ピッカジーン® 細胞溶解剤 ピッカジーン® ベクター 、ﾎﾀﾙﾙｼﾌｪﾗｰｾﾞ酵素ｾｯﾄ レポーターアッセイ用試薬 細胞溶解剤の概要） ピッカジーン® ピッカジーン® ピッカジーン® ピッカジーン® ピッカジーン® 本製品はベクターをトランスフェクションした培養細胞から、発現させたルシフェラーゼを抽出するための試薬です。抽出効率や発光反応への影響を考 慮した組成で構成されています。ピッカジーン®培養溶解剤 Ｌucはルシフェラーゼアッセイ用に最適化された専用試薬です、ピッカジーン培養細胞溶解剤 ＬCβは、ルシフェラーゼアッセイ、β-galactosidase, chloramphenicol acetyltransferase(CAT)アッセイ、たんぱく質定量（Ｂｒａｄｆｏｒｄ法、BCA法）に適します。 メーカーコード 300-04351 品名 ピッカジーン®培養細胞溶解剤 Luc PGC-50 307-04361 ピッカジーン®培養細胞溶解剤 LCβ PGC-51 保存 希望納入価格( 希望納入価格(円） ルシフェラ－ゼアッセイ専用 -20℃ 6,000 β-gal、CAT、ルシフェラーゼアッセイ用、 タンパク定量用 -20℃ 6,000 ベクターの概要) 特長 ピッカジーン® ベクター ルシフェラーゼ遺伝子（luc）を含む4種類（コントロール、エンハンサー、プロモーター、ベーシック）のベクターで構成され ており、用途に応じてご選択下さい。多種の生物由来の細胞に適します。 ピッカジーン® ベクター２ 新規ルシフェラーゼ遺伝子（luc＋）を採用し、最適な動物細胞用にコドンを改変した動物細胞専用ベクターです。ピッカ ジーン® ベクターの10～100倍の高発現タイプです。 コードNo. コードNo. メーカー コード 品名（仕様） 容量 保存 PGV-CS ピッカジーン®カセットベクター 11,000 302-02851 PGV-B ピッカジーン®ベーシックベクター 11,000 301-02821 PGV-C ピッカジーン®コントロールベクター 11,000 305-02841 PGV-P ピッカジーン®プロモーターベクター 11,000 308-02831 PGV-E ピッカジーン®エンハンサーベクター 11,000 302-04811 PGV-CS2 ピッカジーン®カセットベクター2 11,000 309-04821 PGV-C2 ピッカジーン®コントロールベクター2 306-04831 PGV-B2 ピッカジーン®ベーシックベクター2 303-04841 PGV-P2 ピッカジーン®プロモーターベクター2 11,000 300-04851 PGV-E2 ピッカジーン®エンハンサーベクター2 11,000 307-05601 pRL-SV40 シーパンジーSV40コントロールベクター 13,000 304-05611 pRL-CMV シーパンジーCMVコントロールベクター 13,000 301-05621 pRL-TK シーパンジーTKコントロールベクター 13,000 308-05631 pRL-null シーパンジーnullコントロールベクター 13,000 ﾎﾀﾙﾙｼﾌｪﾗｰｾﾞ酵素ｾｯﾄ） コードNo. コードNo. メーカーコード 303-16671 FL-50 ホタルルシフェラーゼ 酵素セット 50μl×1本 30ml×1本 発光半減期 操作性 特長 不快臭 ピッカジーン® BrillianStar-LT 30分 1ステップ （溶解・発光試薬1液タイプ） HTS対応 （高感度） 低減 ピッカジーン® MelioraStar-LT 90分 1ステップ （溶解・発光試薬1液タイプ） HTS対応 低減 2時間 1ステップ （溶解・発光試薬1液タイプ） Well plate 仕様 あり 4.5時間 1ステップ （溶解・発光試薬1液タイプ） Well plate 仕様 あり 7.5時間 1ステップ （溶解・発光試薬1液タイプ） Well plate 仕様 あり 2ステップ （溶解試薬/発光試薬） キュベット測定 超高感度 あり インターナルコント ロールを同封 あり LT 4.5 ピッカジーン® LT 7.5 ピッカジーン® 発光キット 希望納入価格( 希望納入価格(円） -80℃ ・価格はすべて税抜きです。掲載製品は研究用試薬です。研究用以外には使用しないでください。 ・研究用以外には使用しないでください。