Title 培養Rat kangaroo cell line(PtK1 cell line)についての細胞遺伝学的研究 Author(s) 武田, 公男 Citation 金沢大学十全医学会雑誌, 85(4): 472-490 Issue Date 1976-07 Type Departmental Bulletin Paper Text version publisher URL http://hdl.handle.net/2297/8631 Right *KURAに登録されているコンテンツの著作権は,執筆者,出版社(学協会)などが有します。 *KURAに登録されているコンテンツの利用については,著作権法に規定されている私的使用や引用などの範囲内で行ってください。 *著作権法に規定されている私的使用や引用などの範囲を超える利用を行う場合には,著作権者の許諾を得てください。ただし,著作権者 から著作権等管理事業者(学術著作権協会,日本著作出版権管理システムなど)に権利委託されているコンテンツの利用手続については ,各著作権等管理事業者に確認してください。 http://dspace.lib.kanazawa-u.ac.jp/dspace/ 培養 R a n g に つ い て の a r o o li n e 金 沢 大 学 医学 部 第 三 解 剖 学 講 座 ( 主任 武 a n (P a r o o g 島 に 生 息 す る ト動 物 で 1 に 示 す よう に 堆で は2 る l) Sh . 順 にN の ら a w o 1 . Y 染色体も か し H a t よ , 3 4 , 5 , 2) a n M や ら L 細胞 に お い て は その も て いて k at a n g で o s o m い とから c ell m li で n e 等の 染 色 体 e 6ト A t a xi 、 el a n t a ま た . e c t a si a gi 悪 性 腫 瘍 の 発生 率 が 高 く て Ch r o 括 して 一 a r は h c , Bl , r o m e. に m o s o る い al m G , B しかし同 . e r m r e ak a e S y は n d e e , 悪性腫瘍の 増殖 に 伴 なう 二 次的な変異で あ - 川 5) ろう と の 考え が 支配的で あ る . 著 者 は自 然 発 生 的 染 色体 の 異 数 性 や 構 造 異 常 を 伴 な う に c e 11 r o o 1in e が 悪性腫瘍 や ら れ る疾患に 見ら れ る染色体異 一 A Ei of m c y io t o g e n e ti c T a k ed a M e d i ci n e , , K s D t e u d y a k t a n g a ・ 種 の 前感 状 態 と 考 え 常の モ デ in a U n ル とな り li n c el l of p art m e nt a n az a w a R A i v e r s it y u た つ い て は の 線 椎 茸 細 胞 を 米国 ar o o . n a . t e n s ti t u t e li こ of to m y た っ a n k で 3 , 0 075 M B al a n c ed が 3 m 卜 gl et a n o 休 分 析 技 術 の 詳細 は 色体 の 分析技術 っ て 選 んで行な 核 板に つ っ い て た は と 省 略 す る) で e r n a ci al di に c e n t di . Q . u た っ a cid r at (HB SS o n で ン 細胞を剥 耶 液を用 ch r o c n a c rin e r : P r o ・ C ・ u lt M p att di n g と X y le u re at s u d n e g l a ci al 染 色 を 行な Q M 1 , K a n ' を 構成 し て い る 2 e et a n ol 脱色 し f B を含む e ( 以 下Q M す なわ ち . m . m o s o m m u st a rd M o s o (P t K ), k ar g ar o o ( Ⅲ) ( D i r e c t o 細 胞 培 養 技法 や 染色 染色体分析は 8 代 にわた . ch r o m い て 液 で 固定 し a c id よ る 蛍 光染色 に よ る ri c い 行な わ れ て い る と 卜の染 で t ri c e n i ・ 染 色 体 分 析 を 行な っ , て の っ 川 総 計1 6 0 0 偶 の 細胞 を 任 意 に . 油浸 液を洗 い 落 し た の ち the ti リプ シ a c e ti c 教室 ・ に よ . っ 培 養 6 日 目に 、 液 あ る い は蒸 留 水と 本 の 染色体 の 同定 を行 な っ た e ti c ol u S ト , カ リ溶 各 継 代 時 の 20 0 個 , 切加 え な か 一 4 時 間暴露 した に S al t な お 染色 体 分 析 に あ た . を 加え s e r u m す な わ ち 培養 6 日 目 に l) m 空気乾燥法 で 標本 を作製 し . 第2 4 代 か ら3 1 1 の 割り 合い の 溶液で 低 張 処理 を 行な : 1 塩化 ol . . c alf ・ 度細胞 を洗浄 し た の ち 一 : ・ n e 絶代 さ れ に . s り 分与 さ れ よ の は 抗生 物質 等 は ち H 雌 の 腎皮質 , c の 恒温 器 内で 密 封 培 養さ れた 0 中に m 1 8) ・ 悪 性 腫瘍の 発 生と は関 , di e で37 m の た 大 多 数 の 悪 性 腫 瘍 の 細 胞 に 観察 さ れ る 変 異 に 富 ん だ 染色 体 異 常 は 連しない っ g ・ ( 最 終 濃 度 0 2 γ/ た お よ び 正常 染 色 体 核 型 を 有 す る 悪 性 腫瘍 の 症例 が認 め , な a n 細胞遺伝学的検索 を行な っ た 細 て ン 疾 共通し た染色体上の 特徴を 示 す と はか ぎら な い こ と られ る こ と か ら こ C ell こ の . I ル ヒ チ と し の れ ら r o m o ri a l e m コ SS れ らの 疾患で は タ イ プ の 悪 性 腫瘍 で も の 一 a n g edi u M 離し s こ r o m に n e 細 胞 は培 養 7 日 日 ご と . ) ・ こ 13) M 細 胞 遺 伝 学 的 検索 を 行 な d sy n a rk o s o m m , M た なお a n e m ' P li た a n c o ni s o o k 16) と 1 5 % f e t al 胞 は R P M 11640 - ' F at 継 代 第 22 代 目 , 代 の 8 代 に わぉ っ 構造異常を伴 の e ll o s w c ell a r o o g a n た もの を 使用 した また ・ k at 自然発 他 方悪 性 腫 瘍細 胞 等 で も 染色 体 の 構 造 異 常 を 伴 な い 患 を R 染 色体 の 異 数 性 や 構 造 異 常 を 伴 な う こ と が . しば し ば指摘さ れ て い る a = . 12) i 2 a r o o Sh . る こ と が 指摘さ れ て き た 培養 な う こ と が 報告 さ れ て き た おいて も g 早く か ら 細 胞 遺伝 て っ R , 細 胞遺 伝学 的検 索 を お の n e よ り確立 さ れ 個 々 の 染色 体 , こ ある ら5) に よ の a r o o ch r o g と Y l a n R ま た 各染色体 が特徴 あ る形態を し 生 的 に 染色 体 の 数 的 異 常 や d i c e n t ri c ri n し ・ 染 色体 数 が 少 な く 学 的研 究 に 好 適 し て R Y k t a li 手段 一 実験 材料 と方法 , al e n W R . c ell t 染色体 の 同定が 容易 , ら4 ) や a n m が大 き く の よう に の o o r e を逆 に 記載 して い る も の も あ る の となり う るの で は な い か と 考え 2 本の , と命 名さ れ た 2 3) た細胞 の 増 殖過 程 を解明する っ 大きさ , と 命名さ れ , 男 れ ら の 異常 を も マ ス 12 で あ = n 5 対 の 常染色体 は て っ 雌で は 2 , 大きさから Yl と Y , m y に 2 13 = は タ li s) 松 田 健 史助 教 授) ‥ 公 田 体 細 胞 の 染 色体 は 図 そ の . n ri d a c t y t o r o u s t o ′ ア ニ k at R ( 1 97 6) 490 - ( P t K I C e ll li n e) 細 胞遺 伝 学 的 研 究 c e ll k at 帯4 号 472 帯8 5 巻 金 沢大 学 十 全 医 学会 雑 誌 472 i d a) ・ っ で J ac た n ・ S ch o ol P tK B Q M 染色は r o w らtl) の 方 法 に よ n 核板 は 蛍 光 顕微 鏡 で Ob a r ri e r 検し BG 3 , H B O 200 B G 12 , 写 真 撮影 を 行 な , - た っ e r c u r B G 38 た っ m u r n e r 鋸 te e x c it e r 1i n e 細胞 遺 伝 学 的研 究 の 染色し た ・ b y C e11 I r られる 培養各代に お い 鏡 で ap g ・ 検索 を 行 な たっ て C ell a p 1 9) od a r o た っ e ri o d 本欠失 し た 図 2 1 t ch r o li m r e ta r d a ti o n (K す で に N , た て い っ o s o m o s o m を行 な たっ て b o 2 ら 0)) a tz た っ 5 . = c e li ri n , c el l lin とな n e ch r o g めら れ その 頻度 は 一 一 , 代にわた っ て , モ ー ド m o s o m e dic m (E) a r m , ( D- t . g 貫 して 一 ri c っ か の Si d e li n 一 . e (C e nd F , F , f u lt i p m ch r o ch r o m le g " e つ o s o い て (F b) q a t id ・ (D e e x ch a n a) . - C h r o r n a t id o ch t o m o s o m p a s al m と i b o r o rdia n g , b - k た っ g b) - ch r o e m a C e n t ri c , r e ak s " t n o b の f % r e ak a is r ag , . い is しか し 8 r o k a oly c en p . g a e Ch r o m に ti d a g s p a ti d b o r g a k s re a a ti d rn g ap s a ti d m b o r g a p k s b re ak s r ea o r s 10 5 % : N P a s s ag e n u m b e r c ell s w i th ch ro g a o r p s b に o ch r o m は ch r o m a ti d g a p s a t id a g b o r s p . . b o r r e ak s k s 示し た 表3 . of . c e11 s w に Ch r o は a ti d m に g N it h 芸芸慧 / ・ ∼ r eak s い て つ と 各継 代 , 時 ご と に 各 染 色 体 に 観察 さ れ た 個 数 を 短 腕 と 長腕 別 に id m a tid r ea o れら 3 5 % : p a s b o r r e ak s , of , こ 29 5 ∼ . 