WILSON’S DISEASE STAIN metodo per il rame 04 – 182807 IVD Dispositivo medico-diagnostico in vitro | Codice CND: W01030799 numero di test eseguibili ............. 50 allestimenti da 40 ml per un massimo di 100 test tempo di realizzazione ................ 3 ore 15 minuti o overnight secondo temperatura di incubazione validità del prodotto ..................... 1 anno temperatura di stoccaggio ........... 15-25°C attrezzatura complementare ....... cilindro graduato , bacchetta vetro, stufa, vaschetta Coplin da 50 ml Scopo previsto Preparato per allestimento di campioni cito-istologici da esaminarsi in microscopia ottica. Applicazione Metodo per la visualizzazione del rame su sezioni di tessuto epatico. Principio Gravi epatopatie sono associate ad un aumento del rame normalmente presente nel tessuto epatico. In particolare nel morbo di Wilson una diminuita escrezione biliare del rame produce un accumulo intracellulare del metallo. La DMAB-rodanina (5-p-dimetilbenzilidene-rodanina) si lega sia al rame libero che al rame associato alle proteine. Metodo 1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) Portare le sezioni all’acqua distillata. Allestimento soluzione Rodanina: nella vaschetta Coplin da 50 ml porre 40 ml di acqua distillata, aggiungervi 1 ml di reattivo A, 1 ml di reattivo B e 20 gocce di reattivo C. Agitare brevemente con una bacchetta di vetro. Porre il vetrino nella soluzione ottenuta ed incubare in stufa a 56°C per 3 ore o a 37°C overnight. Lavare il vetrino in 3 cambi di acqua distillata. Porre sulla sezione 10 gocce del reattivo D: lasciare agire 3 minuti. Far virare per 2 minuti in acqua di fonte. Disidratare attraverso la serie ascendente degli alcoli, xilene e balsamo Risultati Rame ........................................................................................................................ Rosso rosso-arancio Nuclei .................................................................................................................................................... Blu Reattivi A) B) C) D) Avvertenze e precauzioni Il prodotto è destinato all’utilizzo di personale tecnico specializzato. Il prodotto è classificato come pericoloso. Leggere attentamente le informazioni riportate in etichetta (simboli di pericolo, frasi di rischio e di sicurezza) e consultare sempre la scheda di sicurezza dove sono reperibili le informazioni relative ai rischi presentati dal preparato, misure precauzionali da adottare durante l’uso e misure di primo soccorso e in caso di rilascio accidentale. Non utilizzare in caso di contenitore primario danneggiato. Conservazione Conservare il preparato a temperatura ambiente. Mantenere i contenitori ben chiusi e al buio. Stabilità Dopo la prima apertura, il reattivo deve ritenersi valido fino alla data di scadenza indicata purchè correttamente conservato. Smaltimento Rifiuto pericoloso; conferire ad aziende specializzate ed autorizzate, secondo legislazione vigente. Sodio acetato soluzione ............................................................................................................. 50 ml Tampone alcalino ....................................................................................................................... 50 ml DMAB-Rodanina soluzione alcolica concentrata........................................................................ 30 ml Emallume di Mayer soluzione..................................................................................................... 30 ml Società produttrice: Bio-Optica Milano s.p.a. Bio Optica Milano s.p.a. via San Faustino 58 • I - 20134 Milano tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000 www.bio-optica.it Pagina 1 di 2 Bibliografia • • • • • Faa G. Liver biopsy interpretation in Wilson’s disease. Pathologica, 88, 102-110,1996 Faa G, Liguori C, Columbano A, Diaz G. Uneven copper distribution in the human newborn liver. Hepatology 1987;7:838-843 Irons RD, Schenk EA, Lee JCK. Cytochemical methods for copper. Arch Pathol Lab Med 1977; 101:298-301. Lindquist RR. Studies on the pathogenesis of the hepatolenticular degeneration, II:cytochemical methods for the location of copper. Arch Pathol. 1969 ;87:370. A.F.I.P. Laboratory Methods in Histotechnology. Washington, D.C. 1994 Data di emissione: Marzo 2014 Società produttrice: Bio-Optica Milano s.p.a. Bio Optica Milano s.p.a. via San Faustino 58 • I - 20134 Milano tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000 www.bio-optica.it Pagina 2 di 2
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