このパンフレットに記載の全てのベクターは、ご購入いただく際にライセンス契約は不要です。 販売元 和光純薬工業株式会社 大阪市中央区道修町三丁目1番2号 Tel ：06-6203-3741（代表） 東京都中央区日本橋本町二丁目4番1号 Tel ：03-3270-8571（代表） E-mail: [email protected] URL: http://www.wako-chem.co.jp 2 4 販売店 5分 10,000 ピッカジーンpa 北米産ホタル シーパンジー（レニイラ） ピッカジーン® デュアル Fig.1 最大発光量の比較 2ステップ （溶解試薬/発光試薬/消 光・発光試薬） 北米産ホタル （約15分） シーパンジー （約2分） Fig.2 BrillianStar-LTの384well plate使用による定量性 20000 Fig.3 15分経過後における発光の差 1.E+06 15000 10000 5000 培地のみ 1.00E-15 1.00E-14 1.00E-13 1.00E-12 1.00E-11 1.00E-10 1.00E-09 1.E+05 1.E+04 1.E+03 1.E+02 1.E+01 1.E+00 0 P社S製品 製造元 東洋ビーネット株式会社 バイオプロダクツ部 東京都中央区京橋二丁目2番1号 Tel ：03-3272-1954 E-mail: [email protected] URL: http://www.toyo-b-net.co.jp 北米産ホタル 11,000 保存 ルシフェラーゼ酵素（凍結品） 10μg/ml （1.64×1010mol/ml） 希釈液 （凍結品） ルシフェラーゼ ピッカジーン® LT 2.0 11,000 -20℃ 発光反応ﾓﾆﾀｰ・測定機器の検定用 品名 品名 希望納入価格( 希望納入価格(円） 309-02861 20μｇ /20μl ★レポーターアッセイ用 発光試薬 最 大 発 光 量 （ RLU) 品名 RLU/0.5sec. by TECAN コード No. 発光キット PA 発光キット LTシリーズ LTシリーズ デュアル ベクター 、ルシフェラーゼ酵素セット MelioraStar-LT 0 5 10 15 20 25 30 時間(min.) Fig.1 MelioraStar-LT（PG MLT)とP社S製品の 最大発光量の比較 発光が安定し測定可能となる試薬添加後5分 の発光量は弊社PG MLTが、P社S製品より約 2倍発光強度（感度）が高い事を示す。NIH3T3 のルシフェラーゼ恒常的発現細胞/DMEM （25,000cells/well)を一晩培養後、各well 100μｌに対してPG MLT100μlを添加後測定。 P社 S製品 Fig.2 BrillianStar-LT（PG BLT)の384well plate使用に よる定量性 ルシフェラーゼ濃度比と発光量が均一に相関が得られ ている事を示す。384well plateで、精製ホタル・ルシ フェラーゼの10倍希釈系列（1.64.E-9M～-15M/RPMI1640 with 1mg/ml BSA)を調製し、各well30μｌに対し て、PG BLT 30μlを添加後測定。 東洋ビーネット㈱ 1 MelioraStar-LT Fig.3 MelioraStar-LT（PG MLT)とP社S製品の 発光の比較 試薬添加15分経過後CCDカメラにてセル側面 から発光を観察。PGMLTは発光の強度が強い ことに加えて、攪拌しなくても溶存酸素の影響 を受けないため、発光が均一であることが観察 される。一方P社S製品は、既にセルの底面から 消光していることが確認できる。側面の発光は キュベットの映りこみである。 撮影：ベル トールド社 NightOWL981 NC100 ピッカジーン® LT／ LT／LTシリーズ LTシリーズ ピッカジーン® 発光キット キット ～ HTS対応 HTS対応 ～ ～超高感度～ 製品概要） 製品概要) シングル測定用のピッカジーン®発光キットをベースとし、 多検体測定用に発光半減期を伸長（Long-Term化）させたタイプです。PLTシリーズは3種 （PLT2.0 、LT4.5 、PLT7.5）あり、感度と測定検体数の最適バランスが選択できます。 Star-LTは、不快臭が低減された組成で発光強度や操作性をさらに高め ました。 