。 . s p . こ . : 各 種 の 構 造 的 異 常 の 各 継 代 時 の 個 数 と そ れ を保 有す る細胞数 な ら び に 1 細 胞 あ た り の そ れ ぞ れ の 頻度 表1 - 1 a : C h r o m a tid g a p o r b r e a k o - 頻 度 は 各社 代 時 で は増 減 が 認 め ら れ 表1 N - 特別 の 増加あ る い は減少傾向 は 認 め ら れ な , 蓑2 . - 次 に 観 察結 果 を 構造 . 1 b s o ch r o m の e g o ch r o 11 0 % ) が 認 貫 し て 2 倍 体域 に 認 め ら れ T b t al N o Of c ell s O b s e rv ed o s ・ 各継 代 時 の 個 数 と そ れ を 保 有 す る 細 胞 数 , るが (Ch e n は1 6 0 0 個 の 桜 れ ら の 頻 度 の 各 社 代 時 の 推移 は 図 5 に 示 し た e 検索 ap g d ic . . r ea ・ r e ak s m u si o n および蓑1 a is . 等 の 染 色 体 の 構造 異 常 が 認 め ら れ C) - D - a) , な らび に 1 細胞 あ たり の そ れ ぞ れ の 頻度を示 した n l ai n e g c h r o nl O S O m b に , 各継代時 に は絵染色 体 数 . C rin . o s o m しか し ・ 1) 3 倍体 域 が 次 第 に 増 加 す る 傾 向 に あ る の が 認 め t ch r o 区Ⅰ4 に 示 す よ う に . (A 異常の 種類 ごと に 記載す る e n e x ch a n . 定 し な い 傾向 に あ る は (B) て k r ea 坂申 に 1 個 も認 め ら れ なか n e は 第2 4 代 か ら3 1 代 の 8 代 に わ e るが て い っ e n e O r 総 染 色体 数 が 1 1 本 の 細 胞 が . m k r ea 表1 T l は お の お の 2 本と し て 計算 した e た っ e m 111 a 主n な お 染色 体 数 の 算 定 に は . O t 染色体 が 1 の ri c た - は認め た細胞 が っ (T t . が10 本 お よ び1 2 本 等 の い く るが t t c ri si s 期 間中 に は こ の , th は 各 社代 時 に お け る 細 胞 の 染色 体 数 の 分布 と に Ch r o m St e m 定で w よ う な核型を も の 推移 を 示 し た ri c r o 染 色体 の 数 的変 化 . 図3 そ の と な n e g 一 ま た 染 色 体 検索 を 行 な . は 分与さ れ た 当 時 か ら li ぼ of " は 第2 4 代 か ら3 1 代 に わ n e ほ ある い は ら ) られな か s te m li 細胞 増 殖 速 度 は , ゆる いわ た っ 果 b o r O r 結 . 染色 体 の 構 造 的変 化 4 7- , 4 73 ・ ■ 一 ・ 藷 N o g a . p of s ch ro m o r b a tid g b o a . P of S ch ro m re ak s re ak s T c ± No ell s 田 20 0 四 0 095 四 0 105 田 田 200 田 0 225 四 0 2 25 200 25 0 125 田 0 135 田 200 田 0 135 0 165 田 田 200 田 0 125 田 四 200 田 0 1 95 44 0 2劫 田 200 0 235 59 0 295 田 200 田 四 0 115 34 0 170 . . . . . . . . a tid O r . . . . 0 160 . . . . . o t al o f と 田 4 74 i s o ch r o m a ti d 染色体に の の g つ a と 長腕 別 に 示 し た d s p い て はな く ch r o r a n o ch r o m 色体の 短腕 に 発生率 が高 い Ch g ap s m a ti d ty p m a ti d o r b ro g r e ak s p . と もN e a い て つ s ty p と i n u b m e r 図6 . s o ch r o に の T b t al I、 b of c ell s Ob s e rv ed N . o of . 1 b - c ell s : is w i th l S O C h r o m a t ld g a s p b o r re ak s い 2) は る rin 義1 代 な お ・ M h c g r o 2 に - m rin カ u lt i p た っ l e ap s g m は 1 個 も観察さ れ な か " t 3) . och ro m a tid of c ell s N is o oc h ro m g b a S O r . p a c e n a g w t o r p ri c o m g o s o m に e なお e n al ot a g s p た a ti d b o r of is N o m a ti d b re ak s . o ch r o g aFS re ak s N o c ell s 四 0 105 四 2 00 田 0 055 四 0 105 26 200 14 0 070 16 0 0 80 27 2 ∞ 14 0 0 70 14 0 070 28 2 00 13 0 0 65 14 0 070 29 2 00 22 0 110 四 0 110 . 、 . . . . . . , . . 2 00 田 0 055 田 2 00 7 0 035 7 0 035 . 2 : ri n g c h r o m o s o m N o o f c ell s wi t h ri n g Cb r o m o m 玩r T bt al N o Of c ell s ob s er v ed . N o W i th of . c ell s - Ch ro m n ng o so m S O m T ot d N G Of C ell s es e s . . e N o . ri n of Ch ro m N o . of d n g Ch r o m o s o m SO m o g ・ eS T ot al of es c No e11 s 24 200 0 0 0 00 0 0 000 25 200 0 0 0 00 0 0 000 26 200 0 0 000 0 0 000 27 200 口 0 005 口 0 005 28 20 0 2 0 010 3 0 015 2g 200 ロ 0 00 5 ロ 0 005 田 20 0 0 0 00 0 0 0 000 田 2〔氾 0 0 0 0 0 0 000 . . . . . . . . . , 0 055 . - T o t al of Of 0 075 - o r di a I- Or 15 a s sag e n u g . . P = 2 00 表1 各絶 t of . っ . 24 田 田 い て つ ・ ∝h ro m is N G c e ll s r a r eak b N T f it h a tid r e ak s は 個 数 と そ れ を 保 有 す る 細 胞 数 な ら び に 1 細胞あ 時の n o r e ak s e ch r o t k b o r . o s o m g ま た図 . プ は 図 5 の そ れ と は ぼ平 ー たり の そ れ ぞ れ の 頻 度 を 示 し た 頻 染 色体 1 本 あ た り . 推移 を示 し た の 1 個 も観 察 さ れ な か ・ や は り 増減が 認 め ら れ る が , 行して at id m 染色体1 本 あ た り . 表1 a ss ag e is と e 頻度 の 6 発 生 頻度 は , と が 判明し た r e ak s い て つ 頻 度 も 各継 代 時 で は P 特別 の 増加 あ る い は減少傾 向 は認 め ら れ な い おの お , 1 の 染 色体 の 長 腕 と X 染 . こ b o r に o a ti d m 度 の 各継 代 時 ご と の 推 移 を 示 し た の に 統計 学 的 解 析 の 結 果 at o r e ak s 染色体 1 本 あ たり の 頻度を短腕 , . で b o r . . . . . . . . . P tK a C e n t ri c に 姦 巨 3 f r a m g りの それぞ れ の 頻度を 示 し た O S O m 。 m なお ・ c e n t ri c 表1 dic 4 に - ch r o m t e n o s o ri c m di た っ ce nt ric ri c t a C e n ・ る こ と はま れ で あ n t が 観察 さ れ 4) di t ri c 合 わせ が あ る の で g p r a m g m o s o m に e つ e い て di こ の ・ Q M , よ に as sag e n u b m er そ れ に 先だ c e n 1 た て っ di , o . of W it h f ra g m t en dic t e n ri a C e nt : o . frag c a t a 2 b . , k g a n ri c 2 , に 図8 a ndi n a r o o に c . . of t c ells w X a t m e n N o e11 s . こ1 B a ndi n は こ の p a tt e r n m o s o B m a n di n g . 