Proteinsequenzierung durch Edman

Genosphere Biotechnologies
2 rue des Gravilliers
Protein Sequencing
F-75003 Paris ; France
Telefon : +33-142 71 70 21
Fax:
+33-142 71 70 23
E-mail : [email protected]
Internet : www.genosphere-biotech.com
www.biomodul.de
Proteinsequenzierung durch Edman-Abbau
Wir bevorzugen die Proben in folgender Form:


Ideal ist eine Proteinmenge von 50 – 100 pmol, die notwendige Mindestmenge ist
jedoch 20 pmol Protein. (z.B. 100 pmol eines 10 kDa Proteins entsprechen 1 µg)
Ideal sind Proteinproben, die auf eine PVDF Membran (elektro-)geblottet vorliegen
und die entsprechenden Banden bereits von Ihnen herausgeschnitten wurden. Geben
Sie die herausgeschnittenen Banden (einer Art / einer Probe) bitte in ein Mikrozentrifugenröhrchen (Tube).
Nylon-Membrane sind nicht geeignet !
Sollten Sie uns eine ganze PVDF-Membran (Blot) zusenden wollen, so müssen Sie die
interessierende(n) Bande(n) klar kennzeichnen.
Legen Sie ein Foto / Kopie der Membran bei.
Bitte schneiden Sie bei 2 D Gelen mehrere Spots ihrer Probe aus und senden Sie uns diese
gesammelt zu.
Als Lösungsmittel können Wasser, Acetonitril und Propanol dienen. Lösen Sie ihre Probe in
30 µl bis höchstens 150 µl Lösungsmittel.
Bitte denken Sie daran, dass alle LM mit Aminogruppen (auch Pufferlösungen mit Tris) den
Edman-Abbau stören. Ebenso stören alle „Fremdproteine“ und Substanzen, die die
Aminogruppe derivatisieren können. Benutzen Sie nur auspolymersierte Acrylamidgele.
Jede in Lösung vorliegende Probe, wird von uns, vor der Analyse, nocheinmal durch einen
weiteren Reinigungsschritt vorbereitet, dieser Reinigungsschritt wird extra berechnet.
Bitte legen Sie der Proteinprobe das ausgefüllte Formblatt und Ihren unterschriebenen
Kaufauftrag bei.
Bitte vergessen Sie nicht die Auftragsnummer und die Ust.-ID-Nr. ihres Institutes anzugeben.
Bitte benutzen Sie für jede Probe ein neues Formular. Senden Sie die Proben an die in der
Kopfzeile genannte Adresse.
Für Rückfragen stehen wir Ihnen gerne zur Verfügung: [email protected]
Sobald die Proben bei uns eingetroffen sind informieren wir Sie hierüber per E-Mail.
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Proteinsequenzierung durch Edman-Abbau
Auftraggeber:
Titel, Vor-, Nachname:
Auftragsnummer:
Angebotsnummer:
Ust.-ID-Nr.:
E-Mail:
Anzahl der Proben:
Lieferadresse:
Rechnungsadresse:
Telefon, Fax:
Firmen- / Institutsstempel
Telefon, Fax:
Ort, Datum, Unterschrift
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Angaben zur eingesandten Proteinprobe
Auftragsnummer:
Bezeichnung der Proteinprobe:
Proteinherkunft (Organismus):
Anzahl der gewünschten Sequenzierzyklen:
Auf alle Fälle wird ein Set-up mit maximal 5 AS
berechnet.
Bekannte Sequenz :
Angebotsnummer:
MW:
kDa:
Anmerkungen:
Foto der gefärbten Membran liegt bei ?
Der Kaufauftrag / die Probe liegt bei ?
Die Probe liegt vor :
gelöst
lyophilisiert
auf eine Membran
geblottet – die
entsprechende Bande
wurde markiert – ein
Foto liegt bei.
auf eine Membran
geblottet – die
entsprechende(n)
Band(en) wurde(n)
herausgeschnitten und
in ein Tube gegeben.
Lösungsmittelart,
Puffer, Salze
x
Volumen
(µl)
x
Konzentration
(µg/µl)
x
Gesamtmenge
(µg)
x
Im Lyophilisat
sind enthalten:
Puffer, Salze ?
x
Volumen
(µl)
Konzentration
(µg/µl)
Gesamtmenge
(µg)
x
x
x
Art der Membran
Marke
der
Membran
Proteinmenge
gesamt (µg)
die Membran
wurde gefärbt
mit:
x
x
x
x
Art der Membran
Marke
der
Membran
die Membran
wurde gefärbt
mit:
x
x
Proteinmenge
gesamt / Bande
(µg).
Anzahl der
ausgeschnittenen
Banden.
x
Firmen- / Institutsstempel
Ort, Datum, Unterschrift
3
x