ピッカジーン®は、ホタルルシフェラーゼ酵素の活性（発光）を超高感度、迅速、簡便に測定するシステムです。試薬組成を工夫することにより、発光の急 速な減衰をなくし、数分間にわたる安定した強い発光を実現しました。 ・高感度 : 高い発光強度 ・安定性 : 安定した発光Kinetics ・簡 便 : 細胞溶解剤入りの１液型です。操作が試薬添加の１ｽﾃｯﾌﾟのみ。（攪拌不要） ・迅 速 : 試薬添加後最短5分で測定開始。 ・広い適応性 : 血清、培地（RPMI1640、DMEM、MEMα、F12)、ﾌｪﾉｰﾙﾚｯﾄﾞ、有機溶媒、PBSなどによる半減期の影響は受けない。 ・操作性の向上 ： 従来の試薬に比べ低粘性、新規採用の消泡剤により実験上の起泡を低減。 ・実験環境の改善 ： 特有の硫黄臭を大幅に低減し快適性を向上。 301-15371 BLT10 307-15373 BLT100 305-15374 BLT1000 308-16001 304-16003 302-16004 品名 半減期 1000回用 発光試薬 MLT100 ピッカジーン® MelioraStar-LT 発光試薬 発光試薬 50ml×2本 100回用 発光試薬 10ml×1本 1000回用 発光試薬 50ml×2本 90分 ピッカジーン® LT2.0 発光試薬 500回用 -80℃ 遮光 発光試薬 50ml×1本 メーカー コード 302-04311 PGL100 309-04321 PGL1500 77,000 306-04331 587,500 303-04341 80,000 14,000 -80℃ 遮光 50,000 PLT25 300-16164 PLT210 1000回用 発光試薬 50ml×2本 80,000 303-35111 LT045 100回用 発光試薬 10ml×1本 14,000 309-35113 LT145 1000回用 発光試薬 50ml×2本 303-16171 PLT71 100回用 発光試薬 10ml×1本 500回用 発光試薬 50ml×1本 309-16173 307-16174 PLT75 4.5時間 ピッカジーン® LT7.5 発光試薬 1000回用 PLT710 ピッカジーン® PA 発光キット キット 7.5時間 容量 保存 100回用 ・発光基質（凍結乾燥品） 7mg×1本 ・緩衝液 10ml×1本 ・ﾙｼﾌｪﾗｰｾﾞｽﾀﾝﾀﾞｰﾄﾞ酵素 50μl×１本 -20℃ 遮光 10,000 100回用×5 ・発光基質（凍結乾燥品） 7mg×5本 ・緩衝液 10ml×5本 ・ﾙｼﾌｪﾗｰｾﾞｽﾀﾝﾀﾞｰﾄﾞ酵素 50μl×１本 -20℃ 遮光 45,000 PGL5500 500回用 ・調製済み発光基質 50ml×1本 ・ﾙｼﾌｪﾗｰｾﾞｽﾀﾝﾀﾞｰﾄﾞ酵素 50μl×１本 -80℃ 遮光 45,000 PGL2000 500回用×4 ・調製済み発光基質 50ml×4本 ・ﾙｼﾌｪﾗｰｾﾞｽﾀﾝﾀﾞｰﾄﾞ酵素 50μl×2本 -80℃ 遮光 165,000 ピッカジーン ® 発光キット ピッカジーン® デュアル シーパンジー発光キット キット シーパンジー -80℃ 遮光 照会 14,000 -80℃ 遮光 製品概要） ｼｰﾊﾟﾝｼﾞｰ発光試薬の添加前後でのﾙｼﾌｪﾗｰｾﾞ活性測定 ピッカジーンデュアル®は、インターナルコントロールの測定操作を簡便・迅速に行えるよう最適化され ています。インターナルコントロールにはシーパンジー（レニイラ）ルシフェラーゼを使用します。各発 光反応は1本のキュベットもしくは１well中で続けて測定できます。ホタルルシフェラーゼ・ベクターとシー パンジールシフェラーゼ・（インターナルコントロール）ベクターとをコトランスフェクションし、それぞれの発 光量を測定することから、ホタルルシフェラーゼによるシグナルは、シーパンジールシフェラーゼによるシ グナルで補正できます。 このシステムは、それぞれの発光試薬とシーパンジールシフェラーゼ遺伝子を 含みプロモーターの異なる４種類のベクターから構成されています。 80,000 ～ﾀﾝﾊﾟｸ質定量による標準化～ レポーターアッセイで使用される細胞溶解剤は、一般的に界面活性剤の濃度が高く、細胞ﾗｲｾｰﾄを希釈しない場合は、ﾀﾝﾊﾟｸ質定量には適しませんでし たが、ピッカジーン® PA発光キットは、代表的なﾀﾝﾊﾟｸ質定量方法であるＬowry法、BCA法、Bradford法において、細胞ﾗｲｾｰﾄを希釈することなくﾀﾝﾊﾟｸ質 定量を行うことができます。