衰 4 に N o of fr ag m a ce n . o t al o f ra of . m g t ac e n ri c T of c 5 0 025 5 0 025 田 200 4 0 02 0 4 0 0 20 四 200 4 0 020 4 28 2( 氾 6 0 030 6 0 030 四 200 3 0 015 3 0 015 田 田 2 00 4 0 020 4 0 0 20 2 α) 口 0 005 口 0 005 . . . . . . . as sag e m be r . N o . of c ell s ch ro m N (1 0 f c e11 s iw t h di c e n t ri c C h ro m o SO m eS T o t al N o of C ell s q f Ob O c ell s s e rv ed it h d i c e Ch r o m o s o w n m t ri c e s o so m 200 . . . ■ 0 0 20 . . . . . N N o of d i c e n t ri c Ch ro m os o ? . o h . of dic ro m o s o e n t ri c ノ T / m e s 慧 / ・ 。e 0 075 田 0 085 200 0 0 60 四 0 06 5 田 200 19 0 0 90 19 0 0 95 四 田 2 00 田 0 1 25 26 0 130 2 00 田 0 07 5 16 0 080 田 2 00 14 0 070 16 0 080 田 20 0 田 0 085 18 0 090 田 200 四 0 065 四 0 0 85 . . . . . . . / フ 田 四 . of e . 田 四 o t aI Ⅰ\b ell s 200 . ri c t e nt s 田 o っ e nt s 0 0 20 N a tt e r n よ て は 総 計1 4 2 個 の 4 ot al p . に を構成 して い る 2 本の 染 色 e 0 020 T 1 b 図 7 に 4 c e n t ri c 2 の . , . g 2 00 di o a と命名し た . 24 : a tt e r n p 1 とN . る 各 染色 体 の it h N T o m e nt s . a n d in g B 細胞の N Ⅹb , ric s を得て お く れ ら を 著者 は 軌 そ . 分析 を 行 て っ a tt e r n p よ ch r o frag c g X 染色体 に は 2 種類が そ れ ぞ , 体 を 同定 し た 1 例 を 示 し た a c en ri a c e nt 2 , を示 し c e n t ri c c ells c 蛍 光 染色 に よ て っ B 蛍 光 染色 に よ る ■ R , はこの Q M - よ る蛍光 に 衰1 - 4 n u っ よれ ば れ新 しく 区別さ れ た . C P ・ 必要が あ - N N ′ P た を 構 成 し て い る 2 本 の 染 色体 の 同 定 を e なう際 の 基本と なる ならびに1 , 表1 - 3 m t al N q Of c e11 s・ o b s e r v ed 行な っ 染色 体 に は 各3 種類 が ch r o a tt e r n m e は な い か と考 え 染色 に よ る B a n d i n o s o r は形成し や す い 染色 体 の 組 み に e f ch r 475 Ch r o m に 細胞 あ た り の そ れ ぞ れ の 頻度 を 示 し た o s o m 細 胞遺 伝 学的 研 究 の ・ 各継代時 の 個 数 と そ れ を 保 有 す る 細 胞 数 ch r o m e 各継 代 時 い て つ に li n な ら びに 1 細胞 あ た ・ を含む 核坂の う ちで e t e n る細胞数 の 個数 と そ れ を 保 有 す C ell I . . . . . . . . o t al Of 476 di c e n 武 ti c h c r o m o s o m 2 本 の 染色体 を Q M の つ に e い て 染色 体 の 組 み 合 わ せ の 頻 度 を 示 し た 表2 は著者 の 染色体分類法 に よ る 頻度で あ り それ を 構 成 す る ・ よ る 蛍 光 染 色 で 同定 し に 田 蓑4 ・ の 従来 の 分類法 に 還 元 し た上 で 本 2 , を統計学的 に 解 析 す る と う ちA N u m b of e r Ch N o so m ro m u ro m m b o so m P a ss ag e n u m b e r R T ot al 田 24 ロ a p s of e r b o r 26 27 四 田 田 28 P 計 io 4598 6 5 39 ch r orrn 38 18 4 14 47 6 ti N u b m r 皿 tid 38 1 9 50 5 2035 6 q 3 5 3 ロ0 q 0 0 口 24 0 2 4 1 2 6 7 26 5 0 0 q 2974 3 9 2 3 3 8 3 7 4 3 58 p e r of iso ch g ap s o r b ch ro m ) r o m gap s o s o m N gi o 5 3 4 : e r R P e _ a s s ag e ・ 5 0 2 7 q 3 4 6 P 2 4 q 6 0 p q 5 q 口 5 ロ2 田7 口匂 0 p 0 0 0 口口 0 ロ0 ロ 0 3 q 0 0 ロ ロ口 p 0 0 0 ロ同 q 0 p 5 q 0 S h 3 7 o rt a r m u o r b q : 口口 2 2 ヨ口 6 ロロ4 3 ロ 口ロ0 ロ0 田 0 0 0 0 0 ロ 0 0 0 0 0 0 0 ヨ田6 田 o ng 0 0 0 0 0 a r m C h r o m o s o m al re ak s e r ロ 2 3 4 5 Ⅹ 0 0 の4 6 0 0 0 74 1 0 00655 0 00157 0 00196 0 00639 0 01303 0 0 11 2 6 0 00157 0 0 0( 旭9 0 0 05 0 4 0 0 2 0 44 0 01781 0 0 0 3 14 0 00245 0 0 1 14 3 口 2 3 4 5 Ⅹ 0 0 02 7 2 0 00 鋸8 ・ 0 00348 0 00000 0 0 00 0 0 0 0 04 3 7 0 0 ∝∋6 9 0 0 0 5 24 0 00026 0 0 00 0 0 0 0 01 6 8 0 00717 0 0 0 75 9 0 00026 0 0 000 0 0 0 60 5 n S h A o rt r m . . . . . * . ′ L A g o n W h ol e i b) A . Ch ro m . 0 0 劫0 0 r m so ch ro m a * 0 0 16 5 4 r m . tid a g os o m N u s b o r . . . . . . . r e ak s e b m p . . e r 由O n Sh b o rt r m A ng W h ol A e . r m A . * 0 0 0 g∋9 . . 0 01111 r m . * ・ 1 乃/ 1 p ロ P I . c i汀 n j ri r 只 ∩十 . . . 」 . . . . . 田 田 田 ロ口 4 口田ロ口ロ 2 口 0 ロロ 0 0 田 0 0 L ロヨ2 ロヨ 6 4 5 同4 e b m r 迅 5匹匹匠包匹匹 0 3 0 0 0 be p 0 6 3 0 n u m ロ 氾1 匹 4 4 口 4 各 染 色 体 の 短 腕 と 長腕 別 の 染 色 体 1 本 あ た り の の 頻度 : a tid C h e ro re aks r e ak a g e b a 5 口 田ロ口 2 3 0 ロ口ロ3 3 53 3 7 7 4 1 3 39 6 q 表3 3 7 8 1 4 P Ⅹ 0 b 2 0 四田5 P 4 4 4 5 1 2 4 7 6 4 3 1 4 5 0 4 76 5 2 5 m 6 7 4 4 4 口3 524 477 419 483 470 555 2 3 7 2 4 7 2 7 1 2 67 2 ロ ロ5 2 P 5 n u n 可可監可団由O 田7 P q 4 e g 9 56 1 6 1 3 5 7 9 5 6 6 59 0 5 5 0 6 0 0 p 3 R o s o m 9 eak ag e re ak s 司 ロ 5 矧0 q 2 a ssa 可2 n p 4 5 2 4 6 4 5 5 0 48 3 4 66 5 3 5 5 3 2' 5 6 6 4050 e br そ の 結果 . ch r o m e e r R b m e s g n u al os o m c e n t ri c 短 腕と 長腕別の 個数 の Ch Ch r o m 各 継 代 時 ど と に 各 染色 体 に 観 察 さ れ た : di B は そ 叫を I 頻度 で あ る の . . . * Pt K の み合 わ せ は を 形成す る 染 色体 組 特に dic t e n ri c h c r o m 体の 組み 合 わ せ は な か at m た さ ら に こ の ・ 表4 e dic : d r a n li n e で の o m 細 胞 遺伝 学 的 研 究 t を形成 し やす い 染色 o s o っ C ell I t e n ri c c h dic r o m e n t ri c o s o m ch r o m o s o より こ の プ の , 477 Q M e の di c e n m t よる に ri c B ch r o m a ndi n o s o も の で あ る こ と が 確認 で き た g p わ せ の 頻度 A Ch ro m 著 者 の 染 色 体 分 類 法 に よ る頻 度 . o so m e n u b m er 1 Ch r o m o so m e n u 1 m b a 0 1 b c 2 a 1 c a 2b 2 c 3 4 5 Ⅹa Ⅹb 0 ロ 0 0 7 4 7 0 0 2 2 0 4 9 3 4 3 27 0 0 ロ 2 5 6 4 田 2 23 0 0 0 3 3 3 2 2 0 ロ 2 0 口 3 2 0 8 0 c 3 田 口 口 口 ロ 4 5 0 B Ch r o m os o m e n u b m ・ 0 0 ro m o s o m e n u m b 3 3 四 34 13 2 田 四 5 ロ 6 26 4 2 ロ 0 5 2 7 0 0 0 0 0 29 ロ 四 28 142 従 来 の 染色 体 分 類法 に 還 元 し た頻 度 e r ロ C h 3 ・ 6 Ⅹb o t al 22 0 Ⅹa T T o t al 0 2 b 2 2 e r a 1 1 b 2 田 4 5 X 8 田 四 14 15 m t al e r ロ 0 72 ( 4 6 ) ( 17 2 ) ( 17 2 ) ( 14 7 ) ( 14 7 う . 口 2 (1 9 ) . . . 6 7 (4 6) ( 7 2) . 0 3 . 四 . . 8 5 (5 3 ) 0 四 26 (8 8 ) , . 4 3 (1 4 ) (2 4 ) . 7 . 0 5 30 ( 6 1 ) (1 0 1 ) (6 2 ) . 4 . 6 . 7 7 (2 4) . 0 Ⅹ T X 2 = o t al 21 9 4 . 田 D . f = . 25 9 四 0 7 5 > P > 0 50 . . 田 29 ( ) 0 48 : E x p e ct ed tt e r n に す な わ ち図8 で も ・ を 構 成 して い る 2 本 の 染 色 休 の 組 み 合 e a は特別の タ イ m e 142 . 