遺伝子工学 フナコシニュース 2014 年 2 月 1 日号（No.558） funakoshi news NEW （株）バイオダイナミクス研究所 全製品 40％ OFF キャンペーン 遺伝子工学 メチル化 ［製品ページ番号］8250 期間：∼平成 26 年 2 月 28 日 RNA メチル化 RNA 解析用の亜硫酸水素塩処理キット EZ RNA Methylation Kit 遺伝子工学 miRNA RT-PCR RT-PCR により miRNA を検出するキット Simple miRNA Detection Kit ● 特 長 ● 試料 RNA 中の非メチル化シトシンを，亜硫酸水素塩により短 時間でほぼ完全にウラシルへ変換して精製するキットです。 RNA のメチル化解析に最適です。 特 長 ［製品ページ番号：6829］ ● ［製品ページ番号：8263］ れます。 NEW 対象の miRNA を RT-PCR により検出します（プライマーは別途ご ● RNA の変性と亜硫酸水素塩処理は，1 ステップで行えます。 用意下さい）。 ● 脱スルホン化はカラム内で行うため，煩雑な沈殿処理は不要です。 piRNA や 3' 末端がメチル化された植物 miRNA など Poly（T）タグ ● 試薬は Ready-to-use フォーマットで，バッファー調製が不要です。 が付加しにくい低分子 RNA も，独自の ON tag によりバイアス無く ● 精製した変換 RNA は，RT-PCR，ライブラリー作製，シークエンシ 検出できます。 ● 試料 RNA 中の非メチル化シトシンの 99％以上がウラシルに変換さ ング，次世代シークエンシングなどに適用可能です。 PCR 産物のサイズから，miRNA かその他の低分子 RNA かの判断を 行えます。 ※ DNA 分子量マーカーについては，フナコシホームページ（製品ペー ● ＊ 試料：DNA フリー RNA 32 ng ∼ 3 μg（0.5 ∼ 1 μg を推奨） ● RNA 回収率：＞ 80％ ＊ 試料 RNA の DNase Ⅰ処理を推奨します。試料調製および DNase ジ番号 895）をご覧下さい。 1 19 処理用キットについては，下記をご覧下さい。 2 ※ フェノール溶解液からそのまま RNA を精製するキット： Direct-zol RNA Kit（製品ページ番号 5429） bp ※ 溶液から RNA を精製・濃縮するキット： 100 RNA Clean & Concentrator Kit（製品ページ番号 2902） 30 ： マウス精巣 total RNA から，マウス piR-1（DQ539889, Mus musculus ）を検出した。 Lane 1：分子量マーカー（DNA SmallDynaMarker, #DM100） Lane 2：Target mouse piR-1 20 マウス piRNA の検出 操作方法概略 5' P 1. miRNA に ON tag を付加する。 miRNA 変換反応後のシークエンシング結果 OH 3' 5' Ligation ON tag 配列の 7 番目にメチル化シトシン（5-mc）を含む RNA を試料とし，本製品を用いてウ ラシル変換を行った。精製した RNA で RT-PCR を行い，シークエンシングを行った。7 番目のメチル化シトシンは変換されることなく残り，非メチル化シトシン（3，4，13 番目） はウラシルに変換され，cDNA シークエンシングではチミンとして検出された。 2. 逆転写反応を行う。 3. PCR を行う。 キット内容 RT primer Reverse transcription miRNA specific primer ● RNA conversion reagent ● DNase / RNase-free water ● RNA binding buffer ● Zymo-Spin column ● RNA wash buffer ● Collection tube ● RNA desulphonation buffer Universal reverse primer Amplified product 品 名 メーカー 商品コード Simple miRNA Detection Kit BDL DS700 検索 http://www.funakoshi.co.jp/contents/ 140201s_p19_k_i_p.indd 19 通常 キャンペーン 品 名 包装 / 価格（￥） 価格（￥） メーカー 商品コード 包装 / 価格（￥） 1 kit / EZ RNA Methylation Kit NEW ZYR R5001 c ZYR R5002 c 1 kit / 35,000 1 kit / 113,000 39,000 23,400 本 紙 に 掲 載 さ れ て い る製品はすべて研究用です Original RNA with Methylated CpG: Converted RNA: cDNA Sequence: お問い合わせ先 試薬 - ６８４ １ - ６２０ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ ＦＡＸ ０３ ５ 75 60 50 40 各製品の詳細は，フナコシホームページにて『製品ページ番号 4 桁』 を指定してご覧いただけます。 2014/01/17 15:48:41
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