これにより、細胞数による測定値の変動を容易に抑えることができます。 コードNo. コードNo. 307-05581 メーカー コード 300-93481 PGL-PA1 ピッカジーン® PA発光キット 容量 100回用 2 ・発光基質（凍結乾燥品） 7mg×1本 ・緩衝液 10ml×1本 ・ﾙｼﾌｪﾗｰｾﾞｽﾀﾝﾀﾞｰﾄﾞ酵素 50μl×１本 ・PA専用細胞溶解剤 100ml×１本 保存 -20℃ 希望納入価格( 希望納入価格(円） 1,000 100 10 品名 301-05584 PD11 ピッカジーン® デュアルシーパンジー発光キット 303-05583 PD10 305-06001 PLD-30 消光後の発光量 ｼｰﾊﾟﾝｼﾞｰﾙｼﾌｪﾗｰｾﾞ Fig. CHO細胞にPGV-C2 , pRL-SV40をｺﾄﾗﾝｽﾌｪｸｼｮﾝ し、各発光試薬を添加し、発光量を測定した。 PGV-C2 : ピッカジーンコントロールベクター2 希望納 入価格 (円） 容量 保存 100回用 ・ﾋﾟｯｶｼﾞｰﾝ発光試薬Ⅱ緩衝液 10ml×1本 ・ﾋﾟｯｶｼﾞｰﾝ発光基質（凍結乾燥） 1本 ・ｼｰﾊﾟﾝｼﾞｰ発光試薬緩衝液 10ml×1本 ・ｼｰﾊﾟﾝｼﾞｰ発光基質溶液 200μl×1本 ・ｼｰﾊﾟﾝｼﾞｰ用細胞溶解剤 30ml×1本 ・ﾙｼﾌｪﾗｰｾﾞｽﾀﾝﾀﾞｰﾄﾞ酵素 50μl×１本 -20℃ 遮光 27,500 100回用×10 ・ﾋﾟｯｶｼﾞｰﾝ発光試薬Ⅱ緩衝液 10ml×10本 ・ﾋﾟｯｶｼﾞｰﾝ発光基質（凍結乾燥） 10本 ・ｼｰﾊﾟﾝｼﾞｰ発光試薬緩衝液 10ml×10本 ・ｼｰﾊﾟﾝｼﾞｰ発光基質溶液 200μl×10本 ・ｼｰﾊﾟﾝｼﾞｰ用細胞溶解剤 30ml×1本 ・ﾙｼﾌｪﾗｰｾﾞｽﾀﾝﾀﾞｰﾄﾞ酵素 50μl×2本 -20℃ 遮光 218,000 1000回用 ・ﾋﾟｯｶｼﾞｰﾝ発光試薬Ⅱ緩衝液 105ml×1本 ・ﾋﾟｯｶｼﾞｰﾝ発光基質（凍結乾燥） 1本 ・ｼｰﾊﾟﾝｼﾞｰ発光試薬緩衝液 105ml×1本 ・ｼｰﾊﾟﾝｼﾞｰ発光基質溶液 1.05ｍｌ×2本 ・ｼｰﾊﾟﾝｼﾞｰ用細胞溶解剤 30ml ×1本 ・ｼｰﾊﾟﾝｼﾞｰ発光試薬用空ボトル 1本 ・ﾙｼﾌｪﾗｰｾﾞｽﾀﾝﾀﾞｰﾄﾞ酵素 50μl ×2本 -20℃ 遮光 205,500 -20℃ 10,000 超高感度 ： 超高感度型の発光試薬を採用 正 確 ： 細胞ﾗｲｾｰﾄのﾀﾝﾊﾟｸ質定量により、細胞数による測定値の変動を抑制 簡 便 ： 細胞ﾗｲｾｰﾄを希釈せずに、ﾀﾝﾊﾟｸ質定量ができます。 品名 10,000 ﾎﾀﾙﾙｼﾌｪﾗｰｾﾞ活性 PGD-S 特長） メーカーコード 100,000 0 高感度： 従来のｲﾝﾀｰﾅﾙｺﾝﾄﾛｰﾙ（β-Gal , CAT）に比べて高感度。 迅 速 ： 2種類のアッセイ系を1回当たり約30秒で測定が可能です。 正 確 ： 7桁のレンジで直線性が得られます。 50,000 発光試薬 50ml×2本 1,000,000 1 特長） 製品概要) コードNo. コードNo. 希望納入価格( 希望納入価格(円) 587,500 302-16163 LT4.5 発光試薬 品名 14,000 -80℃ 遮光 発光試薬 10ml×1本 2.0時間 コードNo. コードNo. 13,000 発光試薬 50ml×20本 100回用 PLT21 ： 溶解した検体に発光試薬を加え、直ぐに測定できます。 希望納入価格( 希望納入価格(円） 発光試薬 50ml×20本 10000回用 MLT1000 306-16161 30分 10000回用 MLT10 保存 発光試薬 10ml×1本 100回用 ピッカジーン® BrillianStar-LT 容量 簡 便 RLU コードNo. コードNo. メーカー コード 特長） 超高感度 ： CATアッセイの１００倍以上、従来法の１０倍以上の発光強度。（10-20 molesの酵素量まで 測定できます。） 迅 速 ： 細胞溶解から測定までわずか10数分で終了。 Star-LTシリーズの特長） 10,000 5倍濃ｼｰﾊﾟﾝｼﾞｰ用 細胞溶解剤 - 3 30ml×1本
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