOH
1
f.塩化鉄，塩素酸カリ試薬……0.06gのKCIO3･
董
縦
苧
ヂ
ﾝ
￨
…
…
再
溜
精
製
し
た
も
の
6H200.5gmを溶解させる．
c・無水酢酸・ピリジン混液.….､使用前に酢酸とピg.Dehydroepiandrosterone標準液…Dehydroepian-
ｿヂﾝの同量を混和する.drost…標準液,融点140 ,4,｡C,["]if､,'.01
d_0．5N NH20H・HClの90%アルコール溶液10mgを10m.lのアルコールに溶解する．
……NH20H・HClO.7gmに水2mlを加え加温浴2．器具;BeckmanDU分光光度計
解させアルコールを加え20mlとする．
実験
本法は,Hydroxysteroidの酢化,NH20H
の郡
OH基1ケのDehydroepiandrosterone,
によるAcetohydroxamicAcid(AH)の生
Testosterone,Cholesterol等では1ミリ分子
成，及びFe+++によるAH-Fe酷塩の生成の
吸光係数は約1．1を示し,Androstenediol,
Estradiol,Allopregnanediolの如くOH基
2ケのものでは略々2．2を示す．−一方C11位や
8段階よりなるのであるが，著者等は先ず標準
Dehydroepiandrosteroneを用いてこれら3
種の反応について，反応条件を詳細に検討し
た
．
I.Acetohydroxam酸鉄生成に関する基礎
実験
1.HydroxysteroidのAcetyl化
C17(")位にOH基をもつSteroidでは，
例えばOH基2ケのCortisone,並びにOH
基3ケのHydrocortisoneの1ミリ分子吸光
係数が夫々1.20及び1．19であって20H基1
ケのSteroidに相当しているのであるが．この
a)Acetyl化の条件
ことはこれらSteoidのもつOH基の中で
HydroxysteroidのAcetyl化は無水酢酸・
Acetyl化出来る活性水酸基が何れも1ケしか
ピリヂン混液中100-110｡Cで行った.Ddly-
ないことを示すものである．即ちC11位やC17
droepiandrosterone5001′を，無水酢酸・ピ
位のa-OHは不活性で，この方法ではAcetyl
リヂン混液量及び加熱時間を種々に変えて
化され難い
Acetyl化し,Acetyl化された量をAcetohydr-
2．HydroxylamineによるAcetdlydroxa-
oxam酸法で測定して第1表の結果を得
た．この成績からDHlydroepiandrosterone
の酢化には無水酢酸・ピリヂン混液0.1mlで
30分加熱すれば十分であることが分る．尚無水
micAcidの生成．
a)アルカリ性Hydroxylamineの安定度
の吟味．
Hydroxylamine塩酸塩NH20H･HClは
酢酸の代りに塩化アセチルを用いても同様であ
アルカリによって強い還元性を示すと同時に不
った．本反応は湿気を嫌うためグリセリン浴又
安定で室温でも分解する．従ってAcetyl化さ
は油浴で行う．
れたHydroxysteroidにアルカリ性でNH20H
b)諸種SteroidAlcoholの水酸基Acetyl
化実験．
を作用させて,AcetohydroxamicAcidを生
成せしめるに当っては，出来るだけNH20H
水酸基を有する種々のSteroidを本法で
の分解を少くすることが必要である．著者らは
Acetyl化し,Acetyl化された-OH基を定品
先ず種々な温度に於けるNH20Hの分解速度
すると第2表の如く水酸基の数と1ミリ分子吸
をその還元力の減退を指標として測定した．即
光係数（吸光係数／1ミリ分子量）は比例し，
ち0.5N-NH20H･HClの90%アルコール溶
SteroidAlcoholの測定法について
137
液1mlと5N-NaOHO､2mlを混和して一
成は前2実験の場合に比して可成り劣り，而も
定温度(100｡C,60｡C又は室温）に放置し，
約10分で最高に達し，その後AH生成量は急
一定時間毎に残存Hydroxylamineを0.1%
激に減少を示した．よって著者等はAH生成
K3Fe(CN)6の消費量で測った．その結果は
条件として室温(25｡C)80分放置して反応を
第1図に示した如くであって，アルカリ性
行わしめることとした．
Hydroxylamineは60｡C又は100｡Cで加
3．AcetOhydroxam酸鉄の生成
熱した場合には20分乃至30分間で全部分解し，
室温に放置した場合でも30分後には約1/3量と
なることが分った.Engel等11)の如くHydr-
a)pH.