套 彗 奄 嘗 雷 惑 478 葛 茎 冒 圭 明 らか で あ るが di こ の . 染色体の 欠央 を伴わ ず ることに よ 5) e x c h a n g h e x c a n み観察さ れ た 6) a r m 図 4 (f ro m m d f u si C el l m d e n f し 変化 を 伴 な の li n 染色体内で 一 1 種の . い 長腕の 染色 に 適 し て い る f を の . R in g こ . o r m れ は従来の 染 ず れ に も適 当し な い の で u si o n 核型 を中心 成するとい ある , と仮称 ( 分 体 端 部 結 合) は こ れ ら の 構造異常 の 種類 ごと に 培 養 細胞 は の , 構造 真 常 して 核型を保持す る が 養細 胞 は 培 養細 胞 を と述 それゆえ . る すなわち1 1i n C ell li よう に H a y n ick li を形 n e るが ら2 1) は 良 照射 は限定さ れ た生存期間 を有し つ C e 11 , 取り 出 s t r ai n s と 他 は無限 の 生存期間を も ち , た染色体核型 の 上 で の 特 徴 を も っ 表5 の : っ R R \ 、 記三悪 か Ch ro m O r b I a tid の a p s Ri n g h ro E p re ak s c o m es m o so m es x ch a n Ch r o m g e cs o m A c e n t ir c f rag m e nt s s k k at li ne を形 影響 の も と で 変化す る すなわち . の ai n m , 注意深く 特徴をみきわ の S t e m li n e a n g c ell a r o o li は 先 に 述べ た n e a n g a r o o c e 11 1i の を 使用 し て n e . っ ル た こ の , . X線 ス 感 染等の 染 ウ イ c ell li n R at k a n g a r o o c ell li n e の て 観察 っ 染 色 体核 型 上 の 数 的変 化 と 構 造 的変 化 に 大 別し . , 他の , 25 26 田 28 / 。 t al 田 田 田 恥t d Of 21 ( Ⅰ9) 4 5 (4 5 ) 2 7( 2 5 ) 3 3 (2 7 ) 3 2( 2 5) 4 4 ( 3 9-) 5 9 (4 7) 2 1 ( 1.5) 2 1 (1 1 ) 1 6 (1 4 ) 1 4 (1 4) 1 4 (1 3) 2 2 ( 2 2) 1 1 (1 1) 1 7 (1 5) 1 3 (1 2) 1 9 (1 9) 2 6 ( 2 5) 1 6 (1 5) ¶)t al 血 (% ) c e 且s 3 4 ( 2 3) 25 9 (2 5 0 ) 1 8 4 % (1 5 65粉 . , 7 ( 7 ) 1 26 (1 07 ) 1 6 (1 4) 1 8 (1 7) 1 7 (1 3) 1 4 2 ( 1 3 0) 0 ( 0) 0 (0 ) 1 (1 ) 3 ( 2) 1 ( 1) 0 ( 0) 0 ( 0) 5 (4 ) 0 (0 ) 0 ( 0) 0 (0 ) 0 ( 0) 0 ( 0) 1 (1 ) 0 ( 0 ) 0 (0 ) 1 ( 1) 4 (4 ) 5 (5 ) 4 (4 ) 4 (4 ) 6 (6 ) 3 ( 3) 4 (4 ) 1 ( 1■ ) 3 1 ( 3 1) 0 (0 ) e 変 化 の 特 徴 を 明 ら か に す る 必要 r 24 . そ れゆ . . 変化の 特徴 を た ne 核 型 か ら の 変 動 の 範 囲 を 決 定 す る必要 染色体核型 の 上 で した , 曇 篭 li 各 継 代 時 ど と の 各 種 構造 的 異 常 を 保 有 す る 細 胞 数 と 構 造 的異 常 お よ び そ の 合 計 と 全細 胞 に 占 め る 頻 度 個数 - es 出血e そ こ で 著 者 は 第2 4 代 か ら3 1 代 の 8 代 に わ た . a tid b o r D i c e n t ri C h ro m os C a st e m St e m 染 色体 核 型 の 上 で の n e t a の の 、 g st e m 橡型を の ai n 、 r e ak s s och ro m g \ の n e T 葦g… \ ス は動力学的平衡 の もと で 増穂し n e 突然変異 誘発 性化学物質 t li m . \ \ ル 細胞 遺 伝 学 的研 究 に 好 適 な 条件 を 所持 し て い , , がある 染色体核型 の 上 で 変化の 認 め られ , ウイ , を使用 す る研 究 に 際し て は e こ の . ai n m st e m 色体 に 対 す る影響の 解析 に 先だ の 元 の 組織と 異 \ 植物 材 料 か ら の 培 st e m は n e 別 の ′ト , 淘汰 の li 核 型と があ る て . され た 元の 組織 と しか . た 染 色 体 核 型 上 の 変 動 を 示 す の が 特徴で っ st e m . C e l1 正 常 な 染 色体 っ 。 次の よう に 2 種類 に 区別す る 必要 があ る , て い ない 他の多くの 動 . 成す る もの が多 い べ 長期 間に わ た 新 しい 別の 核 型を も っ た . 竃 元 の 組織 の 正常 l 適 当で はな い 核型 と異 な る染色体数 を も つ 別 え の 1i す なわ ち あ る範 囲 内 で . その . c e 11 . に た え ずあ る種 察 , 蔓 _ c 転 換 に は染色 ・ 突 然 変異 誘 発 性 化学 物 質 . め な けれ ば な ら な い 考 ヒ ト の の に から は 有 糸 分 裂 に お け る 染色 体 の 行 動の 解 e X 線 照射 . が る おり て っ s t r ai n s 感 染 に 対 す る 染 色体 核 型 に み ら れ る 変 化 を 検索 す る の そ の 合計 と 全 細 胞 に 占 め る 頻 度 を 総 括 し た , C ell 成 する に 転 換 は 常 時起 り う の へ e s C e11 ・ 染 色 体核 型 の 特 徴 を 解 析 す る e を有す る細胞数 と構造異常 の 個数 を各継代時 ごと に 記 載し 1i n を 区別 し て い る e s 体核 型 の 上 で . . 蓑5 li n e l1 o n b ) の よ う な同 a r m し たい は e 析や 色 体異 常 分 短 の 記 載法 の 著者 は m は 第2 9 代 の 細 胞 に 1 個 の e る の が しば し ば観 察さ れ た い o s o る こ と が判明し た い o s o m o s o 分 体端 部 が 相 互 に 結 合 し 成し て ch r o m . e n L ch r o e g ch e ri c t そ の 端部 と端部が 単に 結合す . 形成さ れ て て っ c e n 7 9 % (6 7 % ) . . 8 9 % (8 2 % ) 0 3 % (0 2 % ) . . . . 0 06 % ( 0 06 % ) , . 1 9% . (1 9 %) . 7 Pt K C el1 I 1i n 研究者 の 観 察 結 果 も 考 慮 し て 考 察 を 加 え て み た い 1 色体数 の 分布 と c ell 体数 が11 本 の 細 胞 が てい る が認 め ら れ る が ない の は si d e li c Sid e い ま た . s id e li ドは は Si d e , a n t Z 岬 検索 の 結果 d a n 確立 さ れ た R い る k an て3 っ t s ら8 ) は ra k t g a n の モ ドの ー ドと な り ー c ell 定し a n た後 li n li c e11 1i th ■一 si s d a ti o r e ta r 20) (K at z (T n o d が起 る が ら ) g n a ro o g c e l1 c el1 a ro o 1i 1i に つ と 別の R で こ の よ n e li n をさ らに 長期間検索 を続 け e して ゆ き た い 2 その後 、 つ , る い e ri o d p よ に n e 鵠さ れ R at k 転換 が 著者の a n g い て つ その後 , St e e n i s 9) . は L B L . e v a n r o w がら も , 正確 な 頻 度 に li 6) ら e v a n T) . H に n e e m a n y p r e ak a g e b , お け る 染色 体 の Z a n 初めて 指 d st r a ら1 0 ) が 言 及 し て い る が n g て ら8) 著 , 構造異 常の 頻度が 高い と し な . つ い て 報告 し て い 表3 い て , る も の はな 腕 . a s e e の o s o m ty p al b が e r e ak a i , s o c s o c m m al o s o m o s o m al b r e ak a e g はま れ で あ る と し て い る が , に 関して は 著者 の . C ell L e v li n ・ e S te 1i r o e nis n e 、 進行 し に r e ak a a g 26) o a r cle y s p g は e b o r . r ▼ . 細胞中で の m d ti a と は b は レ また . ザ ー で ー で typ C el l h C re a 染色体 の 損 傷 . 関して は に e r o こ の こ o r o m k a g よ e h C r ・ り も頻 の cy cle o s o m e 常に , al G l b re ak a ・ . の 各染色 体 に つ 染色 体 1 本 あ た り の 発 生 頻 度 を 各 染 色 体 の 短 at h h g 期 と G 2 期に Ch r o に r o m 染色 体 の 微少 部 分 に 損 c r a n d a ti d m o m ty p , 統 計 学 的 解析 の 結 果 で はな く e と もN ら 28) Ch , o 染色体の 短腕 に 発生率が 高 い ch r o h C e 11 次の , B 1i n 長腕 別 に 示 し た が . 度は i e 2 ‖ 発生 が高 い こ と を示し て い る の e b . lti p l u h C その 毎世 代 , c y cl e が 修復 さ れ て い る の を 観察 し て い る m e g 頻度 が 特 に 漸 増 の 傾 向 に の て c e11 a r o o g re ak a 修復機構が存 在す る証 左と な ろう , 傷を っ け た あ と , . まず r) r e ak s a n a n ・ が 1 個 も 観察 さ れ な か b k O r n a ti d - m o r s R れ らの 点を解明 っ 際し に C ell さらに , R at Ch r o に よ o si s 著 者 が 今 回検 索 し た1 6 0 0 個 a g た こ とや at o ch 増加あ る の とは b す な わ ち これ ら の mi t 理 論的に 次 の , て っ 期よ り も S c ell a r o o 特別 . こ の こ . is . . 