特集学生の研究活動報告−国内学会大会・国際会議参加記 16 The 12th Pacific Polymer Conference に参加して山岸理沙 Risa YAMAGISHI 物質化学専攻修士課程 2011 年度修了スを加えて培養時間を変化させ培養を行った．この 1．はじめに時ペンタン酸からグルコースに炭素源を変える際に私は，2011 年 11 月 13 日から 17 日まで韓国の済ペンタン酸の基質が残らないように遠心分離を行い州島，Shilla Hotel 開催された The 12th Pacific Poly- 完全ペンタン酸の基質を取り除いた．収率は乾燥菌 mer Conference に参加し，「Biosynthesis and Physical 体中に含まれている PHA の重量分率とした．GPC Properties of P（3HBV-b-3HB）Block Copolymer by 測定は東ソー株式会社の HLC-8020 を用いて測定し W. eutropha. 」という題目でポスター発表を行いまた．基準物質としてポリスチレンを使用した．13C した． NMR 測定は Bruker DPX 400 を用いて測定を行い積算回数は 15000 で行った． 2．研究概要 2. 1．緒言 2. 3．結果微生物 Watersia eutropha （W. eutropha ）による Fig. 1 にはペンタン酸で 72 h 培養した後，グルコ poly（3-hydroxyalkanoate）（PHA）の生合成では様々ースで培養を行い得られたポリマー重量，乾燥菌体な炭素源を用いた研究が行われ，これまで Doi ら重量を示している．乾燥菌体重量，ポリマー重量とは脂肪酸を炭素源としたとき偶数炭素脂肪酸ではもにグルコースの培養時間が長くなるにしたがって poly（3-hydroxybutyrate）（P3HB）が，奇数炭素脂増加していくことが分かった．また，培養時間が 96 肪酸ではバリレートとの共重合体 poly （ 3- h がともに高い値をとることが分かった． hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate ）（ P3HBV ）が次に，Fig. 2 は C＝O 基の13C NMR スペクトルを菌体内で蓄積されることを報告した．これまで我々示している．高磁場側から順に，PHB の B*B に由は炭素源としてグルコースで培養を行った後ペンタン酸を加えて生合成したブロック共重合体を報告した．本研究では HV 分率をあげるために炭素源としてペンタン酸を加えた後グルコースを用いて P （3HB-b-3HBV）ブロック共重合体の生合成を行なった． 2. 2．実験方法 W. eutropha （NCIMB 11599）を有機培地で 24 h 培養した後，窒素フリー状態の無機培地へ炭素源としてペンタン酸で 72 h 培養を行いその後グルコー Fig. 1 Weight of PHA biosynthesized from pentanoic acid and glucose. ― S-5 ― 次に，GPC の測定結果と13C NMR の測定結果から 3HB と 3HBV のブロックの割合について求めた．その結果，グルコースの培養時間が増加するにしたがって 3HB の割合が増加していくことが分かった．これは，グルコースから 3HB だけが生合成されるためである．3HBV はペンタン酸の培養時間が一定であるためほとんど変化はしなかった．しかし，グルコースの培養時間が 96 h のものに関しては他のものに比べると大きく 3HBV が減少していた．この原因として，先に蓄積された 3HBV はエネルギー消費として利用されたことが考えられる． Fig. 2 13C NMR spectra and D value of PHA biosyntheszed from pentanoic acid（72 h）and glucose. 2. 4．結論炭素源にペンタン酸とグルコースを用いて 3 来するピークが観測され，次に PHB と PHBV に由 HBV-b-3HB のブロック共重合体の生合成をおこな来する B*V のピークが，低磁場側には，PHBV にうことができた．また，培養時間を変化させること由来する V*V のピークが観測された．また，得らで，ブロック分率が制御できることが確認できた．れたポリマーがどれぐらいランダムであるかを（1）グルコースも培養時間が 96 h を超えると分子量も式から求めた．（1）式には，13 NMR から得られた減少することが確認でき，このことから得られたポピーク強度比を用いて計算を行った．その結果，グリマーの一部がエネルギー消費として利用されたこルコースの培養時間が長くなるにしたがって D 値とが考えられる．は増加していくことが分かった．ペンタン酸の培養時間が 72 h，グルコースの培養時間が 24 h の時 D 3．発表について値は 3.7 であったが，グルコースの培養時間が 96 h 今回の学会は，国内の学会と異なり，国際学会での時 D 値は 6.4 にまで増加しブロックになったこあったためセッションはすべて英語だったこともあとがこの結果から確認できた．りとても緊張しました．国際学会は 2 回目でした次に，GPC の測定を行い得られたポリマーの数が，自分の伝えたいことが上手く伝えることができ平均分子量を求めた．その結果，グルコースの培養ませんでした．簡単な英単語も話しているとなかな時間が 24 h のものは数平均分子量は 56 万となり，か出てこず大変苦労しました．グルコースの培養時間が 72 h の時最大となり 63 万と高い値を示した． 4．まとめ国際学会なので英語でのセッションはとても大変でしたがとても充実したものとなりました．今回の Calculation of D value FBB FVV FBV FVB ┌ D＝1 random ┐ │ │ └ D＞1 block ┘ D＝（1）学会では多くのことを学ぶことができ参加して良かったと思います． ― S-6 ―