翻訳 5’ → 3’ の方向リボソーム上で行われるリボソームは蛋白質とrRNAの複合体遺伝情報=アミノ酸配列塩基３つで１個のアミノ酸に対応している →コドン 43= 64 とおり→遺伝暗号表 5’-A-U-G-G-C-U-G-G-C-U-U-A-A-C-G-C-G-U- 3’mRNA Met Ala Gly Leu Thr Arg 50アミノ酸の蛋白質 →50×3=150塩基対のDNAにコードされている５版 p.516 ４版 p.521 遺伝コード表（Genetic Code） AUG（Met） →開始コドン翻訳開始の目印 UAA, UAG, UGA →終止コドン翻訳終了の目印 5’-A-U-G-G-C-U-G-G-C-U-U-A-A-C-G-U-A-A- 3’mRNA Met Ala Gly Leu Thr stop ５版 p.517 ４版 p.524 コドンとアンチコドン tRNAが，コドンと相補的な配列（アンチコドン）を介してコドンに結合し，コドンに対応したアミノ酸を結合する５版 p.518 ４版 p.525 タンパク質合成リボソーム R H2N C R H2N O mRNA コドン O R R R H H N CH CH 22N HN CH CH C CH O C C O O C O O O ５版 p.519 ４版 p.526 タンパク質合成 tRNAに結合したアミノ酸は、リボゾーム上で先に合成されたポリペプチド鎖のアミノ基と反応してペプチド結合を形成するこの反応は rRNAが触媒すると考えられている５版 p.519 ４版 p.526 問題16・15 ５版 p.519 ４版 p.525（問題16・16） 5’CUU-AUG-GCU-UGG-CCC-UAA 3’ Leu-Met-Ala-Trp-Pro-stop マクマリー p. 525 No.42 (H12) イ M F Q Y ------------------AUG UUU CAG UAC UCA ・・・ウ置換 GAA→UAA Glu stop 欠失 GUA A→UAA Val stop 4番目のUが欠失→フレームシフト M F S T 置換，欠失のどちらの場合 ------------------でも生じうる（挿入の場合も） AUG UUC AGU ACU CA ・・・正解は１番制限酵素制限酵素(restriction enzyme)は、 DNAの特定の塩基配列（4～8塩基対が多い）を認識して切断する酵素である。400種以上知られており、そのうち、約100種が市販されている。制限酵素は、ウイルスなどの外来遺伝子を切断して防御すると考えられている。自身のＤＮＡは、同じ配列を認識するメチル化酵素によりメチル化して切断されないようにしている（制限修飾系）。制限酵素の認識配列と切断箇所・６塩基認識・４塩基認識 EcoRI 5’G|AATT|C3’ 3’C|TTAA|G5’ PstI 5’C|TGCA|G3’ 3’G|ACGT|C5’ HaeIII 5’GG|CC3’ 3’CG|GG5’ AluI 5’AG|CT3’ 3’TC|GA5’ （平滑末端） BamHI 5’G|GATC|C3’ 3’C|CTAG|G5’ （粘着末端）５版 p.520 ４版 p.527 DNAの配列決定法配列を決定したいDNA 5′---------TTGAAGCAGC--3′---------AACTTCGTCG--プライマー 5′---------T DNAポリメラーゼ dATP,dGTP,dCTP,dTTP ddATP,ddGTP,ddCTP,ddTTP 3′---------AACTTCGTCG--伸長停止 5′---------TT←ddTTP G ddGTP 伸長停止 T← 5′---------T←dTTP 5′---------TTGA 5′---------TTGAA 5′---------TTGAAG 5′---------TTGAAGC 5′---------TTGAAGCA 5′---------TTGAAGCAG 5′---------TTGAAGCAGC TGAAG CA GC これらの断片をキャピラリーゲル電気泳動により分離し，レーザー光を照射して各断片の蛍光を検出することにより配列を知ることができる５版 p.520 ＤＮＡシーケンサー PCR (Polymerase Chain Reaction) 2nd cycle forward primer 5′ 3′ 3′ 5′ Q uic k Tim eý Ç² G IFêL í£ É v Éç ÉO ÉâÉÄ Ç ™ Ç ±Ç ÃÉs ÉN É`ÉÉÇ ¾ å© Ç ÈÇ … Ç Õ ïKóv Ç Ç • ÅB template dATP,dGTP,dCTP,dTTP reverse primer DNA polymerase 変性（95℃）二本鎖は解離して一本鎖となる 3rd cycle アニーリング（55℃） templateとprimerが二本鎖を形成伸長反応（72℃） primerから相補鎖を合成 20-30 cycles ５版 p.521 ４版 p.530 2n-n-1 nth cycle