タンパク質／酵素フナコシニュース 2014 年 7 月 1 日号（No.568） funakoshi news NEW タンパク質／酵素定量 NEW Kindle Biosciences, LLC メーカー名： Kindle Biosciences 社は米国に本拠を置き，Liquid Phase Immunosandwich Assay という，タンパク質測定アッセイ系を構築するキットを開発しているメーカーです。 3. 反応溶液 5 ∼ 8 μl を，KwikQuant カセットのストリップ末端にアプライし，Cell wash buffer 50 μl を卵型のウェルにアプライする。 15 分間静置し，溶液を反対側の末端まで拡散させる。 4. ストリップの検出ゾーンを溶液が通過すると，ゾーンに固定されたストレプトアビジンに，ビオチンを介して先の複合体が結合する。 5. UV トランスイルミネーターまたは DNA ゲルイメージャーで，免疫反応複合体の蛍光を測定し，Image J などの画像解析ソフトで解析する。蛍光強度は，測定因子の濃度に相関する。 URL：http://kindlebio.com/ KwikQuant アッセイとウェスタンブロット・ELISA の比較迅速（15 ∼ 45 分）にタンパク質を測定するキット KwikQuant Assay Kit ［製品ページ番号：8684］ NEW 18 新しいタンパク質測定アッセイ系 Liquid Phase Immunosandwich Assay により，迅速（15 ∼ 45 分）・簡便（3 ステップ操作）・正確に，目的タンパク質を検出するキットです。2 種類の抗体で目的因子をサンドイッチし， KwikQuant カセットにて目的因子を蛍光検出します。測定される蛍光強度は，試料中の目的タンパク質濃度と相関します。特長 KwikQuant アッセイウェスタンブロット ELISA アッセイ時間 15 ∼ 45 分 4 ∼ 8 時間 3 ∼ 5 時間操作ステップ 3 回，簡便複数回，煩雑複数回，煩雑測定機器 DNA ゲルイメージャーフィルムスキャナープレートリーダー感度 1 ∼ 100 pg/ml 1,000 ∼ 100,000 pg/ml 1 ∼ 100 pg/ml 試料容量 1 ∼ 3 μl 5 ∼ 20 μl 50 ∼ 200 μl KwikQuant の使用例 assay # 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 assay # 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 KwikQuant Assay により，hCG 量を定量した。上図：hCG を PBS with 5％ bovine serum に段階希釈した結果下図：hCG を neat bovine serum に段階希釈した結果 Lane1, 2：0 pg/ml Lane11, 12：222 pg/ml Lane3, 4：3 pg/ml Lane13, 14：667 pg/ml Lane5, 6：8 pg/ml Lane15, 16：2,000 pg/ml Lane7, 8：25 pg/ml Lane17, 18：6,000 pg/ml Lane9, 10：74 pg/ml 本紙に掲載されている製品はすべて研究用ですお問い合わせ先試薬 - ６８４１ - ６２０ - ６８４１ - ７７５ＴＥＬ０３５ＦＡＸ０３５：品名特長 ● ビオチン標識抗体とユウロピウム標識抗体のペアを用いて，迅速かつ正確に，タンパク質を検出するシステムです。 ● アッセイ系の構築は，ELISA などのほかのアッセイ系の構築に比べ，非常に簡便です。 ● 市販の ELISA 構築抗体セットを，KwikQuant アッセイに応用することも可能です ● ＊1 。精製マウスモノクローナル抗体，マウス腹水，精製／未精製ポリクローナル抗体が使用できます。 ● 濃度既知のスタンダードを用いて検量線を作成することもできます。 ● 測定試料：血清，血漿，組織抽出物，細胞抽出物，細胞培養上清＊ 2 ● 測定波長：615 nm ※測定感度は，検出に用いる抗体の性能に依存します。＊ 1 R&D Systems 社の ELISA 構築用試薬セット DuoSet Kit（製品ページ番号：8389）に含まれる，目的因子に対する未標識抗体，ビオチン標識抗体，スタンダードも応用できます。＊ 2 0.5％以上の SDS，Triton X-100，Tween 20 などの界面活性剤を含む試料は使用できません。メーカー商品コード包装 / 価格（￥） KwikQuant Assay Cassette Kit NEW KIB K1 1 kit / 17,000 ■ 抗体標識キットお手持ちの抗体ペアに，ビオチンおよびユウロピウムをそれぞれ標識するキットです。約 200 回分の検出に必要な抗体を標識することができます。品名メーカー商品コード包装 / 価格（￥） KwikQuant Antibody Labeling Kit NEW KIB K2 B 1 kit / Check it out ！ 21,000 ［メーカー：KIB］ KwikQuant アッセイ解説動画［製品ページ番号：8684］ KwikQuant Assay Kit の概要や特長，方法をご紹介している動画です。ぜひご覧下さい。 Movie 測定原理 1. 測定因子をサンドイッチさせる抗体ペアを用意し，片方をビオチン標識，もう片方をユウロピウム標識する。 2. ビオチン標識抗体，ユウロピウム標識抗体，測定試料を混合し，5 ∼ 15 分間インキュベートして，測定因子と抗体の免疫反応複合体を形成する。 140701s_p18_k_i.indd 18 2014/06/17 16:31:19