定量実験の最終段階ではAHにFe+++
(FeCl3)を加えて赤色のAH-Fe錯塩を生成
oxylamine塩酸塩とアルカリを混合して析出
せしめ，その着色度を比色測定するわけである
する塩を遠沈してその上澄液を使う方法はその
が，この際生成したAH-Fe錯塩の安定度が
操作に約10-15分間を要するものであって従っ
pHによって著しい影響を受けることがEngel
てその間に既にHydroxylamineの一部が分
解することがこの実験で明かとなった．そこで
等によって指摘されている．著者等は前項の実
験で得られたAHに種々のpHで2.5%FeCl3
著者らはAcetyl化した検体に0.5N.-NH20H
0.5mlを加え生じたAH-Feの着色度を光度
･HClの90%アルコール溶液1mlを加えよく
計で測定して第3図に示す結果を得た．即ち
検体を溶かしてから5N-NaOHO,2mlを加
pH1.2-1.8の比較的狭い範囲内ではAH-Fe
え室温に30分放置して反応せしめる方法を採用
の着色度は最高を示したがその前後のpHで
した．この著者らの方法では反応操作による試
は着色度の急激な減少が見られた．そこで著者
薬の損失が少ないため，試薬量もEngel法に
らは,NH20HでAHを生成した後,0．5
比して少量であって,NH20HoHClで約1/2
N-HCll､5mlを加えpHを1.2-1.8内に修
量(66mg→35mg),アルカリ量で約1/3量（
正した後FeCl3による発色反応を行うことと
139mg→40mg)に夫々減量することが出来た．
した．
尚著者らの方法では析出する塩はそのま上で爾
b)塩化鉄の濃度と酸化剤の使用について．
後の反応操作に何等支障がなかった．
pH1.2-1.8に調整したAH液にFeCl3を
b)AcetOhydroxamicAcid生成条件の吟
味
加えて発色せしめる際,FeCl3の一部は残存
しているNH20HによってFe+++→Fe++に
DdlydroepiandrosteroneaCetate500γに
還元され，この為AH-Fe色素の生成が定量
0．5N-NH20H･HClのアルコール溶液1ml
的に行われないことを考慮せねばならない．従
と5N-NaOHO､2mlを加え，種々の温度（室
ってFeC13を或る程度余分に加えることが必
温,60｡C,100｡C)で反応させ，生成した
要となってくるのであるが，しかし乍ら，不必
Acetohydroxam酸量を逐時的に比色測定し
て第2図に示す成績を得た．即ち室温(25｡C)
要に過剰のFeCl3を加えることは徒らにFeCl3
の着色によるBlankを大にして，比色測定上
放置実験では，時間と共に漸次AH生成量は
増加し，30分後に最高となり以後殆んど増減が
に支障を来たす虞れがある．これらの点をいろ
いろと検討して著者らはこの際,FeCl3を残存
なかった．又60｡C加熱実験では,10分後に既
NH20Hの還元作用から防護する目的を以て
にAH生成は最大となり，その値は室温30分
反応時に於けると略々同一量を示し，以後時間
適当な酸化剤の添加を試みた．酸化剤として
KClO3,HClO4,H202,HIO4及びNaBrO4
の経過と共にAH生成量は漸減の傾向を示し
の5種について検討を加えた．第2表は
た．之に反し100｡C加熱実験では,AH生
AcetOhydroxam酸液に各種濃度(O．2,0.5
138
細井・神戸川
−
及び2.5%)FeCl30.5mlを単独に加えて発色
資料（後述の尿よりPincus法16)によって抽
せしめた場合と，それに更に各種酸化剤を添加
出した中性エーテルエキス部分NeutralEther
した場合とについて,AH-Fe錯塩の着色度
Extractのアルコール溶液でDehydroepian-
(光度計のOpticalDensity)を逐次的に測定
drosterone200-2,0007相当量),(2)Ddly-
した成績を示したものである．即ち,FeCl3単
droepiandrosterone標準溶液0.5ml(500γ含
独使用実験では,FeCl3の濃度2.5%を用いた
有)，及び（3）アルコール0.5ml(Reagent
場合に着色度は最高を示したが，この場合時間
Blank)をとり，溶媒を加熱蒸発させ真空デシ
の経過と共に色調の槌色が認められた．一方酸
ケーター中で乾燥した後,各々に無水酢酸･ピリ
化剤添加実験ではH202,HClO4,HIO4並び
ヂン（1：1）混液0.1mlを加えグリセリン浴
にNaBrO3を用いた場合.には,夫々不純呈色'ハ
で100--110｡Cで30分加熱して酢化する．次
ロゲンの析出，白濁等を生じ何れも比色測定上
いで加熱しつょスプレーで溶媒を蒸発させ，更
に支障を来たし，この様な酸化剤の使用は不適
