平成 25 年度新潟大学脳研究所 ｢脳神経病理標本資源活用の先端的共同研究拠点｣ 共同利用・共同研究報告書 時間的空間的特異的 Scrapper ノックアウトマウスの作製と解析 育子 1）2） 伊藤 誠二 1） 片野 泰代 1） 矢尾 崎村 1）関西医科大学 建司 3） 2）浜松医科大学 3）新潟大学 研究�� SCRAPPER は神経シナプスに局在し、神経伝達物質放出の制御にかかわるユビキチン E3 リガーゼで ある。Scrapper 遺伝子ノックアウト（SCR-KO）マウスが生後致死であるため、成体での SCRAPPER 分 子の機能を十分に解析できなかった。そこで部位特異的なコンディショナル KO（cKO）マウスを作製 し、その詳細な機能解析を行うことを計画した。平成 25 年度においてコンディショナルノックアウト マウス作製のための floxed 型のベクターを構築し、ES 細胞に導入し、相同組み換え体を選別した。 これらの組換え ES 細胞株よりキメラマウスを作出し、生殖系列に ES 細胞が分化した個体より標的 floxed 型マウスを樹立し、現在 F1 世代のマウスが得られている。今後ドライバーマウスとの交配に より部位手特異的 SCR-cKO マウスを作製するため、共同研究を継続していく予定である。 クターを新潟大学崎村研究室で開発された RENKA A�研究�的 Scrapper 欠損マウス（SCR-KO マウス）は体が 株 ES 細胞に導入し、相同組み換え体を選別する。 小さい上に寿命が短く、恐怖記憶形成の異常、脳 これらの組換え ES 細胞株よりキメラマウスを作 の海綿状変性や神経細胞の萎縮といった老化現 出し、生殖系列に ES 細胞が分化した個体より標 象が見られる。SCR-KO マウス脳において変動して 的 floxed 型マウスを樹立する。さらに、脳部位 いる分子の同定が神経変性疾患病態解明の 1 つの 特異的な Cre 発現マウスを利用して、部位特異的 鍵になると考えられる。 なノックアウトマウスを作製して解析に供する。 SCR-KO マウスは、多くの個体が生後半年程度で 死亡する。また、産仔数もメンデルの法則に従わ C�研究�� ず少ないことから、SCRAPPER が発生段階において 現在までに、コンディショナルノックアウトマ も機能していることが予想される。本研究では、 ウス作製のための floxed 型のベクターを構築し、 致死の表現型を回避し脳に限定した機能を解析 このベクターを新潟大学崎村研究室で開発され することができる、部位特異的なコンディショナ た RENKA 株 ES 細胞に導入し、相同組み換え体を ル KO マウスを作製し解析をおこなう。 選別した。これらの組換え ES 細胞株よりキメラ マウスを作出し、生殖系列に ES 細胞が分化した 個体より標的 floxed 型マウスを樹立し、現在 F1 ��研究�法 まず、floxed 型のベクターを構築する。このベ 世代のマウスを得ている。 － 370 － �.�� 今後さらに、脳部位特異的な Cre 発現マウスを 利用して、部位特異的なノックアウトマウスを作 製して解析に供する計画であることから、今後、 交配を行いノックアウトマウスラインの樹立が 必要である。また、解析に適するドライバーマウ スの選択および交配、その後の解析を行う必要が ある。 �.�� SCR-cKO マウス作製のための floxed 型マウスを 樹立し、F1 世代のマウスが得られた。今後ドライ バーマウスとの後輩により部位手特異的 SCR-cKO マウスを作製する予定である。 F.研究発� 1.��発� なし 2.学会発� 1)矢尾育子 「ユビキチンリガーゼ Scrapper ノックアウト マウスの解析」 新潟脳神経研究会特別例会 2014/2/10 新潟 2) 矢尾育子 「先駆ける研究に至るまで」 第 3 回東北脳科学ウィンタースクール 2014/2/15 仙台 �.�的���の出願�登録���予定を��� 1.特許取得 出願予定 2.実用新案登録 なし 3.その他 なし － 371 －
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