Genie II Starter Control マニュアル（第1版）20111219 - ニッポンジーン

Genie® II Starter Control
Code No. 318-07491 （2 回用）
マニュアル（第 1 版）20111219
④ 使用するブロックを選択して反応を開始します。Genie® II では各ウェ
製品説明
®
Genie
®
II Starter Control は、等温増幅蛍光測定装置 Genie
II
ルの蛍光強度の変化を経時的にモニタリングできます。
（OptiGene 社）の動作確認ができる LAMP 法の機器コントロール用試薬
です。
（蛍光強度のプロット例:
Well 1
Well 2）
本品には、LAMP 法による増幅で実績のある鋳型 DNA とプライマーが等
温遺伝子増幅用試薬 Isothermal Master Mix と混合された状態であらかじ
め Tube Strip（Genie® II 専用 8 連チューブ）に分注されています。そのた
め、Genie® II にそのままセットして反応を開始することができ、30 分間で
すべての反応と検出が完了します。
等温増幅反応は、Genie® II のスクリーン上でリアルタイムに蛍光強度の
変化としてモニタリングできます。
製品内容
□ Tube Strip × 2 本（－80℃遮光保存）
下記の試薬が分注された状態で、Tube Strip（8 連チューブ）が 2 本、アル
⑤ 反応終了後、測定結果を表示します。Well 1 、Well 2 における
ミ袋の中に入っています。
「Isothermal Ratio のピーク時間」と「会合曲線解析のピーク温度」が次の
Well 1：低濃度鋳型 DNA+ Isothermal Master Mix＊１）+Primers
ような結果になることを確認します。
Well 2：高濃度鋳型 DNA+ Isothermal Master Mix +Primers
＊1） Isothermal Master Mix は、耐熱性鎖置換型 DNA ポリメラーゼ、基質、蛍
（測定結果）
光色素、バッファーなどが含まれている等温遺伝子増幅用のマスターミックス試
・「Isothermal Ratio のピーク時間」： Well 1 ＞ Well 2
薬です。
・「会合曲線解析のピーク温度」： 87℃±1℃
使用方法
① Genie® II Starter Control をアルミパックから 1 本取り出し、室温で完
注）本品は相対定量のためのキャリブレーターとしては利用できません。
全に融解します。Tube Strip の周囲に水滴が付着している場合はペーパ
ータオルなどで除去します。内部の試薬が飛散している場合は、Tube
備考
Strip を立てた状態で持ち、まっすぐ下に振り下ろしてチューブの底に落とし
・本品には、LAMP 法を利用してカンキツグリーニング病の病原細菌様
てください。
微生物 Candidatus Liberibacter asiaticus を検出するためのプライマーセ
ット 1 および鋳型 DNA が含まれています。
② キャップがしっかりと閉じていることを確認し＊２）、Genie® II にセット＊３）
1
します。
ツグリーニング病原細菌検出の反応条件と非磨砕 DNA 抽出法の検討植物病
＊2）キャップに歪みが生じていた場合、そのまま反応すると内部の試薬の蒸
発、漏出を引き起こすおそれがありますのでご確認ください。
＊3） Tube Strip には Genie® II ヒートブロック上の固定用ピンに対応する穴が
開いています。セットする際には方向に注意してください。
奥田充、河野伸二、村山裕子、岩波徹 (2008) LAMP 法を用いたカンキ
理学会報 74, 316
・ LAMP 法は栄研化学株式会社が特許を保有しています。株式会社ニッ
ポンジーンは、等温遺伝子増幅検出システムのデモおよび動作確認用試
薬の開発、製造および販売を許諾されています。
③ カバーを閉じた後、温度と時間を設定します。増幅の温度は 65℃で反
応時間は 30 分間、会合曲線解析は、0.05˚C／秒の条件にて、98˚C から
80˚C までに設定してください。
（設定例）
☑Amplification：65℃ for 30:00 mm:ss
☑Anneal：98℃ to 80℃ at 0.05℃/s
株式会社ニッポンジーン〒930-0834 富山市問屋町 1-8-7 TEL 076-451-6548 FAX 076-451-6547
E-mail [email protected] URL http://www.nippongene.com/
Genie® II Starter Control
Code No. 318-07491 （For 2 reactions）
Manual (Fist edition) 20111219
Product Description
(4) Start the reaction after selecting the block to be used.