にメタノールを加えて蒸発を行い無水酢酸の痕
当であった．之に反してKCIO3は，その緩漫
跡を除く．この操作を数回繰り返した後,デシケ
な酸化作用のため生成したAH-Fe錯塩を分
ーター中で減圧乾燥する．こ上に得られた
解歩ることなしに,NH20HによるFe+++->
SteroidAlcoholのAcetateに0.5N-NH2
Fe++の還元を防止して色調を安定せしめ，酸
OH・HClの90%アルコール溶液1mlを加え
化剤として好適であることが分った．そこで著
溶解させ，次いで5N-NaOHO.2mlを追加
者らは，本実験にはKCIO3を0．8%に加えた
し室温25｡Cで80分放置した後,0．5N-HCl
2.5%FeCl30.5mlを加えてAH-Fe錯塩色
1.5mlを加えてpHを1.2-1.8とする．更
素を生成せしめることとした．
に蒸溜水を加え液量を4.5mlとする．これに
c)Acetohydroxam酸鉄の吸収スペクトル
0.8%KClO3含有の2.5%FeCl30.5ml次い
Dehydroepiandrostercneを用いてAceto-
で，エーテル4mlを加え，よく振溌すれば，
hydroxam酸鉄を生成発色せしめ，その吸収ス
資料並びに標準Steroid管ではAcetohydro-
ペクトルを分光光度計で検査して第4図の如く
xam酸鉄の生成によって水層は赤色を呈し，
波長510m〃に比較的鮮鋭な極大を示す吸収曲
同時に遊離したSteroidAlcdlol並びに不純
線が得られた．従って著者らは波長510m〃を
呈色はエーテルに移行する．20分後に資料及び
以って，若し又フィルター式光電比色計を使用
標準Steroid管の赤色水溶液（下層）をピペ
する場合にはフィルターS52を以って比色測
ットで吸い取り，アルコール溶液のみのBlank
定を行うこととした．尚第5図は510m〃を用
試験管の水溶液を対照として分光々度計又はフ
いて検測した標準Ddlydroepiandrosterone
ィルター式光電比色計で夫々の吸光係数E及
に対する検量線(Calibrationcurve)を示した
もであるが,SteroidO､1-1.Omgの範囲では
検量線は直線性であって,Steroid量とAce-
tohydroxam酸鉄の色調度との間には完全な
比例的関係が実証された．尚Engel等15)は
U<Esを測定し次式によって資料中のSteroid
Alcohol量を算出する．
S
t
e
r
o
i
d
A
l
c
o
h
o
l
(
7
)
=
S
×
芸
こょで,S=標準SteroidAlcohol量（γ）
Cary分光々度計を使用してAcetohydroxam
E=検体の吸光係数
酸鉄のスペクトルの吸収極大が波長527m禅に
Es=標準SteroidAlcmlolの吸光係数
あると報告している．
然し乍ら，本実験法ではSteroidAlcdlol以
II.測定法及び補正式
外の不純物のNH20H及びFeCl3による着
3球の試験管（15×150mm)に，夫々(1)
色が多少なりとも伴うのであって，従って光度
SteroidAlcoholの測定法について
139
計の実測値に対し何らかの方法で補正を加える
必要がある．Engel等15)はこの不純呈色によ
る過大測定を修正するため，比色測定用波長と
Alcohol排泄量をAcetmlydroxam酸法によ
って定量追求した．尚この際,同時にZimm-
して不純呈色による干渉の少い560m〃を使用
osteroidをも定量してSteroidAlcohol排泄量
し，更にAcetylationBlank並びにPrefor-
と比較検討した．
medEsterBlankを入れた補正式を採用して
いる．著者らは次の様にして不純呈色に対する
家兎は体重2kgの正常雌を用い，各Steroid50mgを油溶及びサスペンション1mlとし
補正を行った．先ず尿抽出物に対し,Acetyl
化操作を行わずに，以下同様にNH20H及び，
FeCl3反応を行って得られた不純呈色につい
て吸収スペクトルの検査を行った．その結果，
第4図に示した様に,Acetohydroxam酸鉄
の吸収スペクトル曲線と全く逆の関係を示すス
ペクトル曲線が得られた．即ちAH-Fe錯塩が
最低の吸収を示す420m〃に於て不純呈色が最
大吸収を示し，一方AH-Fe錯塩の吸収最大
波長510m〃では不純呈色の吸収は極めて僅少
て筋肉注射した．使用したSteroidはCorti-
errnann反応(Callowの変法20))で17-Ket-
s
o
n
e
,
1
7
H
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1
