** 2012 年 4 月改訂（下線部原料の由来変更） * 2011 年 4 月改訂（製造販売元の社名変更）生体外用研究試薬 2010 年 4 月作成 4. エス・クロンSF-Bでよく増殖する細胞は、まき込み後、2～3日目でオーバーグロース（over growth）な状態となるので、その前に培地交換を行う。組織培養用無血清培地エス・クロン(S-Clone) SF-B 〔開発の経緯及び特徴〕〔使用上又は取扱い上の注意〕 1．基礎培地は、1ビンを一度に溶解する。粉末の分取による少量溶解は避ける。 2．基礎培地の溶解時に炭酸ガス（良質の炭酸ガス、ドライアイスが適当）を吹き込み、培地のpHを酸性にする。pHを酸性エス・クロン（S‐Clone）SF‐Bは、マウス×マウスハイブリドーマまたはにすると、培地の溶解性がよくなるとともに炭酸ガスインキュミエローマ細胞（P3/NS1/1-Ag4-1、P3X63Ag8U.1、P3X63-Ag8.653、ベーター内での培地の平衡化（pH7.2～7.4）が早まる。 Sp2/O-Ag14など）の培養のため開発された無血清培地である。 3．添加剤は、2-メルカプトエタノール0.0009％を含む毒物である。〔本質〕 1. 基礎培地わずかに改変したRPMI1640、ダルベッコMEM、ハムF-12の混合成分からなる粉末培地。 2. 炭酸水素ナトリウム毒添加剤 3. ○ ** ホルモン成長因子（大腸菌または酵母組換体インスリン、トラ 4．添加剤は、濃縮液のため冷蔵保存中に沈殿を生じることがあるので、よく攪拌して基礎培地に添加する。 5．添加剤を加えた後の培地の濾過は避ける。細胞の種類によっては増殖が低下する。 6．調製後の培地は、2～10℃保存で3 カ月の安定性を認めているが、できるだけ早く使用すること。 7．廃棄する場合には、許可を受けた専門の産業廃棄物処理業者に処理を委託すること。ンスフェリン、亜セレン酸ナトリウム、エタノールアミン、2‐メルカプトエタノール）を含むヘペス緩衝液。インスリン、トランスフェリン以外の蛋白成分は添加されていない。 4. ウシアルブミン10％溶液ウシ血清アルブミンを10％含む溶液。目的に応じて添加する。〔使用方法〕（注）ご使用に際しては、「エス・クロンSF‐B」の製品安全データシート（MSDS）もご参照ください。下記のホームページよりダウンロードできます。［URL：http://www.eidia.co.jp］〔貯法及び有効期間〕 ○ 培地の調製法・2～10℃保存、冷凍を避ける。 1．基礎培地1ビン（10.7g）を精製水約950mLに加えよく撹拌し、・有効期間は、製造後3年（使用期限を外箱に表示）溶解する。 2．炭酸水素ナトリウム1ビン（2.2g）を加え溶解し、全量1,000mLにメスアップする。 3．低吸着性メンブランフィルター、孔径0.2～0.22μm（東洋濾紙製Cat.No.11020004、ミリポア製Cat.No.GVWP04700 など）で濾過滅菌する。〔包装内容〕 SS1100 エス・クロンSF-B（粉末1L用）・基礎培地 10.7g×1 ・炭酸水素ナトリウム 2.2g×1 ・添加剤 10mL×1 ・ウシアルブミン10％溶液 10mL×1 4．濾過後の基礎培地1,000mLに添加剤1ビン（10mL）を無菌的に加える。 5．必要に応じてウシアルブミン10％溶液を無菌的に加える。〔商品情報お問い合わせ先〕エーディア株式会社カスタマーサポートセンター 1ビン（10mL）を基礎培地1,000mLに加えた場合、アルブミン〒101‐0032 東京都千代田区岩本町 1‐10‐6 の最終濃度は約0.1％（1mg/mL）となる。 TEL: 0120-921-207 FAX: 03-3864-5644 6．密栓して冷蔵保存（2～10℃）する。 ○ 使用例 1. 通常維持（血清添加培地）の細胞をハンクス液またはエス・製造販売元 * クロンSF-Bで2～3回遠心洗浄（900～1,300rpm、5分間）して血清成分を除く。 2. 洗浄した細胞をエス・クロンSF-Bに再浮遊させ、5×10 4 ～ 1×10 5 Cells/mLの細胞密度に再調整する。 3. 37℃、5～7％炭酸ガスインキュベーター内で培養する。製造元コージンバイオ株式会社埼玉県坂戸市千代田 5-1-3