11 0 % )〕 . は e 修復 の 傍 証 と し - 29 5 % ) - . も し修復機構が な け れ ば , le C elI , g こ の て っ ま た . 毎 世 代 ご と に 何 ら か の 修 復機 構 が 働 ら い , ない ことは ・ , を 区 別せ ず に 算 . ∼ . r e ak a したが u lt i p っ あ る 不連続 て っ て い っ つ 一 が か な り の 個数 観察 さ れ る は ず で あ る e ak s m r e ak (10 5 % e (3 5 % e が 高い が ( 図 6 ) 者が 調 べ え た 範 囲 で は a n こ . . ド の ー typ 漸増の 傾向 に あ り ー c ri b うるの で of tt typ ごと に 発生 し こ . の モ へ 染色体 の 構 造 的 変 化 . 構造異常 に Va n い ti d m a る た めと 考え たい m al S O r o い て て い わ た に . 培養 R a t k い うなモ かなる原因で起 るか は不 明 で あ るが い at は 頻 度 は 各継 代 時 で は 増 減 が 認 め ら れ の e g m a ti d も 報 告 さ れ て い る8 )9 ) n e r e ak a は減 少 傾 向 は 認 め ら れ な い は こ れ ら の 時 期 よ り 遂 に 回復 し え ず に 死 滅 し た ka b い あるい は li と p 長期間 a c ell . a g 次 に 3 倍体域 , r e ak . r o n e ら1 9)) a r o 著者 は , しか し . 不 連続 に な , b 見染 一 . 定 義づ け もか な り 差 異 が あ の p の , わゆる い . a g で 急速 に 死 滅 し た 例 を 経 験 し て , B . た細胞が 大半 を占め る よ っ の で 定し た て る が 〔c h た細胞 が増加 し っ 25 ) は次 の に は 染 色分 体 を 識別す る こ と はむ ず か しく r e ak る . し か し 実 際 の 観察 に あ た り . 腎臓か ら 50 代 ( 約 1 年 間) t b と ap て 3 倍 , 般 一 ap g 切れ に 他方 . に n e へ とな る 場 合 で あ る 研究者に よ っ っ は は 両方 の 染 色 分 体 の 同 じ 部 分 が 切 断 に よ い g re ak る よ う に 見え る て い ると は考 え られ て い な い い 次第 に 死 滅 し た 例 を 報 告 し . で e ドの 転 換時 期 に お い て は r o w 著者 , b (1 8 4 e 生 ず る 狭 い 非 染 色性 の 部 分 で 染 色 分体 が こ の 部 分 で 完全 a r o o g 定し な れ ら2 倍体 域 か ら 3 倍 体 域 あ る い は 4 倍 体 域 g 一 転換 を 2 回線 り返 し た 後 倍体 域 の 染色 体 を も っ が 染 色体 が 大 半 を し め て い た が 倍体 域 の うに な 部分で 切れ が認 め られ る の c el l a r o o 次第 に 2 倍 体 域 の 染 色体 を も には2 色分体は 一 著者 と 同 様 . 著 者 も 今 回検 索 し た . a r o o g a へ 2 倍体 域 が モ る て こ の しかし8 代にわた . 2 倍体域 か ら 3 倍体域 , か ら 2 倍体 域 てい 沿っ ty p と も 高 頻度 に . す なわ ち . の縦軸 に e (7 9 % ) と p li n n e 貫 し て 2 倍 体域 に 認 め ら れ る が 一 a g r o r n a ti d e ty p と な k が e なお . h C a ti d m Si d e n e R at li n 体域 が 次第 に 増 加 す る 傾 向 に あ る m li s o ch r o よ う に 区別 さ れ て い る が ま た新 しく 別の n e 22 ) 2 4) e n e e n 原因 で は な い か と 考 え て H ey li st e m か の つ ∼ H は こ の 細胞 の 多 極 分裂 が のモ く で 細 胞 の 多 極 分裂 を 観 察 し て い る が n e ー ain m い , 総 染色 , i と 認め ら れ た を形成す る能力が あ る た め で あ ろ う と 推 n e 測さ れ る eI1 1i は に 各継 代 時 の . 新 し , 各継 代 時 の 細 胞 の 染 の n e 貫 して 一 各継 代 時 . li 47 9 は表5 に 示 し た よ う に % ) そ の 推移を 図 3 に 示 し た が , 細 胞 遺伝学 的 研究 で . 染 色体 の 数 的 変 化 . 著者 の 検 索 し た っ の e . こ . m a tid 発生頻 , typ と e 1 の 染色 体 の 長 腕 と X は同調培養さ れ た を 用 い た X 線 照 射 実験 で ro と が判明し た R b at k a n r e ak a g g e . a r o o の v a n c e 11 部位 に 武 48 0 よ る 発 生 頻度 は ょ b て っ 告して re ak a る い 部位 を B 細分し di a n はできない が に生起さ b て n n g の S e re ak a も で e g b r e ak a k r e a a R a n なか た g a n c e ll a r o o b g ak H ま た . re a え ch r o e tl m e ch a n k a n Z - d a n s 。 m r o a n m li o s o m e は1 偶 n e で - d ra n た o s o o L は で に e m あ べ は て い より e x ch a n ch r o m e g っ て もこの る L ・ o が ・ m . た っ L は e な 性 質 の 推論 の ・ 一 o s o m に は e の で 形成し , 特 , 7) 同様 o s o a tt e r n din g を 構成し て い る 2 本の染色 p 検索の 結果 は表 4 . よ に a n di に 示し に て っ ric ch r o も2 2 偶 の m di 検索 を行 な の c e n o s o m こ ri c t た結果 っ m い . その ・ dic 結果 そ の ・ t c e n 雨 ri c e at を形 e と が 判明し ch r o m o s o m e 特 に d i c e n t ri c , を 形成 し や す い 染 色 体 の 組 み 合わ せ e た と 報告 し て い る っ は な い か と考 を形成 す る染色体 の 組 み合わ せ は e e v a n L . の e v a n 染 色 休同定法 B 認 に di a n n g a tt e r n p ある で 最 近 開発 さ れ た染 , よ る 染 色 体 同定法 を 採 に . d i n g p a tt e a n s ら ) e r s o n p (S 法 A S G . る 染色 体 同定 法 に は に よ r n 30) 染 色 法 (C a 4 な らび に 表 5 - B 用し た 9 % ) ・ 検索 し た もの て っ 著者 は より 正確 を期す る ため t 色体 の ・ L t ri c f dic di は r a m g c e n c e n t ri c こ の h c f R at ri c r a k a n o s o ch ro u m (S h i r ai s hi 尿 素 処理 法 , ら32 )) n e r) T ・ ry 蛍光 ・ p 処 理法 si n g m m e o ょ - を伴 a r o o e ll e n c r o m ri c t e n B o s o a n m ch r o m d in g - の そ の 端部 と端部 が単 に 結合す る こと に t t る こ と を確認 し た て い ri c e h ような di o s o r o m して c e n する原因 は不明で あ るが , t 形成さ れて ri c L ch r o e v a n n e v a n 長 さ や形 態 か ら の m e L ・ ‡) m は い る と推測し て を形 成 o s o m e この C e l1 1i n e B 叩d 構造がま B て 他の動 ・ 植物で は ・ ヒ ・ a n di 差が あり に at は k a n G , ry p t QM , 蛍 光 染色 法 よ り も . g C ell a r o o a1 r e w 検索 に は た同 っ て よ る 蛍 光 染色 で は に 34 ) の や B r o T r y p た 一 . の Gi 度 一 t w H) ら n 法 , T r e m s a - B y p sin 核板 を脱色 し AS G ・ ほ ぼ 目 的 は適せ si n 処理 法 の 方が t 染色体の 解析 に 有利で あること B の や そ の 分析写真か ら も推測さ れ る の っ 処 理 法や 尿素処 理 法 で 明瞭 な sin 構造 は やや 不明瞭 で あ っ た が られ た R T 構造 を認め たが d a n ・ ヒ ト . d a n ・ 種に , たく認められな い もの や 構造の 鮮 明 さ d a n っ B の 一 染 色体 の 場 合 と 手 技 の 上 で 多 少 変 更 が 必要 に な 著者 は B 欠 て く る B ず れ の 方法 も は ぼ同 い . が得 られ る が e r n 方法 に よ っ の a tt e r p は 染色 体 e o s は で p at t っ れ は 著 者 の 観 察結 果 と 同 dic 染 色体 g n な ど種 々 の 方法 が開発 さ れ て い る b ri g h t ) e a ト の t m g e ・ を伴 なう こ と はま れ t e n こ . t L 33) (S c e n t ri c およぴ ch r o m e n ri c よる 蛍光 染 色 の 形成さ れ di t a c e n e v a n ら ri c t c e n di 6) e v a n di て っ 端部と端部 が単 に 結合 い は す なわち . , に こ の . u si o n e は染色体の 長さ や 形態 に よ ・ 今後さ らに 多 , 見 られ る に n e さ ら に 著者 は こ の . 