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似
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d
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x
y
p
r
o
g
e
g
t
erone"及びProgesteroneの5種注射前3
日間と注射後7日間の毎日尿について,PingIzs
法'6)によって中性エーテル・エキス部分を抽
出し,SteroidAIcoholと17-Ketosteroidを
測定した．
抽出法：トルオール少量を加え防腐貯臓せる24時間
尿より100mlをとり，conc・HCI15mlを加え，磨
であって，この関係は,Zimmermann反応'7）
り合せ硝子冷却器をつけたコルベン中で8分間煮沸
によって17-Ketosteroidを測定する場合に於
けるSteroid呈色と不純呈色との関係に極め
し，冷却後，尿を過酸化物除去エーテル100mlで
3回抽出．エーテルを飽和NaHCO3水浴液50ml
て類似している，よって，著者らはFraserl8)
で2回，蒸溜水30mlで1回,2NNaOH50mlで
19)の補正式を本呈色に利用し次式によって資
料の510m〃での実測吸収係数(E)の補正を
3回洗糠する．最後に再び蒸溜水50mlで3回洗漉
した後，エーテルを蒸発し，残澄をデシケーター中
で減圧乾燥する．かくして得た抽出物をアルコール
行った．
補正E=KigZ
o==420
Ki-Ks
ここで,E510,E420は夫々資料の510m",
420m似に対する吸光係数，
K−芸鶚,K−吾簔：
5mlにとかし，その1mlをSteroidAlcohol測定
に,0.2mlを17-Ketosteroid測定に使用した．
第6図は各Steroidについて行った測定実
験の成績を示したものであるが，この成績から
明かな如く，何れの場合でも尿中Steroid
Alcoholの排泄量はSteroid注射翌日又は翌
但し,Es420,Es510はDehydroepiandrost-
々日より著明に増加し1週間後には略々正常に
erone標準溶液の420m",510m〃に対する吸
復することが判る.一方尿中17-Ketcsteroidの
光係数を示し，又Ej420,Ej510は尿抽出物
量は,Cortisone,17 Hydroxy-11-desoxycorti-
の不純呈色の420m",510m禅に対する吸光係
costerone及び17-Hydroxyprogesteroneを
数を示す．
投与した場合にはSteroidAlcoholと同じく
尚フィルター式光電比色計を使用する場合に
はフィルターS52及びS43を用いて同様に
増大の傾向を示したが，之に反しDesoxycor-
吸光係数を測定する．
兎では全く変化が認められなかった．
III．諸種Steroid投与家兎に於ける尿中
ticosterone及びProgesteroneを投与した家
この実験結果から,SteroidHormone代謝
SteroidAIcoholの排洲試験
の研究に生殖腺や副腎皮質機能の状態を推知す
家兎に諸種Steroidを投与し，尿中Steroid
るには，尿中SteroidAlcohOl排泄量の測定
140
細井・神戸川
が重大な意義をもつものであることが明瞭であ
であって，殊に副腎皮質腫瘍や妊娠時に多量に
る．他方，従来行われて来た尿中17-Ketoster-
排泄されるPregnane-8",20a-diol,Pregnane
oid測定法が，本実験のDesoxycorticostercne
-36,20Iz-diol,Pregnanetriol等の重要Alc-
やProgesterone投与家兎例に見られた如く，
ohol性Steroidはこの方法では捕捉されな
SteroidHormone代謝産物の研究には不適当
い．
壷函
結
1.Acetohydroxam酸鉄呈色反応を利用し
る補正式について検討した．
たEngel等のSteroidAlcohol定量法を検討し
3．諸種C2,-Steroidを注射した家兎尿につ
て,Hydroxylamine試薬の使用法を改良する
と共に,FeCl3の還元防止の為に新たに酸化剤
いて，本法によるSteroidAlcoholの測定を
行って，凡ての動物に於て注射後その排泄量の
KCIO3を添加して呈色反応の安定化を計った．
著明な増加を確かめ得た。しかし，その際尿中
2．本法による加水分解尿の中性抽出物中の
SteroidAlcohol測定に際し，不純呈色に対す
17-Ketosteroidの排泄量は必ずしも増加を示
文
1)Pincus,G、:Endocrmol.,35,227,1944.