Genie® II Starter Control is a reagent for used for an operation test of
change of the intensity of fluorescence for each well can be monitored
the Genie® II fluorometer.
over time in the Genie® II.
The
In this product, a template DNA and primers are dispensed in a Tube
Strip (8-connected tubes for Genie® II) in a premixed state with the
Isothermal Master Mix.
(Example of fluorescence plot:
Well 1
Well 2)
This allows the reaction to be started by
setting to Genie® II as-is, and all reaction and detection are completed
in 30 min.
The isothermal amplification reaction can be monitored as the change
in fluorescent intensity in real time on the touchscreen of Genie® II.
Product Content
-
Tube Strip
x 2 (Shade light and store at -80ºC)
The following reagents are dispensed in 2 Tube Strips (8-connected
tubes) and put in an aluminum pouch.
Well 1: Low-conc. template DNA + Isothermal Master Mix*1) + Primers
Well 2: High -conc. template DNA + Isothermal Master Mix +Primers
*1) Isothermal Master Mix is a master mix reagent for isothermal gene
(5) Display the measurement results and confirm that the peak time of
amplification containing a thermostable strand displacing DNA polymerase,
Isothermal Ratio and the peak temperature of the annealing curve
a substrate, a fluorescent dye (intercalator) and reaction buffer.
analysis in each well are in the range of the below.
Method of Use
(Results)
(1) Take out one Genie® II Starter Control from the aluminum pouch,
- The peak time of Isothermal Ratio: Well 1 > Well 2
and thaw completely at room temperature.
- The peak temperature of the annealing curve analysis: 87ºC ± 1ºC
If water droplets are
present around the Tube Strip, remove with paper towel or the like. If
the reagent inside is scattered, hold the Tube Strip in an upright
Note:
position and swing it straight down to drop the reagent to the bottom of
quantitation.
This product cannot be used as a calibrator for relative
the tube.
(2) Confirm that the cap is tightly closed*2), and set to Genie® II*3).
Remarks
*2) Note that if the cap is deformed, and the reaction is performed as-is,
- This product includes the primer sets1 and template DNA for
evaporation and leakage of the reagent inside may occur.
detecting Candidatus Liberibacter asiaticus using the LAMP method.
*3) The Tube Strip has a hole that should be aligned with the fixing pin on
®
1
Okuda, M., Kawano, S., Murayama, Y. and Iwanami, T. (2008). Conditions
the heat block of Genie II. When setting, make sure that the direction is
for loop-mediated isothermal amplification (LAMP) and a nonmacerating
correct.
DNA extraction method to assay for huanglongbing (citrus greening)
(3) After closing a cover, set the reaction condition. The amplification
disease. Jpn. J. Phytopathol. 74: 316
temperature is around 65ºC, the reaction time is 30 min, and for the
- Genie® II Starter Control is licensed from Eiken Chemical Co., Ltd..
annealing curve analysis, the condition is 0.05ºC /sec from 98ºC to
Nippon Gene Co., Ltd. has been granted the license to develop,
80ºC.
manufacture and sell the reagent for Genie® II operation test.
(Example of setting)
Amplification：65 ºC for 30:00 mm:ss
Anneal：98ºC to 80ºC at 0.05ºC/s
NIPPON GENE CO., LTD.
1-8-7, Toiya-machi, Toyama 930-0834 Japan TEL +81-76-451-6548
E-mail [email protected] URL http://www.nippongene.com/
FAX +81-76-451-6547

Download Report