失 を伴な わ ず ょ る 2g ) a c e n Q M の m e o い て 般 に は決 一 である 一 つ li た と 報告 し て い る っ ky f 染色体の 組み 合わ せ が な い い て ch r o m で m . つ に が み 観察さ れ た の は高頻度 ( 8 m e は特 別 の タ イ プ の n e で c el l a r o o g なう の で あ るが li d . o s o e B o s o m r o m ch r o m " st ra h c r b は認 めら れ " n ot 各継 代 時 の 頻 度 は 表 1 . あ ると 述 で m こ ・ ら ) 示し た 7) ch r o ri c 結果 を統計 学 的 に 解 析 し た 31 ) v a n t c e n 休 の 同定 を行な ・ 検索 す る 必要 が あ る い て つ め られ た が ch r o m ( 分 休 場 部結 u si o n e n ti c S 図 , の n e g ri c t c e n 成 しや す ey m di o r g o s o c ell a r o o g c e n t ri c k 種の . 蛍 光 染色 に よ る , di れ らの い ず れの 算 出 こ , li が観察さ れ た と い う報告 はな く at f a r m や すい 染色休 の 組 み合 わせ が あ る はな か 数の 細胞 に R 職 , → , . e x ch a n に d e n こ の 証 左で あ ろう の っ は1 6 0 0 偶 の 細 胞 中 に 4 個 し か e る よう な 報告し di m た っ a 各絶 代 時 ご と の プ は ほ ぼ平行関係 に あ る ー k at o s o r o m て い g い て つ は 染 色体 1 本 あ た り の 頻度 の 指標と し て h a r m , う 染色 体端 部 の の い v a n - 個数お よ び の e に 観察 さ れ な か k k れ を著者 は こ . 合) と 仮 称 し た が っ よう な 同 を 形 成 し て い る の を し ば し ば 観察 し o r m ま た こ の di 法 を採用し て も良 い と 考え られ る e at 各 絶代 時 ご と の 推 移 を 示 し た が g c ・ f の - . プと図 6 の カ の こ い て e ak a at よ 図6 . つ と か ら 今後 s 。 m R に 発 生 頻度 が 異 な る の こ R 部位 とは た も 人工 的 で の 染色体の 微細構造 を解明す る 上 で 興 ー っ R■ in g 著 者 は 図 4 (F b ) . 長腕 染色 分体 磯 部 が 相互 に 結 合 し 染色体内で て っ の に g よ に か と 推測 し て い る 発生 の 推移を 示し ri n の e g 染色体 , そ れ を 保 有 す る 細 胞数 の 頻 度 に e e e g 図 5 に は 1 細胞 あ た り の b 5 の カ t e n 切漸 さ れ た 染 色体 の 断 端 の よ う , な特別 の 付着 し やす い 性質 を所持 して い る の で はない c ell r e ak a 頻度 m g g 染色体 の 端部 に は の とを報 る r e ak a に こ 概 に 著者 の 結果と 比較す る こ と 一 味あ る こ と で あ る の 照射時期 , て い っ らは b e ni s a tt e r n p . b ほな く で m 自然発生的 な , せた a r o o g S te るの で て い o 好発 部位 が異 の e g v a n . d ra n at a n di n 染 色 を 施 し 鏡検 a nd P a tte r g n し か し 今 回 の 著者 ・ ・ 確認 し 構造 を得 る 必 要があ 処理法 ▼ 尿素処理 法は染 Pt K 色体表面 の 微妙 な 処 理 法で あ り , は 使用 で き な い を 得な か た 以上 R at k し たが ・ B て っ も Q M て っ っ B て っ e の d a n 構造が い くぷ ん , て い c e11 a r o o g a n 1i n e こ の よ う な高頻度の 異常 が毎世代生じ ることに い て 推論 して み た い つ 悪性 腫 瘍 細 胞 は 体構成 を も つ 存在 は非 常 に ま れ で あ る 発生 や増 穂 に て い っ 染 色 体 研 究 に お け る 最 重要 問題 悪性腫瘍 の c ell 方 一 . が st r ai n c ell 正常 核 型 を 消 失 す る 過 程 は の 摘 ‡油 川 で あろう 腫瘍 , で ある 両者の 場合 と も 間 は 無限 の 生 存 期 間 生 存形 態 の つ 一 適応の 表 徴 あ る い は指 標 と も み な し う る in が c el l li 変化す るの も に n e 腫癌細 胞 に 変 化 す る の も . そ の 変化 の 原 因 は ウ イ て っ くる て R . k at e n e ti c (g そ こ か ら新 しい て っ た 不 安定 性 で あ る35) っ 遺伝 的多 様 性 , a n S g t p li n e m 両者の 場 . oly m o r p hi ) が生 s m が 次第 に 淘 汰 さ れ li n は 8 代に わ た e 的 な 淘汰 を 示 し て い , あ で a n おい て は 3 U . ♀ か 0 : g t た と もN k a o s) n = 12) 掛 ナた 雌 の か U R a で2 0 t 細胞 : 2 や特 徴的な形態 な どか ら 染 色 体上 の 変 化 の 解 析 著者 は f 門 の k a n 毎払代 時 ご と に 2 0 0 個 , に g 4 はN で a r o o c ell li n e に 総計1 6 0 0 個 の 細 胞 に 胞遺伝学 的 検索 を 行 な い . て っ つ つ 1 に a o b r e ak a i . 1 とN . 高 の o 5 di ri c fr a , c e n m g 1 c t ri c e g s o ch r o に m a ti d ty p ch r o m B typ と is e o ch r o m と が 判明 した い こ o s o 端部と端部が単 された f u sio 2 . c 蛍 光 染色 m r a n ch r o m o s o m e d o m , X , o s o m di n g at p te a に e えた typ (3 e . a ti d b . に 結合し て 形 成 さ れて は よる o s o m e X 染色 い , 細 で Q M に dic よ る 染色体上の 変化を 追 求 し , . a r m d e n . B a n di の 構 成 を 検索 し n g p tt a . di で e r n di c e ・ c e n t ri c 特 に 形成 し や す い 組み 合わせ が な い れ ら の 数的 な ら び に 構 造的 変 化 に こ つ いて こ い つ 考察 を加 . . T . る こ と が確認 終 始 御 恩篤 な 御 指導 と 御 校閲 を 賜 恩 師松 田 健 史 助教 授 に 心か ら 感謝 い た し ま す ま た 細胞 を 分与 し て い た だ い た 米 国 R o s w ell P a r k e m o ri al t e n そ の , . ます ・ . りま した M . a C e nt , を 形成 し て い る 染 色 体 の 組 み 合 わ せ は 稿 を終 る に あ た り . . a tt e r n p , こ の と し て 著者は つ e r ea と命名 した , より r n っ typ は 染色 体 の 欠 失 を伴 な わ ず 一 5 % それ らを仮 . いて つ 他 の 研 究者 の 観 察 結 果 と の 異 同 に , - e s 頻度 は , di n g Xb , e に m . a n m を しば しば 観察し た . r o 2b . そ の 証 左の . n 6 a ch r o m a n t a C e n 減少傾向は認 められ なか , を伴な う こ と は ま れで t e n 蛍 光 染色 の ri c 2 , s p . ch r o rn o s o 2 の 染 色体 に は 各 3 種類 が . a (0 3 , . ri c t よ る蛍 光染色 に よる B に 1b . . 1 い て . m e s a ti d g ∫柁 継代 を い て o s o 体 に は 2 種類が そ Jれ ぞ れ新 しく 区 別され て = , al at i d m 発生率 Q M . に は理 想的で あ る 4 代 か ら3 1 代 に わ た g n at i d ( 0 06 % ) e s c e n m 1 の 染 色 体 の 長 腕 と X 染 色体 の 短 腕 に . の e ch r o さ らに y li m di 特 別の 増加 , また ・ at r id a c t o s o . それ . Ch r o m , s o ch r o ch r o m g っ 3 倍 , . . . 語 ot o r o u s た ぅ 1 1 0 % )〕 ∼ tr i c そ の 染 色体 数 が 少 な い こ と ( 8 . 2 の (P a r o o m . 29 5 % ) ∼ . h 結 ro (1 9 % ) o s o m と が判明し た R■ at k ri n . ch e g e nt s m (1 0 5 % n . 9 % ) . i , . a ti d C . (7 (1 8 4 % ) s が n e . は 変 動 は 悪 性 腫 項細 胞 る と考 え た い k re a ch r o m . 環 境 に 対 す る 細 胞 遺伝 学 こ の . 持続 的 な 変 化 に も 匹 敵 し た っ r o m 毎世 代 染 色 体 の 数 的 な ら び に 高 頻 度 の 構造 異 常 , li と な し か し 8 代に わ た . 各継 代 時 で は 増 減 が 認 め ら れ る が 〔c h ス 不 安定性 に よ こ の . e c ell a r o o を伴 な う 変 動 を 示 し て い る の ル 転 換 の 初 期 徴 候 は 染 色体 の 数 的 な ら. び に 構 造 , 的異常 と い じ _ e sid いて 正常 細 胞 が 悪 性 . た っ n e つ , st r a g . 遺伝 的 , c ell . 感染で あ る ら し い こ と は 非 常 に 注 目 さ れ る 合と も の へ r a 3 正 常 細胞 が に 染色 体 上 の 変 化 は , なか か の つ 絞染色 , li 貫 し て 2 倍 体域 に 認 め ら れ る が 一 e X Ch a n , (8 9 % ) そ . 細胞 の 限定 さ れ た 生 存期 , と変化 し へ 生存 形 態 か ら も う の つ 一 変化 し に e r e ak s f , し . b o r b % ) 悪 性 腫 瘍 細 胞 に 変 化 す る に 匹敵 す る 過 程 で . li n 機能的 , ドは い st e m 染色 体 の 横 道 異常 は 高 頻度 に 認 め ら れ た s p ri c か し現 在 で も 十 分 明 解 な 答 が 得 ら れ て い る と は い え な い 定して 一 ー . O r , るか は a g 染 色体 上 の 変異 . か な るか か わ り を も い 2 よ う な 両紙 胞 問 に 存 こ の . 