2)Dobriner,K､,Lieberman,S､,andRhoads,
C・P．:J.Biol.Chem.,172,241,1948.3)
Lieberman,S.,Fieser,L.F.,Dobriner,
K･,andRhoads,C･P.:Endocrinol.,35,223,
さなかった．
献
19,932,1947.11)Bauer,F,C､,JR・and
Hirsch,E.F.:Aｪch・Biochem.,20,242,1949.
12)Hestrin,S､:J.Biol・Chem.,180,249,
1949.13)Bergmann,F､:Anal.Chem.,
24,1367,1952.14)Zararoni,A､:Recent
H､,andShinkel,M.:J.Hol・Chem.,183,47,
ProgressinHormOneResearch,8,51,1953.
15)Baggett,B､,Engel,L、L・and
Fielding,L、L、:J・Biol、Chem.,213,87,
1955.16)Pincus,G、:J・clin・End.,5,291,
1950.6)Killie,AoE.,Smith,E、R､，
1945.17)Zimmermann,W､:Z.f.physiol.
andWade,A・P．:Biochem．J.,53,578,582,
C
h
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2
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7
,
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4
5
.
1
8
)
1953.7)Engel,L、L､,andBaggett,B.
:RecexltProgressmHormoneResearchlX,251,
Fraser,R･弧『．:J・clin・End.,1,234,1941.
1954.8)LIpmann,F､,andTuttle,L.
MacLaChlan,E、A、:J・Biol･Chem.,143,
C.:J.Biol.Chem.,159,21,1945.9)Hin,
211,1942.20)Callow,N､H.:Biochem.
U、T.:Ind・andEng・Chem.Anal.Ed.,18,
』.，32,1312,1938.
1944.4)Tompsett,S､L､,andOastter,
E,G、:Glasgow.med.J.,29,133,1948．5)
Engel,LbL.,Patterson,H、R､,Wilson,
317,1946.10)Hill,U.T、:Anal・Chem.,
19)Talbot,H、B､,Berman,R、A・and
SteroidAlcoholの測定法について
141
Tablel
AcetylationofDehydroepiandrosteroneunder
VariousConditiong
一■■。﹃ｌ︽即四︾
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HeatingwascarriedoutmaonorglycerolbathatlOO-110｡C.
Table2
AcetylationofVariousSteroidswithAcetic
Anhydride-PyridmeReagent
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and
Steroid
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StemidAlcoholの測定法について
143
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Fig．2Conversionofacetoxylgroups
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variousconditions.
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‐‐pH
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Fig.3Showingthedependenceof
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fromationofferric-acetohydr
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0.2mlof5NNaOHwasallowedtostandatroom
temperature(25｡C),60andlOOoC・Acetohydroxamic
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Fig.4Absorptionspectraforthe
coloredferric-acetohydroxamic
acidcomplexandthecontaminantchromogen.
O.10.40.60.81．0
mg
Fig.5Calibrationcurvefordehydroepiandrosterone
144
細井。神戸川
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１
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Fig．6Theeifbctofmtramuscularadministrationofvarious
steroidsontheurinaryexcretionofsteroidalcoholandketosteroidsmfemale
rabbits･Thevalueofsteroidalcoholandl7-ketosteroidwascalculatedas
milligramequivalentsofdehydroepiandrosteroneper24hours.
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