抗ウイルス活性を有する細菌を用いた魚類ウイルス病の制御に関する研究 COEセミナー平成 18 年 4 月 26 日北海道大学大学院水産科学院海洋生物防疫学研究室リサーチアシスタント清水智子 ◇ 魚類病原ウイルス（IHNV, IPNV, OMV ）の環境水中での生存性 ◇ 抗ウイルス活性を有する細菌の有効利用・サケマスの例、マツカワの例・ウイルス性表皮増生症（ヒラメ）・コイヘルペスウイルス病（コイ）ウイルス感染価 (Log. TCID50/mL) IHNV OMV 5.8 5.8 4.8 4.8 高圧滅菌 Killed bacteria 3.8 3.8 無処理 With bacteria 2.8 高圧滅菌 Killed bacteria 濾過除菌 Bacteria free 2.8 1.8 1.8 無処理 With bacteria 0.8 0.8 0 5 10 15 ウイルス添加後の日数（日） 0 5 濾過除菌 Bacteria free 10 15 ウイルス添加後の日数（日）魚類飼育水中における IHN ウイルスおよび OMV の生存性（15 ℃）．高圧滅菌ろ過除菌 (0.22μm) 無処理検出限界環境水中におけるウイルスの不活化には，抗ウイルス物質産生細菌が関与している. (Fish Pathol., 21: 222-231, J.Aquat.Animal Health, 1: 12-20) 魚類飼育環境からの抗ウイルス物質産生細菌の分離サンプル供試菌数 90% プラーク減少率森水底泥 170 156 1 (0.6 %) 28 (17.9%) 七飯水底泥 194 190 8 (4.1 %) 7 (3.7%) 茂辺地水底泥 199 177 46 (23.1 %) 13 (7.3%) 七重浜水底泥 176 196 18 (10.2 %) 5 (2.6%) 1458 126 (8.6 %) 場所合計（吉水･絵面，1999）実験室規模でのさけ・ます類の場合ウイルスの感染により，細胞死が観察される抗ウイルス物質によりウイルスが不活化され，感染を防いでいる．餌に混ぜて食べさせることにより，病気の防除が可能になるのでは？抗ウイルス活性を有する細菌を用いた魚類ウイルス病制御の試み（マツカワ）消毒したアルテミア卵通常飼育受精卵孵化直後消毒したアルテミア卵：抗ノダウイルス活性を有する抗ウイルス活性を有する細菌優勢 Vibrio sp. 9715株アルテミア腸管内容物・飼育水に抗ウイルス活性あり (吉水・絵面、1999）抗ウイルス活性を有する細菌を用いた魚類ウイルス病制御の試み（ヒラメ）消毒ワムシ卵通常飼育受精卵孵化直後消毒ワムシ卵：抗ウイルス活性を有する細菌腸管内容物・飼育水に抗ウイルス活性あり抗ウイルス活性を有する細菌を添加したワムシワムシ複相単性生殖卵の消毒（渡辺ら、2005）抗ウイルス活性を有する腸内細菌添加によるワムシ細菌叢の制御ワムシ卵孵化消毒グルタールアルデヒド（1250 mg/L で 30 分間） V. splendidus V-15 株（ショ糖非分解菌）添加無処理区消毒区菌添加区ヒラメ腸内細菌叢の制御ワムシ未処理区ワムシ消毒区ワムシ菌添加区給餌給餌 14 日後のヒラメ腸内細菌叢（Vibrio 属細菌の内訳） 62 % 106 cfu/g (SA 培地) 106 cfu/g (V-1 培地) 58 % 104 cfu/g (SA 培地) 103 cfu/g (V-1 培地) 100 % 106 cfu/g (SA 培地) 106 cfu/g (V-1 培地) : V. splendidus V-15 株 ⇒ ショ糖非分解菌ショ糖非分解 Vibrio spp. ショ糖分解 Vibrio spp. 抗ウイルス活性 (2005 年 V. alginolyticus V-5 株, V-23 株投与試験) 抗ウイルス活性 (AU) ヒラメ検出限界 800 飼育水 8 600 6 400 4 200 2 10 日目 20 日目 30 日目 ND 103～104 20 日目 30 日目ワムシ給餌後の日数ワムシ給餌後の日数生菌数 (cfu/g) 10 日目 103～105 V. alginolyticus V-5 株添加区 V. alginolyticus V-23 株添加区 102～103 102～103 102 Vibrio sp. V-13 株添加区（対照区） ND: Not determined