Dream Sprayの3つの効果

Application note – Dream Spray for AB Sciex MS
弊社従来品nano XYZ InterfaceとDream Spray for AB Sciex MSの比較を実施した。
＜LC-MSMS Analysis＞
MS; 4000QTRAP(AB Sciex)
AS; HTS-xt PAL (CTC Analytics)
LC; UltiMate 3000 (Thermo Fisher Scientific)
Solvent A; 0.1% Formic acid / water
Solvent B; 0.1% Formic acid / acetonitrile
Column; Zaplous αPep C18 0.1mmID x 150mm, 3um 120A
Trap; L-trap micro 0.3mmIDx5mm, C18 5um 12nm (CERI)
Flow rate; 500nl/min
Gradient rate; 5-35%B in 120 min
Sample; E.coli digest 500ng (Waters)
効果① バックグラウンドの低減
+EMS: 53.470 min from Sample 1 (TuneSampleID) of MT20141001083235.wiff (Nanospray)
Max. 1.2e7 cps.
Reference
675.8
1.24e7
1.20e7
1.15e7
1.10e7
BPT: 1.2e7
1.05e7
1.00e7
9.50e6
9.00e6
663.5
1/55
8.50e6
In te n s ity , c p s
8.00e6
7.50e6
429.3
7.00e6
459.4
6.50e6
6.00e6
5.50e6
5.00e6
403.3
4.50e6
4.00e6 419.4
503.3
3.50e6
411.4
3.00e6
493.4
2.50e6
441.4
475.4
2.00e6
445.3
547.4
1.50e6
461.5
607.5
529.7
1.00e6
482.6
642.7
5.00e5
562.6
0.00
400
500
600
741.2
684.2
815.3
744.2
673.4
708.5
832.3
889.0 943.0 1028.3
838.2878.0
761.3
700
800
900
1000
1115.0
1126.9
1100
m/z, Da
1238.6 1292.0
1200
1359.3
1300
1461.0
1537.4
1400
1770.2
1585.51635.4
1500
1600
1700
+EMS: 17.993 min from Sample 1 (TuneSampleID) of MT20141003080749.wiff (Nanospray)
1800
Max. 2.2e5 cps.
610.6
2.2e5
Dream Spray
2.1e5
2.0e5
1.9e5
1.8e5
BPT: 2.2e5
1.7e5
1.6e5
1.5e5
In te n s ity , c p s
1.4e5
1.3e5
1.2e5
Dream Spray付属のチャコールフィルターが
大気中のシロキサン等を除去することで
バックグラウンドが大幅に低下!!
1.1e5
454.5
1.0e5
9.0e4
8.0e4
7.0e4
415.4
422.0
443.4
6.0e4
5.0e4
468.0
4.0e4
404.8
479.3
593.5
499.0571.3
684.1
563.2 580.5
640.1
773.0
721.1
3.0e4
650.2 673.4
531.4
2.0e4
690.2
1381.4
885.8 903.8
738.2
1000.7 1061.0
0.0
400
500
600
700
1216.0
1095.4
1303.91426.2
1004.2
800
1618.6
1287.7
934.6975.9
869.4
1.0e4
900
1089.9
1000
1131.9
1100
m/z, Da
1470.2 1488.2
1624.0
1701.2
1733.4
1762.5
1309.0
1200
1300
1400
1500
1600
1700
※分析装置の設置環境により効果は異なります。
1800
効果② イオン強度の上昇
Base Peak Chrom. of +EMS: Exp 1, from Sample 1 (E.coli_T3_MSMS_08) of E.coli_MSMS.wiff mass range 400.00 - 1800.00 Da (Nanospray)
Max. 1.1e7 cps.
1.9e7
Reference
1.8e7
1.7e7
1.6e7
BPT: 1.1e7
1.5e7
1.4e7
In te n s ity , c p s
1.3e7
1.2e7
1.1e7
64.92
55.69
1.0e7
59.54
9.0e6
8.0e6
67.58
52.72
1.8倍
7.0e6
25.08
6.0e6
17.93
5.0e6
14.95
38.09
30.91
43.65
25.79
71.37
45.78 50.11
4.0e6
3.0e6
15.55
1.66
20.71
76.62
10.58
85.57
2.0e6
95.54
112.59113.64
106.36
1.0e6
0.0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
70
75
80
Time, min
Base Peak Chrom. of +EMS: Exp 1, from Sample 1 (E.coli_DS_MSMS_05) of E.coli_MSMS.wiff mass range 400.00 - 1800.00 Da (Nanospray)
85
90
95
100
105
110
115
Max. 2.0e7 cps.
64.56
2.0e7
1.9e7
Dream Spray
23.70
1.8e7
14.62
1.7e7
20.59
1.6e7
37.11
1.5e7
1.4e7
55.49
1.3e7
In te n s ity , c p s
BPT: 2.0e7
91.37
67.47
25.62
18.03
96.72
31.66
1.2e7
59.35
52.21
28.50
1.1e7
Dream Sprayがスプレーの拡散を防ぎ
イオンの取り込み量が増えるので
イオン強度の上昇が見込めます。
13.47
1.0e7
38.74
9.0e6
32.45
47.67
8.0e6
71.27
39.39
99.36
12.84
7.0e6
104.35
83.41
80.27
6.0e6
112.92
5.0e6
75.58
85.55
4.0e6
3.0e6
105.63
※分析装置の設置環境により効果は異なります。
2.0e6
1.0e6
0.0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
Time, min
65
70
75
80
85
90
95
100
105
110
115
効果③ 同定数の増加
Software; MASCOT 2.4.1 (Matrix Science)
Search engine; Mascot, Scaffold
Database; SwissProt_201408.fasta
Taxonomy; E. coli
Modification; Fix – Carbamidomethyl (Cys) , Variable – Oxidation (Met)
Filter; Peptide mass tolerance = ±2 Da, Fragment mass tolerance = ±1.5 Da
Protein Groups
Peptides
PSMs
Reference
126
211
218
Dream Spray
160
444
463
*Protein Groups; 同定タンパク質グループ数、Peptides; 同定ペプチド数、PSMs; 同定に使用したスペクトル数
エーエムアール株式会社
〒152-0031 東京都目黒区中根2-13-18
TEL：03-5731-2281 FAX:03-5731-2283

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