表 5.臨床材料の分離培養法(検体の前処理法は表 3 参照) 培養期間注 2) 検査材料 培地の形状 接 種 培養温度注 1) 法 (~最長) 1.表皮, 斜面培地または 鱗屑や細切した材料の数片を,斜面培 25℃〜30℃また 3〜4 週間, 爪,毛髪 平板培地 地の 3-4 カ所に,材料の一部を培地に は室温培養, Malassezia spp. (Malassezia spp. 埋め込むように点状に接種する. Malassezia spp.が が対象の場合 を検査対象とす 培地は 2-3 本使用する. 対象の場合は, は,2〜3 週間 る場合は Malassezia spp.を検査対象とする場合 32℃ が 望 ま し Malassezia 用鑑 は,鱗屑の一部を培地に埋め込むよう い. 別平板培地や に点状に接種する.鱗屑を採取したテ Dixon 平板培地 ープが試料の場合は,テープの粘着面 を使用) を培地に接触させ,貼りつけたまま培 養する. 2. 組織 斜面培地(皮膚 細切した皮膚組織は,斜面培地の 3-4 Candida spp., 皮膚糸状菌, (生検,剖 組織)または平 カ所に材料の一部を埋め込むように Aspergillus spp., Sporothorix 検) 板培地(他の組 点状に接種する.培地は 2-3 本使用す および接合菌注 schenckii お よ 織) る. 1) び黒色菌:3〜 他の組織は,細切した数片を同様に培 他の真菌:25℃ 4 週間 地に埋め込む接種と、平板培地上に強 〜30℃または室 Histoplasma くスタンプし、白金耳で画線分離す 温培養 spp.:4~6 週間 3.血液 血液培養ボトル , る.綿棒で採取された材料は綿棒を培 注 2) 地の一部に塗り付けた後,白金耳で画 他の真菌:1〜 線分離する. 2 週間 1 症例あたり 2 セット使用する. 35℃ 1 週間, Histoplasma Malassezia spp.は専用の培地を用いる. 糸状菌(Fusalium spp., Histoplasma spp. spp.:4~6 週 など)は真菌専用のボトル(MYCO/F, 間注 2) BacT/ALERT MB ボトル)を用いる. 4. 骨髄 平板培地 平板培地に画線分離する. 25℃〜30℃ 1〜2 週間, Histoplasma spp.:4~6 週間 注 2) 5. 髄液, 液体培地および 液体培地に液性材料の各遠心沈渣を Candida spp., その他の 平板培地 接種し増菌培養する. Aspergillus spp., 穿刺液 平板培地には各沈渣を接種し画線分 および接合菌注 (胸水,腹 離する. 1) 1〜2 週間 , 他の真菌:25℃ 水など) 〜30℃または室 温培養 6.留置カ 液体培地および 液体培地にカテーテル洗浄液の沈渣 Candida spp.およ 1〜2 週間, テーテル 平板培地 を接種し増菌培養する. び Aspergillus Malassezia 平板培地にはカテーテル洗浄液の沈 spp.注 1), spp.:2〜3 週間 渣を接種し画線分離する. Malassezia spp.が 定量培養は,洗浄液をそのまま 0.1ml 対象の場合は 平板培地に接種し塗り広げる.Maki 32℃が望まし らの方法文 1)(半定量培養)は平板培地 い. 上でカテーテルを 5 回転がし,画線分 他の真菌:25℃ 離する. 〜30℃または室 Malassezia spp.を疑う材料は,専用平板 温培養 培地上でカテーテルを転がす,または 洗浄液の遠心沈渣を接種して,いずれ も画線分離する. 7. 喀 痰 , いずれも遠心した沈渣を 1 滴(30μl 程 Candida spp., 気管支肺 度),平板培地に接種し,画線分離す Aspergillus spp., 胞洗浄液 る. 接合菌注 1), 平板培地 1〜2 週間 他の真菌:25℃ 〜30℃または室 温培養 8. 舌 お よ 綿棒で採取された材料は,綿棒を培地 Candida spp.,接 び口腔, の一部に塗り付けた後,いずれも画線 合菌注 1), 鼻腔,膣 分離する. 他の真菌:25℃ 平板培地 1〜2 週間 〜30℃または室 分泌物 温培養 9. 膿 汁 , 平板培地 液性材料はそのまま,綿棒で採取され Candida spp., 1〜2 週間 膿腫 た材料は,綿棒を培地の一部に塗り付 Aspergillus spp., けた後,いずれも画線分離する. および接合菌注 1) , 他の真菌:25℃ 〜30℃または室 温培養 10.角膜, 平板培地 硝子体 可能であれば,ベッドサイドで平板培 Candida spp., 地に接種する. Aspergillus spp., 検査室で接種する場合は,可及的速や 接合菌注 1)., かに平板培地に接種し,画線分離す 他の真菌:25℃ る. 〜30℃または室 1〜2 週間 温培養 11.耳垢 平板培地 細切した耳垢を,平板培地の 3-4 カ所 Candida spp., に,材料の一部を培地に埋め込むよう Aspergillus spp.注 に点状接種,あるいは画線分離する. 1) 大量の Aspergillus spp.が存在する材料 spp.が対象の場 は,点状接種の方が良い場合がある. 合は 32℃が望ま 綿棒で採取された材料は,綿棒を培地 しい. の一部に塗り付けた後,画線分離す 他の真菌:25℃ る. 〜30℃または室 Malassezia spp.を疑う材料は,表皮に準 温培養 1〜2 週間 , Malassezia じて接種する. 12.尿 平板培地 採取された尿を遠心せずに定量培養 Candida 注 1), を行う.あわせて遠心した沈渣を一白 他の真菌:25℃ 金耳量,平板培地に接種し,画線分離 〜30℃または室 する. 温培養 1〜2 週間 注 1) Candida spp.,Aspergillus spp.および接合菌が検査対象の場合は,35℃で 1 日培養,その後 25℃〜30℃ま たは室温培養すると集落形成が早い. 注 2) いずれの材料でも Histoplasma spp.が疑われる場合は,4〜6 週間の培養が必要とされる.
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