方 一 る顕著 な染色体上の 相違が何 に 起因 し い 在し て の 各縫 代 時 に は い く , ain m 体 域 が 次第 に 増 加 す る 傾 向 に あ た染色 っ とが 多く の 例で 認 め られ て い る こ モ , 貫 して 一 ぞ れ の 構 造 異 常 の 全 細胞 に 占 め る 頻 度 は 正 常 染 色体 と は 異 , て . 正常体細胞 は 2 倍 数 の 染 色 体 を も ち の てい て っ . 各社 代 時 の 細 胞 の 染 色 体 数 の 分 布 で は . 体 数 が1 1 本 の 細 胞 が 観察 さ れ た 高 頻 に 培養細 胞 で ヒ ト の 1 認 めら れ . 度の 数的 な ら び に 構 造 的 異 常 の 様 相 を 解 明 し て き た が 次に 総括す る よ う な結果 を得 た よ る 蛍 光 染 色を 採用 せ ざ る に 481 細 胞 遺伝 学 的研 究 構造を得 る 方 d a n 1i n 度染色 し脱色 し た標本 に は こ れ ら の 方法 一 不明 瞭 で あ よ に C e11 I n it u t e st 墓相田 瀾博士に心か ら感謝い た し 482 17 文 1) Sh 1 9 (1 9 6 4) 2) B a w a M , m y も 209 4) Sh 8 r m 6 34 5 19 4 Ch : ・ r O L e v a n H e G r o w e n et n c e r n c 1 3) G ti cl S ev M 1 5) ed e se a r ch R 1 6) M Ⅹ 1 7) e x H p . 8 n H 18 , K , G : . N . H : . W . e r e d it N : . & y . at u re . J , h 85 , 44 . M , M , , g at k s , C . e n Ch . e ni s rk J , . 8 , J , 1 9) T od a r o a n . M a n I . 軋 C : . m a n a n e & y C . S a G & & . O ri g i 12 Th fe m al e W er e o f the In h c ra p c th e in e r e H e n ee n e A 2 7) Bl P . D K . A : . ri n db a n W e r g g a ll a c e 2 2 . r e e n e s u lt s e r V ・ A , 3札 り (1 9 4 9) G R t e rl a A . 405 R , E . i C n g . & . (1 9 6 6) P : . S o c 2 0 3 (1 9 7 4 ) H , . k O r te d h fe m al e a n r o m o s o m al t e ac i n h an g es a n : J Bi o l thi s p as sa g e (P ot o , t vi t r o d 13 O e re r c ri t t h at w a , pl x C ell . m (B a e rl ) 29 . . Ch : . (e d . : G D S H Y o o rk , 221 (1 9 7 1) 67 . 251 (1 9 7 1) M F . n 179 , a Hi h o r n d o n o n H Pl ・ m a l e) 臥 , . T 23 . ト児 医 学 T , . Z , C h : . y Ⅶ Se a n 223 , ′ : , m n e r N : . e r Y , b e e R , oc c u r re f o ll o d d A , ht g T . (1 9 7 3) u G m a n K) e & L ei g h し , J o s o m b o (B a B 0 . a n s $ O n e rl ) . C , 30 , & , 215 , J . L x H . H . P : . e v , pl ii . r o c ・ C ell . & . J ap . an B M i11 e e s . r 69 . D , 3 S t ei . I : . b n 6 卜1 0 1 p , . 1972 d r e d w el l - S P re a d , . (1 9 7 1) 9 71 , ・ R a e k1 8 n d 3 1 (1 9 7 1) , . G Ⅴ , J ・ 23 2 . a n c et D , E : . v a n s B i ol : . S . T , . E e w M , . a n (ed a v . . ・ A ・ ・ 2 41 , n e r N , p g r o A . G . Y e w i r e s s g B & . o rk G . M n e di c al ea r n A , e e ・ . u ni n id e a l a re lo w a q g u e n u c th e p as sa g e h r i n m f o f c o m os o m e v it r D 24 t o 3 1 a n al th e or b er hr o m m o r ◆c u lti v I an d a f y si s o s o m e o p h ol og y ti o n the o f m et a p h ase p l at e s w er e ra n ・ G) . St rat & r u n e G s ・ a r e s u lt s . h u nd , , 8 fr o m e . ress p . - V ol . , 1 8 5 (1 9 7 3 ) . o si d a , . N M , Y (1 9 7 1 ) at u re , e r m d u ri w ・ . e n u m . (1 9 7 4 ) 6 , r o m & . 7 29 d a c t y li s) a n . R 6 h rb 1 33 3 , n rsh d 970 1 , . in t h . , e n esis g a n . e r g t u i L - 6 7 v a n c e s & . , el g S p ri Ad . e w V . , c al cie n c e : . mi . e s . th e y the in li n e p ap er W , n G o n E : . . se u , n e ti c s r o us b e ca ish 帽 47 (1 9 7 1) t o o rh e a軋 . . M ill . e r e d it a s e rli n . d it a e r e H B e s J . r e w al . C e ll , h a n g es c e ll g ar o o in c . A V ol . E e a b ri , P , o s o H a n e r s o n p . G . k a n ga r o o r at d 3 5) . a s S & m : S . e ni s R S , r o : , N 3 4) . Ch . a r ri s , 3 3) . r o c H o n S hi . d . R , , . St e ta ti o d e st R M . u c a & ・ (1 9 6 9 ) . : . H , 14 9 , o o rh ea M A C . U l ri c h d 232 m E . M 3 0) a n c e r 1972 W 阿波章夫 A M E . . , 2 9) ・ n n , 172 - (1 9 7 0 ) . . (e d 99 3 2) , o o v a n M W a s eh o a r B , , O r p . W ski w 57 , & . r o p . (1 9 61) , a n G) 2 6) M r g 8t al, m , o e s . L - o n s n al e n e e n 2 5) a m E R L , 585 , 24) . o s sf el d S p , 臨床病理 r o m o s o m al n H 2 8) . J . d e s W il n efe ct s: e se n n st 196 , : , C e ll s (2 25 1972 . J . 8i ck (1 9 7 0 ) : M . o s o h (1 9 7 3) C : . A b s t = y e n e e n . S , H R e rli n E . 7 1 松 田 健史 h a . & . C el l . H ■ (1 9 7 0 ) In : D & . 379 . . C . 1 8) c H n e ti c s : . . m o 110 , . M , r o (1 9 6 9) A . B , G , A , P , N 117 , 21 3a . pl り o r n . . (1 9 7 3 ) o u s e (1 9 7 0) S te v a n e n h B i r th : . 5 . . . x 二M 2 3) 3 o : Y e w (1 9 6 6) (1 9 7 3 ) C . 64 , P el . o 145 . & . 343 , & 1 35 . W . . C (ed ) . N S , e n e ti c a & , 15 . ) . ra . A . J e r . e s 88 . . e r Bi ol . R り E 3 1) o o r c J : . P . C y to g : . (1 9 6 5 ) H n W , (1 9 7 2 ) A . . G . 145 . r o w e r edit a s 15 , ed e rl H , . a n db E oll . at‰ : . M d st . J e ri e s a n , . e r m 8 n S e 1 4) R e r m 1974 り J 払 1 st . oI s 31 , C y t ol . G 3 . . : , P , a rb e r, Ni ch (B a n C y t ol . B 12) n 4 B B , . Z - a r ti n ‥ & . e e rLi s , r o w e n et 1 1) G St B C y to g : . . a 43 . v a n 1 0) I a n M & . H . G , m e n e ti c a 9) A , 8) y B . . O S O m m , S . E 2 2) (1 9 6 2 ) e v a n 7) G K , & . C yto g : (1 9 5 1 ) 406 L R . t; a rL , L . 軋 , al e n , 6) D , (1 9 6 5 ) o o r e W & . th r o o 2 1) a n M , K (1 9 6 3 ) 299 , 20) , 3) 5) W . 