細胞イメージ解析システム CELAVIEW 蛍光強度解析 アポトーシス 切断型サイトケラチン18の検出 002 RS100 Fluorescence Imaging アポトーシスの誘導は、カスパーゼ活性に伴ういくつかの異なる細胞表面レセプターの刺激を介して行われ ます。サイトケラチンNo.18は、カスパーゼ3(または7)により切断され、アポトーシスのもっとも初期 のイベントにおいて影響をうけるといわれています。 下記は、HeLa 細胞における TNF-α とアクチノマイシンDの同時刺激によるアポトーシス誘導について解析したものです。 apoptotic cells (%) apoptoic cell population(%) 20 15 10 5 0 0 12.5 25 50 TNF-α (ng/ml) 100 200 刺激後、細胞を固定し、M30 CytoDEATH 抗体(ロシュのサイトケラチン No.18 内のホルマリン抵抗性カスパーゼ切断部位を認識) および Alexa488 標識二次抗体、核を DAPI で染色しました。 グラフはアクチノマイシンD(5μg/ml)と TNF-α(0-200ng/ml)を培地に添加してから 4 時間後の細胞を CELAVIEW で解析し、ア ポトーシスを起こしている細胞(%)を示したものです。エラーバーは各濃度ごと(3 ウエル)の SD 値を示しています。 核(青色、DAPI) 切断サイトケラチン No.18 は細胞質に存在(緑色、二次抗体 Alexa488) 黄色矢印はアポトーシスを起こしている細胞 開発 ・ 製造元/オリンパス株式会社 お問い合わせ先/オリンパス株式会社 MIS 営業 1 部 バイオ国内営業グループ 〒163-0914 東京都新宿区西新宿 2-3-1 新宿モノリス TEL: 03-6901-9521 FAX: 03-6901-4914 E-mail: [email protected] http://www.olympus.co.jp/jp/lisg/genome/
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