不純物分析に便利な機能 ”Stepped Collision Energy”（pdf）

不純物分析に便利な機能
純物分析便な機能
“Stepped Collision Energy”
サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社
アプリケーション部
不純物分析では、さまざまな構造の化合物の混合物を測定します。
データディペンデントスキャンを用いると便利ですが、化合物によって
コリジョンエネルギーは異なります。このような場合、Stepped
リジンエネルギは異なりますこのような場合 St
dC
Collision
lli i E
Energyを
を
使うと、構造解析可能なMS/MSスペクトルが取得できます。
網羅的 MS2の取得方法
Data Dependent Scan
フルスキャンとデータディペンデントMS/MS
しきい値以上の強度を持つピクの
しきい値以上の強度を持つピークの
MS/MSを網羅的に取得する。
Threshold
RT
F:
T:
FTMS + p ESI d Full ms2 [email protected] [50.00-295.00]
FTMS + p ESI Full ms [150.00-1000.00]
Full MS
272.2010
100
80
80
70
70
60
60
Relative Abundance
Relative Abundance
MS/MS
90
90
50
40
30
272.2007
100
224.1858
50
40
30
215.1431
20
20
147.0804
391.2845
10
326.2538
10
436.3426
121.0648
536.1659
0
159.0804
198.1038
0
200
300
400
m/z
500
600
100
150
200
250
m/z
いろいろな化合物のMS2が自動でとれるコリジョンエネルギーは一定値で大丈夫？
いろいろな化合物のMS2が自動でとれる。コリジョンエネルギ
は定値で大丈夫？
2
定性分析に有効な機能 NCE*& Stepped Collision
3種のエネルギーのフラグメントイオン
を混合して検出。
Collision energy low
m/z
適正なコリジョンエネルギが不明な未知成分は、
適正なコリジョンエネルギーが不明な未知成分は、
一定のコリジョンエネルギーでは対応が難しい。
Stepped collision を使えば、構造解析可能な
MS/MSスペクトルが取得可能。
Collision energy middle
m/z
HCD＆C-Trap
C
C ap
m/z
Collision energy High
m/z
3
*NCE: Normalized Collision Energy
設定方法:Stepped Collision Energy
Q Exactive
Q Exactive
or
Exactive plus
設定の目安は
Low >15-25
Middle >30-40
Hi h >45-60
High
>45 60
4
25,40,55
25
40
55
MS2スペクトル：Stepped Collision Energy 化合物：Propralol
260.1642
100
HCD 25%
80
NL: 5.19E7
test_mix_13#249 RT:
0.98 AV: 1 F: FTMS +
p ESI d Full ms2
[email protected]
[50.00-285.00]
test_mix_12 #259 RT: 0.98 AV: 1 NL: 6.41E6
T: FTMS + p ESI d Full ms2 [email protected] [50.00-285.00]
260.1641
100
Stepped Collision 40%±15
プリカーサーイオンを残しつつ、
プリカ
サイオンを残しつつ、
広範囲のフラグメントイオンを観測
95
90
60
85
40
80
20
116.1068
116.1069
HCD 40%
80
183.0802
98.0963
74.0599
60
40
260.1641
NL: 1.08E7
test_mix_14#252 RT:
0.98 AV: 1 F: FTMS +
p ESI d Full ms2
[email protected]
[50.00-285.00]
157.0646
20
218.1174
0
100
74.0599
HCD 55%
116.1068
80
155.0853
60
98.0963
183.0801
NL: 7.35E6
test_mix_15#251 RT:
0.98 AV: 1 F: FTMS +
p ESI d Full ms2
[email protected]
[50.00-285.00]
70
65
Relative Abund
dance
Relative Abundance
0
100
75
183.0803
72 0807
72.0807
60
116.1068
55
50
45
40
74 0599
74.0599
35
30
183.0802
98.0963
25
20
157 0645
157.0645
15
40
10
20
260.1642
0
218.1172
0
50
100
150
200
m/z
5
129.0696
5
250
50
100
150
200
m/z
250
MS2スペクトル：Stepped Collision Energy 化合物：Verapamil
455.2896
100
HCD 25%
80
NL: 2.17E7
test_mix_13#267 RT:
1.06 AV: 1 F: FTMS +
p ESI d Full ms2
[email protected]
[[50.00-485.00]]
test_mix_12 #284 RT: 1.06 AV: 1 NL: 1.47E7
T: FTMS + p ESI d Full ms2 [email protected] [50.00-485.00]
165.0908
100
95
90
60
Stepped
St
dC
Collision
lli i
40%±15
プリカーサーイオンを残しつつ、
広範囲のフラグメントイオンを観測
85
165.0908
40
80
20
303.2063
165.0908
HCD 40%
80
NL: 2.56E7
test_mix_14#271 RT:
1.06 AV: 1 F: FTMS +
p ESI d Full ms2
[email protected]
[50.00-485.00]
60
40
20
303.2059
150.0674
70
65
Relative Abundance
Relative Abun
ndance
0
100
75
60
55
455.2896
50
45
40
260.1641
0
100
80
165.0909
HCD 55%
150.0674
60
NL: 1.23E7
test_mix_15#271 RT:
1.05 AV: 1 F: FTMS +
p ESI d Full ms2
[email protected]
[50.00-485.00]
35
30
150.0674
25
20
303 2058
303.2058
15
40
10
105.0698
20
5
260.1641
260.1637
177.0910
0
0
100
200
300
m/z
6
105.0697
58.0652
400
50
100
150
200
250
m/z
300
350
400
450