献 d o m ly ・ P tK 去e le c te d The d n a e w e li n e s si d in c a n it h e r 2) I n t h i s e . v a r i a ti o n h ro oc a r E s ti 3) (i s hr o m c d n a at e m s a ti d t y p e) c h ra n d o m os o m e r o 4) T h e q t yp es f eac w ts e n m a r o 丘n e d m s A b et w n e e n n e W e re f re q u e n c . e r ti o t b r f s a b k s ra h s . sh rs o e ri o d u l at i o n t ha t d e w p t 29 5 % e m m ( h e a p p ti n o . i r o p o p a (7 9 % ) g C . he e r r a d e r v c t e 11 e a c of y of c al bs e O o . w be m re s e n p n r u t ri n o of v e n th o b se r v a ti o n e o u ll h g n e , W . o r aC , t lO 5 % m of b re ak s a n th e s h o rt 1 . u m o a n c h o re s c e d r a r N o l a r o S u , ri , v e r al m h s a p e) hr di c e nt ri , d e n di p l o id u h w o d fr n a a ti d m c fr e q s o o m os o r k a ge a ai re m c ch hig h r e ty C n g y b a ti d m g s ti1 1 s , . . a s o ri n ts ( 1 9 % ) n n r o h c 1 , o m 2 , i n e n es m c a m o r h r o h a t hi o s e n e m 2b li s e e n the o e c h r c y n , m o s o m e s o si c o n 3 5 % m r o . . d e ga p s (0. 3 % ) e s m t . de r ab le ll 0 % o . r m i tt e d o ty h ibite d e x l o n s a ar m g i g n i 丘c a n t N f o o 1 . . p e d , n m e gi o n r i ly w c e m p s a o a n 2 , s o g m d s o , o r o ks r n r o c h c ea X p at t e 1b o m o s o b of m 2 . , f o ce n ps in g a r e x ces s b e red w ts as t w d p es X a w e re m O St O f the j i n e n a Xb f o b y ot n i d e n ti 丘c a ti o n as s o X c th e c hr o of o s o m p r e s e nt i at e d th a e m u w it h c h r o m os ee r s . th o r ac e n . t ri c the t r v a o fl u o r e s o w of c o m p t h ei f t h e dic e r c c e l et e s h o rt n t ri c c h r o s p e c in c c p at t e h c r o m a r m s o m r n , o s o m m e s es o d d i c e n t ri c t the a e n d of t h ei r o m es l o n g . s o w e e t y p es re a n al y z e d w ith fl th e u or esc e nc e . a m t ri c c h of is t i o n a ll y n p a tt e r n t e st in dic e p o m b a n di n g p s , q ui n a c ri n e c o ns OC CaS r o the n to O , 6) C a g th e c u n u si s y ll o . B ased CO n s tr u s e m f s a p l oi d r a a n al d o h p o t te s o g ge r f al m a ri z e m o u s o o 483 細 胞 遺伝 学 的 研 究 の . t ric e n la e m m ti m e to d n s th e .u d ic th r . it h n r o o o n N o h (0 06 % ) f u si i n a c ri n e 月 h c a ri o V , W d a n h e a , o , e re T he 5) f ra g u ose o T h uti n ess m m t o m a ti r fro u b er e s m f o h d gi n g r a n , m c r o s all 31 li n e e n T h e d i s t ri b n o n o s o o m of n u m o h e ti m e 24 t g c r w be r m n he e li n t o r o n r o is , . h a ng e c x (8 9 % ) f e ll c ( 18 4 % ) b reak s d e a si r f n u m p as sa g e F r o m w o li n e p ea a d e n b ta i n e d i n a ti a m x e ste m th e as lt s res u 1) T h e i a m x C ell I d e o m l u o es s w h e th e r o m f o u es n , d a n a d n it d w e x h o r m cl u p e c te d at o s o o n a s c m d e d t h at r a n d o m n . o w s e re ig n fa v o re i fi c a n t d a s d if f e p r e n a rt i c i p a n c e e x ts is te d 484 田 蟄 嘗 曹 声 馨 妻 ≡ 轡 鸞 滞 き 盛 毒 暑 糞 冒 董 卓 鸞声 ヰ i 亀垂 ヽ 図1 a T tl a . C R a t k s of m . & B a n g a m c ell a ro o m e ni r sh a li a n k e , の ch ro K ) . 正 常 染 色体核 型 m o s o m よ り 引用 e s (e d . 〔A H n s u , P tK I C e ll li n e の 細 胞 遺伝 学 的研 究 485 題 謬 野 鼠 馳 馳 閤 囁 静 膿 聾 璧 盛 温 響 閤 聯 3 欄 ‡ l 寄 島 浮 X 図2 M ain st e m li n e の 核 48 6 田 武 ちi) 4 0 } D . t 1 1 1 n 6 5 ア 8 9 P ■ 0 - - 1 ■■即 S 1 2 -3 川 】3 1 4 t5 T 6 1 7 1 8 1 9 2 0 け 18 伯 2 0 2 t 2 2 2 3 2 23 2 4 日ulb b ■ r O r 亡b r o ■0 8 0 n セ 8 r o r e h r o m 0 5 0 m t £ ハ ㌧ : l ∼0 ■ l l 、 †(〉 コ0 ら 6 7 8 9 1 D ll P 8 8 8 8 巳e 12 15 1 6 2 1 2 2 4 ヨutr レ l フ % う白 ▲ l コn 二i l t O ト 8 9 1 0 1 】 ′ l P8 8 8 8 g e 12 13 川 15 16 17 18 妊 1g 2 0 _ 2 1 2 2 23 之4 8 Ⅳn n b モ r 。 f c b r o m D £ ○爪 1 0 9 ・ ヒ S P a ら 勘 b 1 1 1 2 1 3 】4 1 5 1 6 ‖ 1 8 19 2 0 2 1 22 2 3 2 4 h u t′e r M Q r 亡h r8 F セ脚 P ■ ・ 0 亡 8 図3 tO 9 P 帖 S a 亡e l l 1 2 13 " う1 各継 代時 に お け る 細 胞 の 染 色体 数 の 分布 と そ の 推移 1 ら 柑 1 7 1 8 1 9 2 0 2 1 2 2 2 3 2 4 Ⅳl川 be r ロ! ⊂ h【 rJ ン カモら Ⅳ Pt K きご ミ _ラ 鞠 e の ㌔ ぎ 碧 妄豊 慧 ・ ′ a t ld a g p b o r r e a 憾 啓 海 ′ k B 唱 憮 E d ic . . e n ri c t e x ch a n g e c h r o ch ro m m o m so o s o m . i s o ch r o m a ti d g a g a p o r b r e a - a -b - C : e Ch r o m ・ rl n . g a C e n ・ a t id Ch ro t ri c m o r p f o s o r a g m m e t e n e F 図4 培養 各代 に お 的異常 の 種類 い b 電 D C 487 細 胞 遺 伝学 的 研 究 鞄 書芸 ch r o m li n 雷 … 喜 癖 甲 A C ell I ーa -b - C ニ . . . di c e n a r m t ri c e n ch ro d a C e n t ri c て 観 察さ れ た染 色体 の 構造 f u si f ra g m o s o m o n m e n t e k re ak 一 田 p 互 乃 P 6 図5 の の . 02 01 27 2 8 1 細 胞 あ た 一) の C h 29 r o m う0 o s o m 個 数 と そ れを保有 す る細 胞数 推移 う1 al の b k r e a 頻度 の a s s 8 P a g e 各継 代 時 g e n u m b e r Pt K I C ell li rl e の 489 細 胞 遺 伝学 的 研 究 q 困 米 ◎ 巾 樹 × ⑳ 愚 曲 聴醜 囁 国 璽 已 h 単 項 = 首 盲 点 芯 壷 曲 想 殖 や 「 ご 完 ) ト 屈 囲 匪 国 (ロ ▼ - 整 ○ 図 8 di Q M に よ るB c e n t ri c ch r o m を同定 し た 1 例 a n di o so m n g e p a tt e rn によ , を構 成し て い っ て る 2 本 の 染 色体
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